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乙酸阴道热敏凝胶剂对人VK2/E6E7细胞损伤的研究

孙冰;王玉柱;黄超;田芳;夏敏杰;胡晶莹;李卫华

摘要: 目的 探讨乙酸阴道热敏凝胶剂(Acid-TISG)对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)损伤等影响.方法 Acid-TISG和阳性对照市售壬苯醇醚冻胶剂(N-9 jelly)分别按不同稀释浓度0.04~200 mg/ml与VK2/E6E7细胞共培养4h,用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值和治疗指数(therapeutic index,TI).VK2/E6E7细胞与Acid-TISG 10~100 mg/ml(临床拟用量1~10倍)和市售N-9 jelly 4 mg/ml(临床用量0.1倍)分别作用4h,用ELISA试剂盒方法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率(%);丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量;白介素(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 MTT实验结果表明,Acid-TISG和市售N-9 jelly对细胞存活率具有抑制作用,且呈现剂量-效应关系(r=0.981,P=0.003和r=0.991,P=0.009),Acid-TISG的IC50和TI 值分别为106.32 mg/ml和612.72,市售N-9 jelly的IC50和TI值分别为0.441 mg/ml和5.73.与空白凝胶组相比,Acid-TISG的低、中浓度10和50 mg/ml(临床拟用量的1和5倍)未见细胞损伤和凋亡,但高浓度100 mg/ml(临床拟用量10倍)作用4h,VK2/E6E7细胞LDH释放率和MDA含量显著升高(P<0.01),GSH含量明显降低(P<0.01).IL-6和TNF-α水平的增高与VK2/E6E7细胞晚期凋亡/坏死细胞增多呈正相关(r=0.925,P<0.05),具有浓度依赖性.结论 高浓度Acid-TISG与低浓度市售N-9 jelly对VK2/E6E7细胞有相似的氧化损伤和凋亡作用,就氧化应激程度来看,市售N-9 jelly比 Acid-TISG高100倍,这与TI值相一致,提示Acid-TISG对人阴道黏膜上皮细胞的毒性明显较小,安全性更高.

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