中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica 중국중약잡지
- 主管单位： 中药通报
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2272/R
- 国内刊号： 李禾
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠草酸钙肾结石形成的影响及其机制研究
观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肾结石的治疗作用及对肾脏的保护作用,并对其可能机制进行探讨.采用乙二醇联合氯化铵灌胃的方法建立大鼠草酸钙肾结石模型,并以EGCG对其进行干预.采集大鼠J血液标本,检测大鼠血肌酐、尿素氮以及血钙等生化指标;收集大鼠尿液标本,观察并比较大鼠24h尿量、尿草酸以及尿钙水平;取大鼠肾脏标本制成组织切片,观察大鼠草酸钙肾结石的病理变化.采用实时定量PCR及Western blot对肾组织中骨桥蛋白(OPN)的表达水平进行检测.结果发现,与正常组大鼠相比,结石组大鼠血肌酐、尿素氮、尿钙、尿草酸水平以及肾组织内OPN表达水平均显著升高(P＜0.05),而24h尿量则显著降低(P＜0.05);与肾结石组大鼠相比,在EGCG处理后,大鼠血肌酐、尿素氮、尿钙以及尿草酸水平显著降低(P＜0.05),同时24h尿量显著升高(P＜0.05),呈浓度依赖性.与对照组相比,肾结石组大鼠肾组织草酸钙结石病理改变明显,而在EGCG处理后,大鼠肾脏病理改变明显改善,呈浓度依赖性.此外,EGCG处理后大鼠肾脏OPN表达水平显著降低,也呈浓度依赖性.结果可推知EGCG能够抑制大鼠肾脏内草酸钙肾结石的形成,并对肾功能有明显的保护作用.
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重楼总皂苷对人胃癌MKN-45细胞凋亡及Fas/FasL信号通路的影响
目的:研究重楼总皂苷(Paridis Rhizoma total saponins,PRTS)诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡的机制.方法:在前期研究基础上,将PRTS设定3个不同质量浓度(5,10,20 mg·L-1)处理人胃癌细胞12h,采用荧光染色法观察MKN-45细胞凋亡形态学变化;流式细胞术(Annexin V/PI双染色法)测定细胞凋亡率;ELISA测定MKN-45细胞caspase-3,caspase-8酶活性;Western blotting法检测Fas,FasL蛋白表达水平.结果:在荧光显微镜下,经PRTS处理的MKN-45细胞,可见典型的凋亡形态学特征;PRTS可明显增加细胞凋亡率,且PRTS 20 mg· L-1与对照组相比凋亡率有显著差异(P＜0.01);PRTS作用于MKN-45细胞12h,与对照组比较,其caspase-3,caspase-8活性明显增高(P＜0.01),Fas,FasL蛋白表达明显增高(P＜0.01).结论:PRTS能显著诱导人胃癌细胞MKN-45凋亡,其机制可能与增加caspase-3,caspase-8活性,上调Fas和FasL的表达有关.
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通心络胶囊对自发性2型糖尿病KK/Upj-Ay小鼠坐骨神经细胞凋亡的机制研究
该研究通过观察通心络胶囊对自发性2型糖尿病KK/Upj-Ay小鼠坐骨神经细胞凋亡的影响,试探讨其改善糖尿病周围神经病变(DPN)的机制.实验以KK/Upj-Ay小鼠为DPN模型,随机分为模型组、通心络低、中、高剂量组(1,2,4g·kg-1),另设C57BL/6小鼠为对照组.灌胃给药12周,测定热痛觉阈值、运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV);流式细胞术测定细胞凋亡率;Real-time PCR和Western blot法测定坐骨神经B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原2(Bcl-2)、白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA和蛋白的表达;Western blot法测定坐骨神经p38MAPK,p-p38MAPK蛋白水平.研究发现通心络胶囊能不同程度的升高痛觉阈值,增加MNCV和SNCV;通心络胶囊能降低坐骨神经细胞凋亡率;降低Bax和Caspase-3的表达,升高Bcl-2表达;通心络胶囊能降低p-p38 MAPK蛋白水平.结果表明通心络胶囊能够通过抑制p38MAPK磷酸化抑制DPN小鼠细胞凋亡,从而发挥糖尿病周围神经的保护作用.
