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应用双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应方法同时检测A组轮状病毒和星状病毒

徐德顺;陈莉萍;朱晓娟

摘要: 目的 建立能同时检测轮状病毒A群和星状病毒双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法.方法 根据上述2种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重rRT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证.结果 所建立的双重rRT-PCR检测方法对轮状病毒A群和星状病毒具有很好的特异性和重复性,轮状病毒A群灵敏度达到每个反应101拷贝,星状病毒灵敏度达到每个反应102拷贝.128例粪便标本中,轮状病毒A群和星状病毒的检出率分别为18.0%和3.1%.通过基因测序比对结果相符.结论 构建可用于轮状病毒A群及星状病毒的双重rRT-PCR方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查.

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