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云南澜沧巴尔通体的分离鉴定和序列分析

杨发莲;白鹤鸣;杨慧;于彬彬

摘要: [目的]调查澜沦家鼠中巴尔通体的带菌状况,分离培养鉴定并进行序列分析. [方法]将采获的家鼠血接种于含5%去纤维兔血脑心浸液琼脂培基上,置于35℃含5%CO2培养箱中培养分离巴尔通体.同文献[1]报道一致挑选疑似菌落涂片革兰染色镜检进行初筛,镜下有革兰阴性菌的用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增特异基因片段[枸橼酸合酶基因(gltA)的379 bp片段],电泳图中出现目标带即判断为阳性菌株.然后从中随机选出5株作电镜观察并且对其PCR产物测序,将所测核酸序列进行相似性比较及序列分析.[结果]从94份鼠血分离培养出疑似菌落50株,革兰染色镜检均见阴性小杆菌,经PCR证实为阳性37林.电镜下菌细胞呈短杆状、宽0.2~0.3 μm、长0.8~1.0 μm、菌壁较厚,无鞭毛.5株菌间相似性为93%~95%,其中1株与我国北京从褐家鼠分离的在Gen Bank中的编号是DQ884394的菌株相似性为99%,其他4株与Heller,R.S.等从以色列褐家鼠中分离的菌株(B.tribocorum)在GenBank中的编号是AJ005494的相似性分别为99%、99%、94%、94%. [结论]澜沧家鼠中存在巴尔通体感染,说明B.tribocorum为该地的主要优势菌.

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