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血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响
目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制.方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白对照血清.选取出生3 dSD大鼠双侧坐骨神经制备雪旺氏细胞;将培养的雪旺氏细胞分为血竭组和空白对照组,分别用10％血竭含药血清和空白对照血清干预培养.48 h后应用RT-PCR法检测各组雪旺氏细胞NGF,BDNF等基因mRNA表达水平.结果:镜下观察到大部分雪旺氏细胞呈双极梭形,细胞呈肩对肩或端对端排列,免疫细胞化学鉴定均呈阳性;与空白组比较,血竭组NGF,LNGFR,GDNF和GAP43 mRNA表达上调(P＜0.01),BDNF mRNA表达下调(P＜0.05),CNTF和TrkA的mRNA均下调(P＜0.01),NF-H mRNA无显著差异.结论:中药血竭可能是通过上调NGF,LNGFR,GDNF,GAP-43的mRNA的表达,同时下调BDNF,CNTF,TrkA mRNA来发挥其促进神经修复作用.
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何首乌水提物对大鼠肝脏CYP1A2,CYP2E1酶活性及mRNA表达抑制作用研究
大鼠连续灌胃不同剂量的何首乌水提物(1,10g·kg-1)7 d,取肝脏制备肝微粒体,分别用Cocktail体外孵育法和实时荧光定量PCR技术观察何首乌水提物对大鼠肝脏主要CYP450酶活性及mRNA表达的影响.与空白对照组相比,1,10g·kg-1何首乌水提物组大鼠肝脏CYP2E1酶活性和mRNA的表达均受到明显抑制(CYP2E1酶活性,P＜0.01;CYP2E1的mRNA表达1 g·kg-1组P＜0.05,10 g·kg-1组P＜0.01),CYP3A1酶活性虽显示明显升高(P＜0.01),但mRNA的表达没有显著变化;10 g·kg-1何首乌水提物组大鼠肝脏CYP1A2酶活性和mRNA的表达受到明显抑制(P＜0.01).
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芝麻素对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响
目的:观察芝麻素(Ses)对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构的影响.方法:雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠48只适应性喂养1周,随机分为正常对照组、MCT组、Ses低、高剂量组(50,100 mg·kg-1),每组12只.MCT(60 mg·kg-1)皮下注射诱导PH大鼠模型.连续给药4周后,右颈外静脉插管测定大鼠右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP).分离大鼠右心室(RV)、左心室+室间隔(LV+S)并称重,剥离大鼠胫骨并测量其长度,计算RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值.HE染色观察肺小动脉病理学变化,Masson染色观察肺小动脉胶原沉积的变化.免疫组化检测肺动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.比色法测定肺动脉总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量.Real-time PCR和Western blot检测肺动脉collagen Ⅰ,NOX2及NOX4 mRNA和蛋白表达.结果:Ses连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PH大鼠RVSP及mPAP,减轻RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值,降低肺动脉α-SMA,collagen Ⅰ表达、减轻肺血管及右心室重构.同时,Ses还能明显抑制肺动脉NOX2及NOX4的表达,降低其MDA含量及提高T-AOC水平.结论:Ses能够缓解MCT诱导的PH大鼠肺血管重构,其机制可能与抑制NOX2及NOX4的表达、进而降低氧化应激损伤有关.
