Female ageing affects the DNA repair capacity of oocytes in IVF using a controlled model of sperm DNA damage in mice.

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Abstract:

STUDY QUESTION:Does female ageing have a negative effect on the DNA repair capacity of oocytes fertilised by spermatozoa with controlled levels of DNA damage? SUMMARY ANSWER:Compared to oocytes from younger females, oocytes from older females have a reduced capacity to repair damaged DNA introduced by spermatozoa. WHAT IS KNOWN ALREADY:The reproductive lifespan in women declines with age predominantly due to poor oocyte quality. This leads to decreased reproductive outcomes for older women undergoing assisted reproductive technology (ART) treatments, compared to young women. Ageing and oocyte quality have been clearly associated with aneuploidy, but the range of factors that influence this change in oocyte quality with age remains unclear. The DNA repair activity prior to embryonic genomic activation is considered to be of maternal origin, with maternal transcripts and proteins controlling DNA integrity. With increasing maternal age, the number of mRNAs stored in oocytes decreases. This could result in diminished efficiency of DNA repair and/or negative effects on embryo development, especially in the presence of DNA damage. STUDY DESIGN, SIZE, DURATION:Oocytes from two age groups of 30 super-ovulated female mice (young: 5-8 weeks old, n = 15; old: 42-45 weeks old, n = 15) were inseminated with sperm from five males with three different controlled DNA damage levels; control: ≤10%, 1 Gray (Gy): 11-30%, and 30 Gy: >30%. Inseminated oocytes (young: 125, old: 78) were assessed for the formation of zygotes (per oocyte) and blastocysts (per zygote). Five replicates of five germinal vesicles (GVs) and five MII oocytes from each age group were analysed for gene expression. The DNA damage response (DDR) was assessed in a minimum of three IVF replicates in control and 1 Gy zygotes and two-cell embryos using γH2AX labelling. PARTICIPANTS/MATERIALS, SETTING, METHODS:Swim-up sperm samples from the cauda epididymidis of C57BL6 mice were divided into control (no irradiation) and 1- and 30-Gy groups. Treated spermatozoa were irradiated at 1 and 30 Gy, respectively, using a linear accelerator Varian 21iX. Following irradiation, samples were used for DNA damage assessment (Halomax) and for insemination. Presumed zygotes were cultured in a time-lapse incubator (MIRI, ESCO). Gene expression of 91 DNA repair genes was assessed using the Fluidigm Biomark HD system. The DNA damage response in zygotes (6-8 h post-fertilisation) and two-cell embryos (22-24 h post-fertilisation) was assessed by immunocytochemical analysis of γH2AX using confocal microscopy (Olympus FV1200) and 3D volumetric analysis using IMARIS software. MAIN RESULTS AND THE ROLE OF CHANCE:The average sperm DNA damage for the three groups was statistically different (control: 6.1%, 1 Gy: 16.1%, 30 Gy: 53.1%, P < 0.0001), but there were no significant differences in fertilisation rates after IVF within or between the two age groups [(young; control: 86.79%, 1 Gy: 82.75%, 30 Gy: 76.74%) (old; control: 93.1%, 1 Gy: 70.37%, 30 Gy: 68.18%) Fisher's exact]. However, blastocyst rates were significantly different (P < 0.0001) among the groups [(young; control: 86.95%, 1 Gy: 33.33%, 30 Gy: 0.0%) (old; control: 70.37%, 1 Gy: 0.0%, 30 Gy: 0.0%)]. Between the age groups, 1-Gy samples showed a significant decrease in the blastocyst rate in old females compared to young females (P = 0.0166). Gene expression analysis revealed a decrease in relative expression of 21 DNA repair genes in old GV oocytes compared to young GV oocytes (P < 0.05), and similarly, old MII oocytes showed 23 genes with reduced expression compared to young MII oocytes (P < 0.05). The number of genes with decreased expression in older GV and MII oocytes significantly affected pathways such as double strand break (GV: 5; MII: 6), nucleotide excision repair (GV: 8; MII: 5) and DNA damage response (GV: 4; MII: 8). There was a decreased DDR in zygotes and in two-cell embryos from old females compared to young regardless of sperm treatment (P < 0.05). The decrease in DNA repair gene expression of oocytes and decreased DDR in embryos derived from older females suggests that ageing results in a diminished DNA repair capacity. LARGE-SCALE DATA:N/A. LIMITATIONS, REASONS FOR CAUTION:Ionising radiation was used only for experimental purposes, aiming at controlled levels of sperm DNA damage; however, it can also damage spermatozoa proteins. The female age groups selected in mice were intended to model effects in young and old women, but clinical studies are required to demonstrate a similar effect. WIDER IMPLICATIONS OF THE FINDINGS:Fertilisation can occur with sperm populations with medium and high DNA damage, but subsequent embryo growth is affected to a greater extent with aging females, supporting the theory that oocyte DNA repair capacity decreases with age. Assessment of the oocyte DNA repair capacity may be a useful diagnostic tool for infertile couples. STUDY FUNDING/COMPETING INTEREST(S):Funded by the Education Program in Reproduction and Development, Department of Obstetrics and Gynaecology, Monash University. None of the authors has any conflict of interest to report.

