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氧化石墨烯纳米疫苗的免疫应答研究

曹凤强;闫梦梦;刘怡佳;王海;马桂蕾

摘要: 目的 研究氧化石墨烯(GO)纳米疫苗在小鼠体内诱导产生的特异性免疫应答.方法 将纳米GO与模型抗原卵清蛋白(OVA)共孵育制备得到负载OVA的GO纳米免疫复合物(GO-OVA).采用原子力显微镜和粒度分析仪对纳米GO进行表征;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测纳米GO对小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)的细胞毒性;荧光染色观察小鼠BMDCs对GO-OVA纳米免疫复合物的摄取.将C57BL/6小鼠按体质量随机区组法分为OVA组、铝佐剂OVA(Al-OVA)组和GO-OVA组(每组6只)进行体内免疫,酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测小鼠血清中OVA特异性抗体IgG(总IgG、IgG1和IgG2a)水平,流式细胞术检测小鼠脾脏和腹股沟淋巴结内的T淋巴细胞亚群.结果 制备得到的纳米GO平均粒径为(294.34±4.68)nm,多分散系数为0.208.纳米GO对小鼠BMDCs的毒性较小.体外细胞实验结果表明,GO-OVA纳米免疫复合物可被小鼠BMDCs有效摄取.GO-OVA纳米免疫复合物免疫小鼠后,诱导产生的血清特异性IgG 抗体滴度与铝佐剂相当,差异无统计学意义(P>0.05),且以辅助性T细胞(Th)1型应答为主.GO-OVA组小鼠脾脏和腹股沟淋巴结内的CD4+T和CD8+T淋巴细胞比例均明显高于OVA组和A1-OVA组,差异均具有统计学意义(均P<0.05).结论 GO-OVA纳米免疫复合物能诱导小鼠同时产生体液和细胞免疫应答,这为研制新型疫苗载体和佐剂提供了依据.

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