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陷胸汤对内毒素致小鼠急性肺损伤的影响
目的:探究陷胸汤对内毒素致小鼠急性肺损伤的影响.方法:将80只雌性ICR小鼠平均随机分为空白组、模型组、阳性药组、陷胸汤组、大陷胸汤组、陷胸汤去甘遂组、陷胸汤去甘草组、甘遂甘草组.除空白组外,各组动物于第1,2,3天经乙醚吸入麻醉后予滴鼻和腹腔注射脂多糖建立急性肺损伤模型.造模30 min后分别予0.2 mL相应药物灌胃,阳性药组和空白组分别予等量地塞米松和生理盐水.末次造模给药24 h后取材.测定血中白细胞数、血和肺泡灌洗液上清液中中性粒细胞百分比、肺组织干湿比值(W/D),观察肺组织病理学改变.综合分析各指标,选择优效组陷胸汤组进行剂量梯度实验.将60只雌性ICR小鼠平均随机分为空白组、模型组、阳性药组、陷胸汤高剂量组、陷胸汤中剂量组、陷胸汤低剂量组,以同样的方法造模并检测指标,并用ELISA法检测陷胸汤中剂量组小鼠肺泡灌洗液中细胞因子NF-κB,TNF-α,IL-6表达水平;RT-PCR方法检测肺组织中NF-κB,TNF-α mRNA的表达,Western blot方法检测肺组织中NF-κB,TNF-α蛋白的表达.为明确陷胸汤毒性,将20只小鼠随机分为2组,每组10只,禁食8h后灌胃给药.给药组小鼠以大给药剂量(120 g·kg-1)、小鼠可承受的给药大体积(40 mL·kg-1)一次性灌胃给药陷胸汤水煎提取液.空白组给予等量生理盐水.给药后24 h内密切观察小鼠的状态.结果:陷胸汤组小鼠血中白细胞数较模型组降低(P＜0.01),与陷胸汤组比较,陷胸汤去甘遂组、陷胸汤去甘草组、甘草甘遂组小鼠血中白细胞数较高(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01);与模型组相比,陷胸汤组小鼠血中和BALF中中性粒细胞百分比降低(P＜0.01,P＜0.05);且陷胸汤可显著降低LPS引起的小鼠肺组织W/D比值的增高(P＜0.01).与模型组相比,陷胸汤组肺泡壁、气道壁病变程度均较模型组减轻,管壁及其周围浸润的炎细胞数量减少,支气管上皮细胞变性不明显,支气管腔内渗出物减少.其他给药组见不同程度肺泡壁、气道壁增厚,大量炎细胞浸润,支气管黏膜上皮细胞变性脱落;肺泡壁轻度增厚支气管黏膜上皮细胞变性脱落.陷胸汤可使肺泡灌洗液中NF-κB,TNF-α和IL-6水平降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),陷胸汤高、低剂量组只在TNF-α因子水平上表现出一定程度的下降(P＜0.01,P＜0.05).陷胸汤还使得NF-κB,TNF-α mRNA在小鼠肺组织中表达显著降低,NF-κB,TNF-α蛋白在小鼠肺组织中表达显著降低.给药后24 h内,给药组小鼠死亡5只,排除灌胃等其他因素影响,确定为药物毒性.结论:陷胸汤可以显著保护由内毒素导致的小鼠急性肺损伤,但在3g·mL-1剂量时存在毒性.
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当归药材补血活性的定量测定
当归为常用的补血药,以阿魏酸等已知化学成分为指标难以有效评价其质量.为此,根据生物检定的原理,建立了定量测定当归药材补血活性的生物检测方法.当归药材依次用乙醇和水提取,以合并后的总提物为供试品进行小鼠补血活性试验;用环磷酰胺和盐酸苯肼联合建立小鼠血虚模型;以红细胞数为补血活性的评价指标,用环孢菌素A标定当归的补血活性.再根据量反应平行线(3 ·3')法计算供试品的补血活性.结果表明,环孢菌素A和当归总提物补血活性的可靠性检验结果成立;与模型组相比,当归总提取物具有显著的补血活性(P＜0.05).环孢菌素A在给药剂量0.035 ～0.56 g· kg-1与红细胞数增加值呈良好的线性关系(r=0.998 4,n=5).供试品补血活性重复测定的RSD为6.15％(n=6),可信限率为26.68％ (n=6).5份从甘肃、四川、云南收集的当归药材样品的性状特征不同,其补血活性也不同(21.95 ～44.16 U·g-1).表明建立的方法可准确测定当归药材的补血活性,评价其质量.
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UHPLC-MS/MS快速鉴别红花中的化学成分
采用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨质谱仪,对红花的成分进行快速分离,并根据MS和MSn高分辨质谱信息,对其成分进行快速辨识,为中药材红花药效物质基础研究,及质量控制提供参考依据.线性轨道离子阱串联Orbitrap检测器在正负离子模式下进行化合物的一级全扫描及多级碎片扫描,获得化合物一级分子离子峰及二级碎片信息,通过对化合物分子式的推导(δ≤5)及碎片离子的解析,进行化合物定性分析.共检测到45个化合物,推导出分子式(δ≤5),其中识别26个,经过标准物质验证的为5个化合物.
