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六君子汤提取物抑制食管癌 Ec9706细胞增殖及其对信号转导和转录活化因子3信号通路的影响

崔姗姗；高小玲；王慧慧；吴耀松；尹素改；陈玉龙
关键词： 食管肿瘤 六君子汤 提取物 乙酸乙酯 STAT3

摘要： 目的：研究六君子汤提取物对食管癌 Ec9706细胞增殖的抑制作用及其对信号转导和转录活化因子3（STAT3）信号通路的影响。方法于2013—2015年，采用70％乙醇提取六君子汤，正丁醇、乙酸乙酯及水提法过夜萃取，用 MTT 法观察提取物对 Ec9706细胞活性的影响，选取优提取部位，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法观察六君子汤乙酸乙酯部位对 Ec9706细胞分泌相关细胞因子〔包括白介素6（IL-6）、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）〕的影响，采用 Western - blotting 法测定六君子汤乙酸乙酯部位对食管癌 Ec9706细胞 STAT3和磷酸化 STAT3（p-STAT3）蛋白表达的影响。结果对照组、六君子汤70％乙醇部位、六君子汤正丁醇部位、六君子汤水提部位 Ec9706细胞 OD 值比较，差异有统计学意义（F ＝448.90，P ﹤0.01）。药物处理组对 Ec9706细胞生长的抑制效果依次为：六君子汤正丁醇部位﹥六君子汤70％乙醇部位﹥六君子汤水提部位。六君子汤乙酸乙酯部位 Ec9706细胞 OD 值比较，差异有统计学意义（F ＝19.78，P ﹤0.001）。在250μg/ ml 时，六君子汤70％乙醇部位、六君子汤正丁醇部位、六君子汤水提部位对 Ec9706细胞的抑制率分别为7.31％、23.24％、 - 25.07％，而在200μg/ ml 时，六君子汤乙酸乙酯部位对 Ec9706细胞的抑制率为77.03％，抑制效果明显优于其他部位，故筛选的有效部位为六君子汤乙酸乙酯部位。应用概率法计算六君子汤乙酸乙酯部位抑制率 IC35、IC50、IC70，代表低、中、高浓度，相应的浓度为63.08、93.00、133.70μg/ ml。对照组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组IL-6、TGF-β1、VEGF 水平比较，差异均有统计学意义（P ﹤0.01）；其中六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组IL-6、TGF-β1、VEGF 水平低于对照组（P ﹤0.05）。对照组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组 STAT3、p-STAT3表达水平比较，差异均有统计学意义（ P ﹤0.05）；其中六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组 STAT3、p-STAT3表达水平低于对照组（P ﹤0.05）。结论六君子汤不同试剂提取物中，乙酸乙酯提取物抑制食管癌细胞增殖作用强，其抑制作用可能与调节 STAT3信号通路有关。

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