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舟山眼镜蛇毒神经毒素的分离纯化及镇痛作用研究

陈燕;许云禄

摘要: 目的 从舟山眼镜蛇毒中分离纯化神经毒素,并测定其部分理化性质及镇痛活性.方法 应用SP-Sephadex C-50离子交换色谱法分离眼镜蛇毒粗毒,用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、CM-Sephadex C-25离子交换色谱纯化神经毒素;SDS-PAGE(Tris-Tricine系统)鉴定纯度;用Meier方法测定毒性;用热板法观察神经毒素的镇痛作用.结果 应用SP-Sephadex C-50离子交换柱层析,从舟山眼镜蛇毒中分离得到14个蛋白峰,其中6个组分(NNAV-Ⅶ~Ⅻ)经鉴定为含有神经毒素组分,将神经毒活性强的组分Ⅺ经Sephadex G-50、CM-Sephadex C-25纯化得神经毒素纯品NTXT.该纯品分子量12.3kD,小白鼠静脉注射和腹腔注射的LD50分别为1.9875、2.2217 mg·kg-1.NTXI能显著提高小鼠对热板刺激的痛阈.腹腔注射0.2mg·kg-1 NTXI可使小鼠的热板痛阈提高84.35%.NTXI的镇痛作用具有时效性,给药后2h起效,4h作用达峰值.结论 舟山眼镜蛇毒中分离得到一个神经毒素纯品NTXI,具有镇痛作用.

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