发育医学电子杂志
Journal of Developmental Medicine(Electronic Version)
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 人民卫生出版社
- 影响因子： 0.21
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-5340
- 国内刊号： 11-9335/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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脱蜡丝线与传统丝线介导腹壁线结周围炎症反应的实验研究
目的 分别采用传统丝线与脱蜡丝线在小鼠腹壁缝合打结,探讨术后早期线结周围炎症细胞浸润及迟发型超敏反应情况,比较两种丝线的差异性.方法 研究时间为2017年11月至2018年1月.实验动物为12只Balb/C小鼠.传统丝线组采用无菌4-0带针慕丝线,取9只小鼠,随机分为皮下组、肌内组、腹膜外间隙组3个亚组,每组3只,术后7天取材.脱腊丝线组取3只小鼠,只在腹膜外间隙打结,术后5天取材.进行HE染色及免疫组织化学染色.结果 各组肉眼下均未见明显异物反应和线结所致的组织学硬块.HE染色可见线结准确位于腹壁的不同解剖学位置.传统丝线组术后7天的免疫组织化学结果显示,皮下组、肌内组、腹膜外间隙组小鼠的线结周围均未见巨噬细胞浸润(F4/80标志物)和炎症蛋白(IL-6、TNF-α标志物)表达.脱腊丝线组术后5天的免疫组织化学结果显示,小鼠腹膜外间隙线结周围可见明显的巨噬细胞浸润、炎症蛋白表达、MHCⅠ/Ⅱ和CD4浸润,以及抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC)和T淋巴细胞生成的细胞外基质,提示发生迟发型超敏反应.结论 脱腊丝线在腹壁组织内打结术后5天时,即可诱导线结周围的迟发型超敏反应及异物炎症反应,而传统丝线因表面具有蜜蜡而延迟了异物炎症反应的发生.
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强力霉素诱导型Cas9基因编辑小鼠胚胎干细胞系的构建
目的 建立强力霉素(doxmycin,Dox)诱导型Cas9基因编辑小鼠胚胎干细胞系,以满足不同条件下基因编辑的实验需求.方法 根据四环素(tetracycline,Tet)-on诱导表达调控系统的原理,分别构建含有调控元件反义Tet转录激活因子(reverse tetracy-cline transcriptional activator,rtTA)的表达质粒pCDH-CAG-rtTA-IRES-mCherry和含有Tet应答元件(Tet-responsive element,TRE)及Cas9的表达质粒pTight-Cas9-IRES-GFP-Tight-Puro,其中红色荧光蛋白mCherry通过内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)与rtTA表达,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)通过IRES与Cas9相连,分别指示rtTA与Cas9的表达,Puro抗性基因作为药物筛选标记.将上述两种质粒包装为慢病毒,分步转入小鼠胚胎干细胞中,建立Dox诱导Cas9表达的小鼠胚胎干细胞系.结果 首先通过瞬时转染方法在293T细胞中验证其可诱导性,然后结合报告荧光与药物筛选获得同时整合有调控元件rtTA与应答元件TRE及Cas9的小鼠胚胎干细胞系,该细胞系加入Dox后出现有GFP报告荧光表达,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,rt-qPCR)结果同时表明Cas9可以被成功诱导表达.结论 本研究成功构建了Dox诱导Cas9表达的小鼠胚胎干细胞系,该细胞系在基因编辑方法上更加灵活可控,具有很高的潜在应用价值.
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三联疗法治疗新生儿呼吸窘迫综合征合并持续肺动脉高压的临床研究
目的 探讨用高频振荡通气、肺表面活性物质联合一氧化氮吸入的"三联疗法"治疗新生儿呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome,RDS)合并持续肺动脉高压(persistent pulmonary hypertension of the new born,PPHN)的临床效果.方法 2010年1月1日至2017年6月30日在厦门市妇幼保健院新生儿科住院,确诊为RDS合并PPHN患儿31例,均应用"三联疗法"治疗.对其临床特征和转归进行分析,比较治疗前及治疗后24、48小时的pH值、氧合指数(oxygenation index,OI)、肺动脉压力(pulmonary artery pressure,PAP)、动脉血氧分压(arterial oxygen tension,PaO2)/吸入氧气分数(fraction of inspired oxygen,FiO2)值的变化.统计学分析采用t检验,χ2检验和重复测量方差分析.结果 31例患儿平均胎龄(36.2±2.9)周,其中晚期早产儿14例(45.2％,14/31),足月儿11例(35.5％,11/31).剖宫产24例(77.4％,24/31),其中选择性剖宫产21例(67.7％,21/31).31例患儿治疗前的平均OI值为36±16,平均PAP为(57±11)mmHg,平均P/F值为53±27,不同程度OI值、PAP、P/F值的患儿转归差异无统计学意义(P﹥0.05).治疗后24、48小时的pH值、PaO2、PaCO2均较治疗前明显改善,OI值、PAP均较治疗前明显下降,P/F值明显上升,差异有统计学意义(P﹤0.05).平均住院时间为(22±11)天.治愈24例(77.4％,24/31),好转5例(16.1％,5/31),死亡2例(6.5％,2/31).对于OI值≥40、PAP﹥70 mmHg、P/F值﹤50的危重患儿,"三联疗法"的临床治愈好转率分别为83.3％(5/6)、80.0％(4/5)和94.1％(16/17).结论 "三联疗法"治疗RDS合并PPHN,可以起到协同作用,显著改善患儿氧合,提高抢救成功率;对于极危重患儿,"三联疗法"可以减少其对体外膜肺氧合技术的需求.
