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糖基化终产物对雪旺细胞体外功能的影响及其机制的研究

张媚;张临洪

摘要: 目的 研究糖基化终产物(AGEs)对离体大鼠坐骨神经来源雪旺细胞功能的影响及其炎性因子水平的改变,为糖尿病患者周围神经病变提供新的潜在治疗靶点.方法 选取新生3 d的SD乳鼠,原代分离纯化雪旺细胞,并采用免疫化学染色鉴定原代细胞.将原代培养的雪旺细胞分为7组,分别给予单纯培养基(空白对照组)、20 μg/ml牛血清清蛋白(BSA)、20 μg/ml AGEs、50 μg/ml BSA、50 μg/ml AGEs、100 μg/ml BSA和100 μg/ml AGEs干预后,检测各组干预后雪旺细胞的增殖能力、迁移细胞数、凋亡率以及Caspase-3 mRNA表达水平.将细胞分为4组,分别予以单纯培养基(空白对照组)、50 μg/ml BSA、50 μg/ml AGEs和50 μg/ml AGEs+10 μg/ml抗AGEs特异性受体(RAGE)抗体处理,检测核因子κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)水平.结果 (1)不同浓度的BSA组雪旺细胞的增殖能力、迁移细胞数、凋亡率、Caspase-3 mRNA与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而不同浓度的AGEs组雪旺细胞增殖能力、迁移能力较相同浓度的BSA组及空白对照组减弱,雪旺细胞凋亡率及Capases-3 mRNA表达水平较相同浓度的BSA组及空白对照组增加,差异均有统计学意义(P<0.05);且不同浓度的AGEs组间各项指标比较,差异亦有统计学意义(P<0.05).(2)与空白对照组比较,50 μg/ml BSA组干预后NF-κB活性及TNF-α、IL-6水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而50 μg/ml AGEs组干预后NF-κB活性及TNF-α、IL-6水平较BSA组及空白对照组增高,差异均有统计学意义(P<0.05);但AGEs+抗RAGE抗体组上述因子的表达与BSA组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 AGEs能够抑制体外培养的雪旺细胞的增殖、迁移能力并诱导其凋亡,该抑制作用可能是通过促进炎性因子表达从而增加对细胞的损害来实现的.

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