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MC004对大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响

骆永伟;施畅;吴纯启;王全军;柳艳青;杨保华;胡中慧;张玉杰;廖明阳

摘要: 目的: 探讨新型抗肿瘤化合物MC004对胚胎发育的影响.方法:从孕13日龄大鼠胚胎中采集中脑细胞,将其稀释到细胞密度为5×106/ml的细胞悬液,细胞存活率>95%.6孔板和96孔板的每个孔分别注入10 μl细胞悬液,在37℃ 5%二氧化碳培养箱孵化2 h.孵化后,6孔板每孔分别加入不同浓度的MC004(5、2.5、1.25、0.625、0.312 5、0.156 25、0.078、0.039、0.019 5、0.009 8、0.004 9 μg/ml)终体积为2 ml,96孔板的每个孔分别加入不同浓度的MC004(5、2.5、1.25、0.625、0.312 5、0.156 25、0.078、0.039、0.019 5μg/ml)终体积为200 μl,对照组采用相应体积的Ham's F-12完全培养基,体外培养5 d后,弃培养液,细胞固定和染色.在光学显微镜下计数6孔板内微团集落数目,计算细胞分化半数抑制浓度.用酶标仪570 nm波长处测定96孔板各孔吸光值,计算细胞增殖半数抑制浓度.结果:不同MC004剂量组细胞集落和集落间神经纤维束减少,有明显量效关系.MC004半数细胞分化抑制浓度为0.062 4 μg/ml,MC004半数细胞增殖抑制浓度为0.196 3 μg/ml.结论:MC004在体外能非特异性地抑制细胞增殖和分化,可能具有致畸作用.

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