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窒息复苏后新生儿动脉血气分析对窒息的评估意义
目的 探讨窒息复苏后新生儿的动脉血气分析结果对窒息的评估意义.方法 2012年1月1日至2016年12月31日,在中国人民解放军第三〇二医院新生儿诊疗中心收治的患儿中,纳入116例窒息后复苏患儿,胎龄≥34周,出生体重≥2500 g,排除先天性出生缺陷及遗传代谢性疾病.所有研究对象均进行动脉血气分析,记录患儿的性别、胎龄、分娩方式、采血时间,1、5及10分钟Apgar评分,以及窒息复苏用药情况.采用独立样本t检验和χ2检验进行统计分析,动脉血pH值和碱剩余(BE)对窒息诊断的敏感度和特异度采用受试者工作特征曲线(ROC)分析.结果 轻度窒息组与重度窒息组患儿的采血时间、性别、出生胎龄、出生体重、剖宫产率、产钳助产率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).轻度窒息组患儿复苏过程中均未用药;重度窒息组患儿中,11例未用药,其余采用肾上腺素、0.9％氯化钠、碳酸氢钠、纳洛酮等药物治疗.轻度窒息组与重度窒息组的pH值(7.352±0.076与7.177±0.032)、BE值[(-6.4±4.5)与(-15.8±6.4)mmol/L]、HCO3-[(18.7±3.6)与(11.3±4.1)mmol/L]比较,差异均有统计学意义(P值均=0.000).pH值的ROC曲线下面积为0.842(P=0.000,95％CI为0.733～0.950),BE值的ROC曲线下面积为0.896(P=0.000,95％CI为0.820～0.972).当pH≤7.27时,敏感度为86.0％,特异度为75.0％;当BE≤-10.6 mmol/L时,敏感度为87.2％,特异度为83.3％,约登指数大,诊断价值高.结论 窒息复苏后新生儿的动脉血气分析对诊断及评估窒息程度有一定的价值,可以指导复苏后的进一步治疗.
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新生儿红斑狼疮1例
患儿男,因"生后10分钟气促"于2017年11月30日收入山东省聊城市人民医院新生儿重症监护病房.患儿胎龄37+6周,本院剖宫产娩出,出生体重3100 g,出生史无异常.患儿母亲30岁,妊4产3,第1胎为女孩,出生后曾患皮疹,未予治疗,现6岁,体健;第2胎为男孩,出生后即死亡,原因不详.孕妇自述此次妊娠中期患"水痘",自行痊愈,平素体健,否认红斑狼疮等风湿病家族史.
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piggyBac转座系统的发展及应用
转座子是指在原核和真核生物基因组上可以进行位置转换的DNA片段.转座子通过在原始位置上进行剪切或复制,经环化作用在转座酶辅助下插入到宿主基因组的其他位置,转座子发生位置转移的过程即为转座.转座子可以在基因组任意插入和切除,常用于哺乳动物细胞基因编辑的研究之中.相较于病毒介导的转染和传统转座子系统, piggyBac(PB)转座子拥有多种优点,广泛应用于转基因及功能基因研究中.本文对转座子系统的发展历史、PB转座子的结构特点及新研究进展进行阐述.
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基因编辑在镰状细胞贫血症治疗中的研究进展
镰状细胞贫血症(sickle-cell anemia,SCD)是血红蛋白遗传缺陷疾病,患者的大部分红细胞呈镰刀状.输血、羟基脲(hydroxyurea,HU)及异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)等传统的治疗方法因无法根治SCD、供体匮乏、并发症多等原因,限制了临床应用,迫切需要新的治疗方案.近年来,基因编辑技术给多种疾病的治疗提供了新的思路.针对SCDβ-珠蛋白(hemoglobin beta-chain,HBB)的基因突变,可利用基因编辑技术在人造血干祖细胞中改变珠蛋白基因的表达,从而缓解SCD症状.本文将从基因编辑治疗策略,基因编辑技术及相关研究进展方面进行综述,为深入研究基于基因编辑的SCD治疗方案提供参考.
