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淋球菌mtrR调控区突变片段的体外重组和鉴定

林能兴;黄长征;连昕;张丽霞;涂亚庭;康建;朱里

摘要: 目的:体外重组一段突变DNA片段,用其转染临床淋球菌株,产生特异位点-mtrR调控区突变的转染株.方法:采用基因剪接的技术,通过两步PCR反应完成DNA片段的体外定点突变,突变的EF片段用于后续淋球菌转染实验.结果:经重组的EF分子与淋球菌基因组DNA的相应片段并不完全匹配,测序结果显示,对应mtrR起始密码子上游第45位到第54位碱基之间有9 bp大小的片段缺失.结论:证实EF分子即为预期设计的突变DNA片段.

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