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ORAI1在损伤导致大鼠颈动脉新生内膜形成中的作用及其与钠钙交换体1的关系

黄世亮;杨丽霞;杨淑娟;郭瑞威

摘要: 目的 利用大鼠颈动脉球囊损伤模型探讨ORAI1在血管平滑肌细胞增生形成新生内膜中的作用及其与钠钙交换体(NCX)1的关系.方法 根据是否建立颈动脉球囊损伤模型和观察时间,将Sprague Dawley大鼠分为假手术组、损伤后7d组和损伤后14 d组,每组大鼠3只;根据转染的病毒液,将Sprague Dawley大鼠分为阴性对照组(建立颈动脉球囊损伤模型后,转染阴性对照慢病毒质粒)和siORAI1组(建立颈动脉球囊损伤模型后,转染沉默ORAI1的慢病毒质粒),每组3只大鼠.采用HE染色评价颈动脉内膜的增生情况;采用Real-time PCR检测血管壁ORAI1的mRNA表达水平;采用Western blot检测血管壁核增殖核抗原(PCNA)、ORAI1和NCX1的蛋白表达水平.结果 (1)损伤后7d组和损伤后14 d组的颈动脉内膜厚度均大于假手术组[(0.54 ±0.11)μ m2和(0.89±0.12) μm2比(0.11 ±0.08) μm2,P均<0.05],PCNA的蛋白相对表达水平均高于假手术组(1.43±0.16和1.95±0.16比1,P均<0.05),ORAI1的mRNA表达水平均高于假手术组(1.39 ±0.14和1.78 ±0.21比0.56±0.09,P均<0.05),ORAI1的蛋白相对表达水平均高于假手术组(1.42 ±0.19和1.78±0.22比1,P均<0.05).(2)球囊损伤后14 d,siORAI1组的ORAI1蛋白相对表达水平低于阴性对照组(0.21 ±0.16比1,P<0.05),颈动脉内膜厚度小于阴性对照组[(0.19±0.14) μm2比(0.91 ±0.23) μm2,P< 0.05],NCX1蛋白相对表达水平低于阴性对照组(0.53 ±0.13比1,P<0.05).结论 ORAI1可能是调控血管新生内膜形成和细胞增殖的一个关键因素;ORAI1基因沉默可能会引起NCX1表达水平的降低.

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