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腺病毒siRNA沉默Raf-1基因抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚

郑亚萍;王兴红

摘要: 目的 研究Raf-1 siRNA重组腺病毒载体对大鼠心肌肥厚的作用并探讨其机制.方法 构建Raf-1腺病毒siRNA载体,大鼠随机分为正常对照组、心肌肥厚组、无关siRNA组、Raf-1 siRNA干预组,皮下注射异丙肾上腺素(ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,无关siRNA组及Raf-1 siRNA干预组注射ISO后,分别经心包腔注射重组腺病毒pAd-siCon及pAd-siRaf-1,4周后染色测定全心重指数(HWI)、心肌细胞横截面积(CSA)、心肌间质胶原容积分数(CVF)及血管周围胶原面积(PVCA),western blot检测心肌Raf-1、NF-κB及ERK1/2蛋白表达,RT-PCR检测TNF-α、MCP-1、TGF-β 1 mRNA表达.结果 与心肌肥厚组相比,Raf-1 siRNA干预组可降低大鼠HWI、CSA、CVF及PVCA,下调Raf-1、NF-κB、ERK1/2蛋白及TNF-d、MCP-1、TGF-β1 mRNA表达;无关siRNA组与心肌肥厚组相比无明显差异.结论 Raf-1 siRNA重组腺病毒载体能减轻大鼠心肌肥厚,其作用可能与抑制Raf-1/NF-κ B、Raf-1/ERK1/2信号转导及下调肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β (TGF-β)表达相关.

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