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胚胎基因编辑的研究进展
基因编辑技术(gene editing)是指在基因组水平对遗传信息进行精准修饰的技术,从而实现对特定DNA片段的敲除、插入及替换等.近年来,动物胚胎基因编辑技术日渐成熟,目前常用的基因编辑技术包括3种:锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFN)技术、转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases, TALEN)以及成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/Cas9系统.这3种技术都是通过在特定的靶向序列处引入DNA双链断裂缺口(double strand break,DSB),引发DNA非同源末端连接(non-homology end-joining,NHEJ)或同源介导修复方式(homology-directed repair,HDR)修复受损的DNA,实现对基因的敲除(knock-out)、敲入(knock-in)、基因修复等多种修饰[1].本文对ZFN、TALEN、CRISPR/Cas93种基因编辑技术的基本结构、作用原理及其在胚胎基因编辑中的研究进展进行综述.
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母亲成熟卵巢畸胎瘤与胎儿不成熟骶尾部畸胎瘤共存1例及文献复习
目的 探讨母亲成熟卵巢畸胎瘤与胎儿不成熟骶尾部畸胎瘤共存的临床特征.方法 2016年11月,陆军总医院妇产科收治1例母亲成熟卵巢畸胎瘤与胎儿不成熟骶尾部畸胎瘤共存患者,分析其临床特点.结果 患者因"妊娠31+5周,血压控制不理想,胎儿骶尾部包块"收入院.妊娠12周超声检查发现孕妇左侧卵巢4.1 cm×3.8 cm×3.6 cm大小囊肿.妊娠22+3周,超声检查提示胎儿骶尾部4.6 cm×5.0 cm×3.3 cm大小包块,随孕周进展,胎儿包块生长迅速.妊娠32+1周时因无应激试验无反应型行剖宫产终止妊娠,新生儿为女性,生后1小时内死亡.新生儿肿瘤为实性、不规则,表面破溃,直径约15 cm,肿瘤使其臀部和左腿严重变形.病理检查提示,母亲肿瘤为囊性成熟畸胎瘤,胎儿肿瘤为不成熟畸胎瘤.结论 母胎同时发生畸胎瘤罕见,本例为首次发现母亲成熟卵巢畸胎瘤与胎儿不成熟骶尾部畸胎瘤共存,胎儿预后极差.
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新生儿高胆红素血症的临床特征及预后
目的 探讨新生儿高胆红素血症患儿的临床特征及预后.方法 2015年4月至2016年9月,在北京市西城区妇幼保健院新生儿科住院的患儿中,共有高胆红素血症120例.分析患儿的基本情况、原发疾病、治疗及转归情况.结果 120例高胆红素血症患儿中,足月儿85例(70.8％,85/120),早产儿30例(25.0％,30/120),过期产儿5例(4.2％,5/120).发病日龄﹤7天者69例(57.5％,69/120),≥7天者51例(42.5％,51/120).非感染因素占64.2％(77/120),感染因素占32.5％(39/120),病因不明者占3.3％(4/120).发病日龄﹤7天患儿的原发疾病比例依次为:感染、围产期窒息、母乳性黄疸、ABO血型不合溶血症;发病日龄≥7天患儿的原发疾病比例依次为:母乳性黄疸、感染、围产期窒息.治愈114例(95.0％,114/120),好转6例(5.0％,6/120),无1例换血或胆红素脑病发生.结论 多种因素可引起新生儿高胆红素血症,治疗过程中应具体分析,预防胆红素脑病的发生.
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新生儿呼吸衰竭体外膜肺氧合支持专家共识
体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation, ECMO)基本原理就是通过动静脉插管,将血液从体内引流到体外,经人工膜肺氧合后,再经泵将氧合血灌注入体内,维持机体各器官的供血和供氧,对严重的心肺功能衰竭患者进行较长时间呼吸心脏支持,使患者心肺得以充分的休息,为进一步治疗和心肺功能的恢复赢得宝贵的时间[1].国际体外生命支持组织(extracorporeal life support organization,ELSO)2016年数据显示,相对成人和儿童,新生儿呼吸疾病ECMO支持预后佳,平均存活率达74％[2].对常规呼吸支持技术无效的新生儿,ECMO技术是一种有效的救治手段[3].本专家共识仅供呼吸衰竭新生儿ECMO支持参考使用.
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基因编辑技术新研究进展及在疾病治疗中的应用
基因编辑技术是指用可编程的核酸酶识别基因组特定位点并介导DNA双链断裂,随后诱发DNA非同源末端连接(non-homology end-joining, NHEJ)或同源重组修复(homology directed repair, HDR)等机制,从而实现对DNA序列的定点修饰,包括靶向敲除或敲入基因.20世纪90年代以来,科学家开发了一系列基因编辑工具,包括Meganuclease、锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFN)、转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)等,能够高效地特异性造成基因组目标位点双链DNA断裂,提高同源重组的效率[1-2].近年来建立的成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)/Cas系统,具有效率高、操作简单、易于改造优化等优势,目前已经成为重要的基因编辑工具,并被广泛应用于基因表达调控、细胞成像、核酸标记、表观遗传修饰、疾病治疗、功能基因筛选等领域.本文主要阐述CRISPR/Cas9技术优化方面以及在生物检测和疾病治疗等领域的研究进展.
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