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化淤祛痰方药含药血清对HepG2细胞胆固醇代谢相关基因表达的影响

贾连群;杨关林;罗莹;任路;冯峻屹;崔勇;陈阳

摘要: 目的 探讨化淤祛痰方药含药血清对HepG2细胞胆固醇摄取和合成相关基因表达的影响.方法 体外培养HepG2细胞,随机分为5组,①正常对照组:仅用1640完全培养基培养,不加任何药物.②ox - LDL刺激组:培养液中加入终浓度为50μg/ml ox- LDL;③含药血清低剂量组;④含药血清中剂量组;⑤含药血清高剂量组.③~⑤组细胞分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为50μg/ml ox - LDL,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定.采用MTT法检测细胞活性;胆固醇氧化酶终点法检测HepG2细胞总胆固醇含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析3 -羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)和B类Ⅰ型清道夫受体(SR-B Ⅰ)基因表达的变化.结果 50μg/ml ox - LDL作用于HepG2细胞使其细胞活力显著下降,细胞总胆固醇含量显著升高,而化淤祛痰方药含药血清可以提高细胞的存活率,降低细胞内胆固醇含量.RT - PCR结果表明经ox - LDL诱导HepG2细胞HMGCR mRNA表达显著减少,而SR-B Ⅰ mRNA表达显著增加.不同浓度的化淤祛痰方药含药血清均能显著降低HMGCR mRNA水平,显著升高SR-B ⅠmRNA水平.结论 化淤祛痰方药可通过降低HMGCR水平和升高SR-B Ⅰ水平从而促进胆固醇逆向转运,这可能是其调控脂质代谢发挥抗AS的作用机制之一.

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