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两种培养条件对牙周膜干细胞生物学特性影响的对比研究

王飞翔;贺慧霞;刘嘉婧;贾雅丽

摘要: 目的:对比无血清培养基和含血清培养基对原代培养、分离的人牙周膜干细胞(Human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)生物学特性的影响,为基于hPDLSCs的临床应用研究和药物试验奠定基础.方法:分别用含血清和无血清培养基培养分离hPDLSCs,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞表型;免疫荧光染色、real-time PCR检测PDLSCs成骨、成脂分化诱导后相关特异性蛋白及基因表达.结果:采用无血清与含血清培养条件原代培养分离的hPDLSCs形态相似;但无血清培养基组细胞增殖力更强;两种培养条件培养的hPDLSCs表型相似,均表达CD105、CD44、CD166、CD73和CD90,不表达CD45、CD3、CD14、CD38、HLA-DR、CD31和CD34;且阳性表达vimentin、α-SMA和N-cadherin,阴性表达CK18和E-cadherin.无血清培养条件培养的hPDLSCs具有成骨、成脂潜能,且诱导效能强于含血清培养者.结论:无血清培养基能够在体外培养扩增hPDLSCs,并维持其干细胞特性.采用无血清培养条件培养hPDLSCs可能更适合其在细胞治疗和实验研究中应用.

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