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三维膜对小鼠诱导多能干细胞体外培养效果的影响

许士俊;穆军升;张建群;伯平

摘要: 目的 通过将小鼠诱导多能干细胞(miPSC)接种到由3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)材料制作的三维膜上,研究PHBHHx三维膜对干细胞存活、增殖及分化的影响,寻找适合制作心肌补片的生物材料.方法 复苏、培养和鉴定miPSC后,将miPSC分为实验组和对照组,实验组将miPSC接种到PHBHHx材料制成的三维膜上培养,对照组将miPSC接种到传统的细胞培养皿中培养.将其中一部分miPSC加入干细胞培养基,72 h后采用CCK-8法测定细胞活力,观察细胞的增殖情况;将另一部分miPSC加入分化培养基诱导分化,15d后采用免疫荧光法测定心肌肌钙蛋白T(cTnT),采用流式细胞术测定cTnT的表达量,检测细胞的分化情况.结果 CCK-8法细胞活力测定显示,实验组吸光度值为0.836±0.038,对照组吸光度值为0.312 ±0.004,差异有统计学意义(P<0.05);扫描电镜显示,miPSC在PHBHHx三维膜上黏附生长,细胞形态正常.免疫荧光显示,两组miPSC的cTnT表达均为阳性;cTnT表达量实验组为(60.32±1.76)%,对照组为(47.54±1.46)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miPSC可以在PHBHHx材料制作的三维膜上存活、增殖和分化;与传统的细胞培养皿相比,PHBHHx制作的三维膜更能促进miPSC的增殖和分化.

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