使用小鼠精子 DNA 损伤的受控模型,女性衰老影响 IVF 中卵母细胞的 DNA 修复能力。

c

摘要:

研究问题: 女性衰老是否会对 DNA 损伤水平受控的精子受精的卵母细胞的 DNA 修复能力产生负面影响? 总结答案: 与年轻女性的卵母细胞相比,老年女性的卵母细胞修复精子引入的受损 DNA 的能力降低。 已知的是: 女性的生殖寿命随着年龄的增长而下降,主要是由于卵母细胞质量差。与年轻女性相比,这导致接受辅助生殖技术 (ART) 治疗的老年女性的生殖结局降低。衰老和卵母细胞质量与非整倍体明显相关,但影响卵母细胞质量随年龄变化的因素范围仍不清楚。胚胎基因组激活前的 DNA 修复活性被认为是母体起源的,母体转录本和蛋白质控制着 DNA 的完整性。随着母亲年龄的增加,卵母细胞中储存的 mrna 数量减少。这可能导致 DNA 修复效率降低和/或对胚胎发育的负面影响,特别是在存在 DNA 损伤的情况下。 研究设计、大小、持续时间: 来自两个年龄组的 30 只超排卵雌性小鼠的卵母细胞 (年轻: 5-8 周龄,n = 15; 老: 42-45 周龄,n = 15) 用来自 5 个具有三种不同受控 DNA 损伤水平的男性的精子授精; 对照: ≤ 10%,1 灰色 (Gy): 11-30%,30 Gy:> 30%。评估授精卵母细胞 (young: 125,old: 78) 合子 (每个卵母细胞) 和囊胚 (每个受精卵) 的形成。分析每个年龄组 5 个生发泡 (GVs) 和 5 个 MII 卵母细胞的 5 个重复的基因表达。使用 γ h2ax 标记在对照组和 1 Gy 受精卵和双细胞胚胎中至少 3 次 IVF 重复中评估 DNA 损伤反应 (DDR)。 参与者/材料、设置、方法: C57BL6 小鼠附睾尾的游泳精子样本分为对照 (不照射) 和 1-和 30-Gy 组。使用直线加速器 Varian 21iX 分别在 1 和 30 Gy 下照射处理后的精子。辐照后,样本用于 DNA 损伤评估 (Halomax) 和授精。假定的受精卵在延时培养箱 (MIRI,ESCO) 中培养。使用 Fluidigm Biomark HD 系统评估了 91 个 DNA 修复基因的基因表达。受精卵 (受精后 6-8 h) 和双细胞胚胎 (受精后 22-24 h) 的 DNA 损伤反应使用共聚焦显微镜 (Olympus FV1200) 通过 γ h2ax 的免疫细胞化学分析和使用 IMARIS 软件的 3D 体积分析进行评估。 主要结果和机会的作用: 三组的平均精子 DNA 损伤有统计学差异 (对照: 6.1%,1 Gy: 16.1%,30 Gy: 53.1%,p  

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HUMAN REPRODUCTION

研究方向:医学-妇产科学
IF:15.61
IF值的bai意思是影响因子。是汤森路透(duThomson Reuters)出品的期刊引证报告zhi(Journal Citation Reports,JCR)中的一项数据。 影响因子dao目前的计算方法是:IF=C/(M+N)。以2017年IF的计算为例,M为该期刊2015年发表的文章数量,N为该期刊2016年发表的文章数量,C为该期刊2015和2016年两年发表的文章在2017年这一年被引用的
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HUMAN REPRODUCTION 期刊简介

英文简介:

Human Reproduction features full-length peer-reviewed papers reporting original research clinical case histories as well as opinions and debates on topical issues. Papers published cover the scientific and medical aspects of reproductive physiology and pathology endocrinology andrology gonad function gametogenesis fertilization embryo development implantation pregnancy genetics genetic diagnosis oncology infectious disease surgery contraception infertility treatment psychology ethics and social issues. The highest scientific and editorial standard is maintained throughout the journal along with a rapid rate of publication.

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中文简介

人类生殖功能的特点是全文同行评议的论文,报告了原始研究的临床病例历史,以及对专题问题的看法和辩论。论文发表涵盖了生殖生理学和病理学的科学和医学方面的内分泌学、雄激素学、性腺功能配子发生、受精、胚胎发育、植入、遗传学诊断、肿瘤学、传染病、外科、避孕、不孕治疗、心理伦理和社会问题。最高的科学和编辑标准贯穿整个期刊,出版速度也很快。

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#152
Ginekologia i Poloznictwo 0.05 第10百分位
#153
Journal fur Gynakologische Endokrinologie 0.04 第8百分位
#154
Journal of SAFOG 0.04 第8百分位
#155
Archives of Perinatal Medicine 0.03 第6百分位
#156
Gynaecologia et Perinatologia 0.03 第6百分位
#157
Gynakologische Praxis 0.03 第6百分位
#158
Obstetrics and Gynaecology Forum 0.03 第6百分位
#159
Seksuologia Polska 0.03 第6百分位
#160
Turkiye Klinikleri Jinekoloji Obstetrik 0.03 第6百分位
#161
Contemporary Ob/Gyn 0.02 第4百分位
#162
Bangladesh Journal of Obstetrics and Gynecology 0.01 第3百分位
#163
Obstetrica si Ginecologie 0.01 第3百分位
#164
Case Reports in Perinatal Medicine 0.00 第1百分位
#165
Journal fur Urologie und Urogynakologie 0.00 第1百分位
#166
Perinatology 0.00 第1百分位
#167
Schweizer Zeitschrift fur Gynakologie 0.00 第1百分位
#168
Turk Jinekolojik Onkoloji Dergisi 0.00 第1百分位

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