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利用原位分子杂交结合酪酰胺放大检验军团菌性肺炎组织嗜肺军团菌的研究

吴守芝;李恒新;黄河清;张金;张锋

摘要: 目的 利用针对嗜肺军团菌种特异性16S rRNA和军团菌致病基因一巨噬感染增强因子(mip)序列探针原位分子杂交结合酪酰胺放大技术(Tyramide signal amplification method,TSA)建立军团菌性肺炎组织中嗜肺军团菌的快速、特异性检验方法.方法 设计特异性针对嗜肺军团菌种特异性16S rRNA、mip序列探针,分别采用荧光、地高辛标记探针对嗜肺军团菌性豚鼠肺炎模型支气管肺泡灌洗液、肺组织进行原位杂交结合TSA检验嗜肺军团菌.结果 荧光原位杂交显示支气管肺泡灌洗液细胞中存在16S rRNA、mip序列双杂交阳性杆状细菌;地高辛标记原位杂交结合TSA显示肺组织中也存在杂交阳性杆状细菌,分布于肺泡壁与细胞内,整个检验周期小于24 h.结论 结果表明采用荧光、地高辛标记探针结合TSA的原位杂交能迅速准确灵敏检验出肺组织、支气管肺泡灌洗液中的嗜肺军团菌,是一种快速、特异性检验方法.

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