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相对定量质谱技术检测血清标志物方法部分关键点的优化对比和探讨

何晓;何敏;李洪涛;周怡;李翠萍;李刚;臧宁;谢志春

摘要: 目的 对iTRAQ结合质谱相对定量检测血清标志物实验关键点进行优化.方法 采用正常人血清样本,对iTRAQ-LC-MS/MS检测血清标志物实验过程中,多种低丰度蛋白除盐浓缩方法、低丰度蛋白定量方法以及点靶仪反相洗脱效果进行比较.结果 三种除盐浓缩方法中,蛋白除盐柱处理后所得蛋白得率高(P<0.01);五种蛋白定量方法中,Nanodrop2000测试仪测定低丰度蛋白的方法耗时少,偏离度小(P<0.01);两种反向C18分离柱中,Magic柱洗脱效果更佳.结论 优化后的实验条件有利于提高血清样本中蛋白的检出率.

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