诱导型一氧化氮合酶反义RNA重组腙相关病毒载体的构建
摘要： 目的 应用分子克隆技术构建携带诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义基因片断的重组腺病毒载体(rAAv-AsiNOS).方法 应用RT-PCR技术扩增iNOS目的 基因片断,EcoRI和Xba I内切酶分别双酶切pAAv-MCS质粒和iNOS基因,经过胶回收和纯化后,住T4连接酶作用下,构建rAAV-AsiNOS重组质粒,并转化到感受态细菌XL-10中,进行鉴定和测序,293细胞病毒包装,重组腺相关病毒载体大量扩增,滴度和感染率的测定以及浓缩和纯化.结果 从SD大鼠脑缺血区域中扩增的iNOS特异性片段大小分别为361bp;经双酶切和连接成重组质粒rAAv-AsiNOS;PCR鉴定结果显示重组质粒rAAV-AsnNOS目的 基因产物特异性片段大小为593bp;基因测序结果显示iNOS基因片段分别反向克隆到pAAV的MCS,成功地构建携带反义iNOS基因的重组质粒rAAv-AsiNOS;经测算病毒原液的滴度为(6～12)×107个/ml,对PCI2细胞的感染率约为70%;分离浓缩和纯化重组腺相关病毒载体,获得较高的病毒滴度,均约2×1010个病毒颗粒/ml,去除腺病毒等影响因素.结论 成功构建携带iNOS反义基因的腺相关病毒载体,测序证实iNOS基因片断分别反向克隆到的腺相关病毒载体上;证实重组腺相关载体能够传染PCI2细胞,转染率为70%.
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腹部创伤247例临床分析
本文对10年收治247例进行临床分析,多发伤占51.8%,入院伴休克占42%.手术治疗211例,死亡率4.4%.作者认为,严重多发伤不宜作过多的辅助检查;腹腔穿刺仍是基层医院诊断腹外伤简便、有效的手段;腹腔探查不能满足某一脏器损伤而忽视全面探查,警惕位于腹膜后的十二指肠损伤;合并脊柱、骨盆骨折的多发伤尽可能避免阴生探查;低血容量休克和颅脑损伤的颅高压症同时存在,应抗休克与降颅高压同时进行.
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68例多发性硬化的诱发电位改变观察
多发性硬化(MS)是中枢神经系统的脱髓鞘疾病,在我国并不少见.由于MS的病症无特异性,在诊断上有一定难度,诱发电位(EP)有助于临床诊断.现就68例MS患者的EP检查情况总结如下.
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葡萄糖酸锌对反复呼吸道感染患儿免疫功能的影响(附22例报告)
反复呼吸道感染(RRTI)是小儿常见病之一,与小儿生理解剖特点,免疫功能,营养状况及微量元素有密切相关.本文通过观察葡萄糖酸锌对RRTI患儿治疗前后外周血总T淋巴细胞(CD.),T淋巴细胞亚群(CD4、TH、CD8、Ts)、CD4/CDs比值,血清IgG、IgA、IgM的变化,研究葡萄糖酸锌对RRTI免疫功能的调节作用.
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红细胞生成素改善血液透析患者血管的Na+-K+ATPase α1亚基表达
目的探讨红细胞生成素(rHuEPO)治疗慢性肾功能衰竭血液透析患者对血管的Na+-K+ATPase α1亚基表达的影响.方法选择21例患者应用rHuEPO治疗,17例应用输血治疗.采用RT-PCR方法观察两组治疗后左桡动脉Na+-K+ATPase α1mRNA表达,同时测定治疗前、后红细胞膜Na+-K+ATPase活性和颈动脉内膜-中层厚度.结果rHuEPO组Na+-K+ATPase aimRNA表达上调,Na+-K+ATPase活性升高,而输血组未见改变.结论rHuEPO能改善Na+-K+ATPase α1 mRNA表达.
关键词： 红细胞生成素 血液透析 Na+-K+ATPase α1亚基 -
硝普钠加小剂量多巴胺治疗心力衰竭38例疗效观察
心力衰竭是影响各种心脏病预后的独立危险因素.为探讨硝普钠治疗的有效性和安全性,我们将76例心衰患者随机分为两组,分别予以硝普钠加小剂量多巴胺和硝酸甘油加小剂量多巴胺静脉给药治疗,并观察其疗效,现报告如下.
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改良小梁切除术治疗青光眼疗效观察
小梁切除术是治疗青光眼的手术方法之一,是一种具有代表性的滤过性手术方法,且具有适应症广、疗效高、并发症少等优点.小梁切除的目的是建立一个眼外引流房水通道,使眼压下降.但纤维组织增生、引流口瘢痕粘连常造成新通道引流受阻致手术失败.笔者对传统小梁切除术加以改进,治疗14例16眼青光眼疗效确切,报告如下.
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自制钉板内固定治疗股骨粗隆部骨折63例
我院自1990年以来运用自制钉板内固定治疗股骨粗隆部骨折63例,并进行随访.结果骨折愈合时间平均2.5月,无死亡病例,无螺钉、钢板折断现象,术肢轻度外旋4例,髋内翻3例,螺钉尖穿破股骨头软骨面1例,并发症支生率低.作者认为该方法操作简便,固定可靠,适于各类医院开展.
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思密达佐治小儿腹泻92例疗效观察
我们自1997年1月～1997年12月,采用思密达(法国博福一益普生制药集团研制)佐治小儿腹泻,取得较好疗效,现报道如下.
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大剂量静脉注射丙种球蛋白对儿童免疫性血小板减少性紫癜的治疗探讨
免疫性血小板减少性紫癜(简称ITP)是儿童常见的出血性疾病.我院于1983年1月～1996年12月经临床、血象和骨髓象确诊322例,其中32例应用静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗,现着重探讨其治疗ITP的应用价值.
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老年人慢性硬膜下血肿43例分析
目的为进一步提高老年人慢性硬膜下血肿的诊疗水平.方法通过对43例老年人慢性硬膜下血肿的病例分析,该组患者均经CT及MRI明确诊断,治疗方法均采用颅骨钻孔引流.结果本组43例,痊愈38例,5例拨管后仍有少量积液,3个月后CT复查脑复位、积液消失.结论治疗慢性硬膜下血肿,大部分经颅骨钻引流可以治愈,个别情况才行开颅血肿清除术.
