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骨形态发生蛋白2在人心脏瓣膜间质细胞体外钙化中的作用

凌秋洋;吴婷;叶挺;苏兆亮;宗刚军

摘要: 目的 建立人心脏瓣膜间质细胞体外钙化模型,并观察人骨形态发生蛋白2(BMP-2)在心脏瓣膜间质细胞钙化中的作用.方法 体外培养人心脏瓣膜间质细胞后,将其分为2组:对照组在常规培养基础上,加用重组型人BMP-2蛋白;实验组在常规培养基础上加用钙化诱导剂,包括重组型人BMP-2蛋白、β甘油磷酸、L抗坏血酸和地塞米松.两组细胞均培养14 d,分别进行Von Kossa染色,并观察细胞钙化情况,建立心脏瓣膜间质细胞体外钙化模型.采用Western blot法检测两组细胞中细胞间黏附分子1、白细胞介素8、BMP-2和BMP-4的表达;采用ELISA法测定两组细胞分泌的BMP-2蛋白含量.结果 对照组细胞结构清晰,呈梭形放射状生长,Von Kossa染色阴性;实验组细胞核颜色变深,可见颗粒状沉积物分布在细胞周围,Von Kossa染色阳性,可见钙化的细胞形成结节.实验组细胞中的细胞间黏附分子1、白细胞介素8、BMP-2和BMP-4表达均高于对照组(P均<0.05).细胞培养液上清中的BMP-2水平实验组为(92.5±4.9)pg/ml,对照组为(22.2±1.9) pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05).结论 采用重组型人BMP-2、β甘油磷酸、L抗坏血酸和地塞米松可诱导体外培养的瓣膜间质细胞钙化,并发生炎症反应,其BMP-2的表达以及分泌均增加.

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