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小剂量脂多糖诱导血管内皮细胞TLR4的表达

路玲;常文秀;曹书华;王勇强;高红梅

摘要: 目的:观察小剂量脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(ECV304)TOLL样受体4(TLR4)表达的影响.方法:体外培养ECV304细胞,分别与LPS及LPS+TLR4抗体进行孵育.MTT法检测细胞的增殖活性,免疫组化染色法检测细胞表面TLR4的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞核核内TLR4-mRNA及IL-8mRNA的表达.结果:LPS(10~50 ng/mL)刺激ECV304细胞24 h内,细胞增殖活性无明显变化(P > 0.05);而以100 ng/mL 刺激24 h后,细胞增殖活性明显降低(P< 0.05),TLR4抗体对此无明显拮抗作用.LPS能明显上调ECV304表达TLR4、TLR4-mRNA及IL-8mRNA,其中10 ng/mL的LPS在24 h时、50 ng/mL LPS在6~24 h时,TLR4表达具有统计学意义(P< 0.05);50 ng/mL的LPS刺激ECV304细胞在4 h及8 h 时,细胞核内TLR4mRNA 表达均明显升高(P < 0.05),而IL-8mRNA 表达在8 h 时明显升高(P < 0.05).TLR4 抗体对ECV304表达TLR4及TLR4-mRNA有拮抗作用(P< 0.05),对IL-8mRNA表达无明显拮抗作用(P> 0.05).结论:小剂量LPS可诱导ECV304细胞表达TLR4并引起细胞活化,TLR4抗体可抑制TLR4的表达,但不能抑制细胞的活化.

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