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重组人白细胞介素-2活化自然杀伤细胞对心肌梗死大鼠心功能的影响

王仲华;戴刚;周荣靓;匡泽民

摘要: 目的 验证心肌内注射重组人白细胞介素-2(rhIL-2)活化后的自然杀伤细胞(NK)是否能促进心肌梗死后血管新生和保护心肌功能.方法 体外提取NK细胞并使用rhIL-2活化,以未活化NK细胞为对照,测定rhIL-2-NK的杀伤能力.rhIL-2-NK与心肌微血管内皮细胞共培养,以5%多聚甲醛固定后的rhIL-2-NK为阴性对照组,NK细胞单独培养作为空白对照组,观察rhIL-2-NK对心肌微血管内皮细胞增殖的影响.大鼠心肌梗死后1h,随机分为3组,分别为rhIL-2-NK组、NK组、空白对照组,分别在其梗死区域注射NK、rhIL-2-NK和PBS,选取0、1、3、5、7和20 d6个时间点,通过定量PCR分析各组巨噬细胞趋化性和激活性因子(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)mRNA的表达水平.治疗结束后,免疫组织化学检测各组大鼠血小板内皮细胞黏附分子(CD31)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,并通过超声心动图检查、血液动力学测定、组织形态学分析来检测各组大鼠的心功能.结果 体外成功提取具有杀伤力的NK细胞,rhIL-2-NK体外促进心肌微血管内皮细胞的增殖,rhIL-2-NK组增殖数量比空白对照高40% (P <0.01).在大鼠心肌梗死治疗中,rhIL-2-NK组大鼠心肌MCP-1、TNF-α、IL-2、CD31和VEGF mRNA的表达水平均明显高于空白对照组(P均<0.01).超声心动图及组织形态学显示rhIL-2-NK组大鼠心功能得到改善,微血管密度平均为17.35±1.82,明显高于空白对照组的4.76±0.92 (P<0.01);左心室射血分数平均为(77.56±15.67)%,与假手术组[(85.35±13.34)%]接近,并高于空白对照组[(41.47±12.21)%,P<0.05].结论 在大鼠梗死心肌内注射rhIL-2-NK可促进血管新生,并终改善心功能.

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