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人外周血单核细胞体外诱导成熟和激活的树突状细胞

史敦云;张琼丽;李明;汪明春;李玉珠

摘要: 目的建立从人外周血单核细胞体外诱导培养成熟和激活的树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法.方法从健康成人外周血分离单核细胞(PBM),加入粒单系集落刺激因子(GM-CSF)100 μg/L+重组白细胞介素-4( rhIL-4 ) 500 kU/L体外培养14 d, 并于培养结束前1 d加入或不加入肿瘤坏死因子α ( TNF-α )(100 μg/L),流式细胞仪测定树突状细胞(DC)的主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ类分子、粘附分子和协同刺激分子,分析其成熟度和激活度.结果 PBM经GM-CSF+rhIL-4诱导培养14 d后,细胞成簇,表型为CD83 22.6%、CD86 55.5%、CD11c 36.1%、CD64 3.2%、人类白细胞抗原(HLA)-DR 13.4%;培养结束前1 d加入TNF-α诱导后,细胞表型为CD83 81.5%、CD86 99.3%、CD11c 98.8%、CD64 3.4%、HLA-DR 88.3%.结论 GM-CSF+rhIL-4诱导PB-M 14 d,可获得大量不成熟的DC,该体系有利于DC扩增;培养结束前1 d加入TNF-α,DC成熟度高,激活性好,适合于肿瘤免疫治疗.

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