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NeuroD1基因过表达对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

张仁坤;李晓红;陈星;王景景;涂悦;张赛

摘要: [目的]神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一群能自我更新并具有多种分化潜能的细胞,可分化成神经元、少突胶质细胞和星形细胞.NSCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究神经分化因子1(neuronal differentiation1,NeuroD1)过表达对NSCs增殖和分化的影响.[方法]分离培养原代大鼠NSCs,免疫荧光染色鉴定NSCs.将携带NeuroD1基因的逆转录病毒转染NSCs,QPCR检测NeuroD1过表达神经干细胞系的构建.QPCR和MTT检测过表达NeuroD1对NSCs增殖和分化的影响;光镜下观察分化细胞形态变化.[结果]第3代NSCs经免疫荧光染色证实所培养细胞为NSCs,可分化为神经元和星形胶质细胞.QPCR结果显示NeuroD1 mRNA在NSCs-NeuroD1组表达高,与其他两组有统计学差异(P<0.05). QPCR结果显示MAP2在NSCs-NeuroD1组表达高,与其他两组有统计学差异(P<0.05).MTT结果显示NSCs-NeuroD1组细胞增殖水平高,与其他两组有统计学差异(P<0.05).光镜下可见NSCs-NeuroD1组细胞多分化为神经元细胞.[结论]成功构建NeuroD1过表达神经干细胞系.NeuroD1可促进NSCs增殖和向神经元方向分化.

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