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Notch通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙周膜细胞表达RANKL/OPG的影响

张驰;陈倩莹;赵雅静;高雳;赵川江

摘要: 目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCS)后Notch信号通路的表达及其对RANKL/OPG表达的影响.方法:酶消化法结合组织块法原代培养hPDLCs,取第三代至第五代细胞给予0.1、1、10μg/mlPg-LPS刺激72h,Real-time PCR检测RANKL/OPG mRNA的表达,并选择佳诱导浓度1μg/ml组,采用Real-time PCR检测Notch通路Notch1-2、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL-1以及Hey-1表达受体配体及目的基因表达.随后,以γ-分泌酶抑制剂DAPT预处理hPDLCs 1h,予1μg/ml Pg-LPS刺激72h后,Real-time PCR、Western-Bloting检测Noah通路目的基因Hey-1及RANKL/OPG mRNA、蛋白水平的表达.结果:1 μg/ml Pg-LPS可显著上调hPDLCs RANKL、Notch通路受体Notch4、配体DLL-1、Jagged-1及目的基因Hey-1的表达(P<0.05);而对OPG、Nocth1-2、Jagged-2 mRNA水平表达无明显影响(P>0.05).此外,γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制Pg-LPS诱导RANKL及Hey-1 mRNA及蛋白的表达上调,而仅对OPGmRNA表达有影响(P<0.05).结论:Notch信号通路参与调控Pg-LPS诱导的hPDLCs RANKL/OPG表达.

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