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RP-HPLC-UV同时测定白木香叶中二苯甲酮和(口山)酮类成分
利用高效液相色谱法(RP-HPLC-UV),同时测定白木香叶中的4个主要成分,包括3个二苯甲酮(iriflophenone 3-C-β-D-glucoside,iriflophenone 3,5-C-β-D-diglucoside,iriflophenone 2-O-α-L-rhamnoside)和1个口山酮(mangiferin)的含量;采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.1％磷酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为285nm,柱温为25 ℃.通过上述条件对15批白木香叶中的4个主要成分进行了含量测定;上述4个待测物在上述色谱条件下能够达到基线分离,标准曲线线性关系良好(R2 ＞0.999 0),精密度和稳定性符合分析方法学要求,加样回收率为98.80％ ～101.39％(RSD＜ 3.0％),其含量分别在0.41 ～14.48 mg,0.72 ～ 3.85 mg,4.30～29.07 mg,0.24 ～ 5.06 mg;该分析方法准确可靠,重复性好,能实现对白木香叶的质量控制,有利于该资源的综合利用开发.
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小球藻化学成分的研究
利用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱技术对小球藻石油醚部位的化学成分进行研究,并根据理化性质和光谱分析鉴定化合物的结构.从小球藻石油醚萃取部位获得脂溶性提取物M1,M2,M3,分离得到化合物S个,分别鉴定为(22E,24R)-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(1),(24S)-麦角甾-7-烯-3β-醇(2),黑麦草内酯(3),豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(4)和3β-羟基-5α,6α-环氧-7-大柱香波龙烯-9-酮(5).小球藻脂溶性提取物以脂肪酸酯类、烷酸类和烯酸类为主,化合物1～5均为首次从该属植物中分离得到.
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地黄地上部分中一个新苯甲醛类化合物
运用各种色谱技术对玄参科地黄属植物地黄的地上部分进行分离纯化,从中分离得到7个化合物,根据理化性质和波谱数据分别鉴定为3-hydroxy-4-(4-(2-hydroxyethyl)phenoxy)benzaldehyde(1),异香草酸(isovanillic acid,2),邻苯二酚(pyrocatechol,3),glutinosalactone A(4),金圣草黄素(chrysoeriol,5),芹菜素(apigenin,6),木犀草素(luteolin,7),其中化合物1为新化合物.
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链霉菌CPCC202950的化学成分研究
采用大孔树脂、MCI树脂、闪式反相C18柱色谱以及反相HPLC等多种色谱技术和方法,从链霉菌CPCC 202950的发酵液中分离得到11个化合物,借助理化性质和波谱学数据分析,鉴定其结构为1 H-pyrrole-2-carboxamide(1),5'-deoxy-5'-meth-yhhioinosine(2),vanillamide(3),tran-3-mnethylthioacrylamide (4),1,2,3,4-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b] indole-3-carboxylic acid(5),环(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(6),N-[2-(4-hydroxyphenyl)] ethylacetamide (7),苯甲酰胺(8),cyclo(L-leucyl-trans-4-hydroxyL-proline) (9),环(苯丙氨酸-甘氨酸)(10),色氨酸(11).其中化合物1和2为新的天然产物;化合物1～n对HIV-1蛋白酶均没有明显的抑制作用(IC50＞10 μmol·L-1).
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蓍草化学成分研究
采用硅胶、凝胶和半制备液相等色谱方法对蓍草Achillea alpinaL地上部分进行化学成分研究.根据理化性质和波谱学方法鉴定化合物的结构分别为墙草碱(1),8,9-dehydropellitorine(2),(E,E)-2,4-undecadien-8,10-diynoic acid isobutylam-ide(3),(E,E)-2,4-tetradecadien-8,10-diynoic acid isobutylamide(4),sintenin(5),4',5,7,8-四甲氧基黄酮(6),猫眼草黄素(7),芒柄花素(8),aurantiamide(9),金色酰胺醇酯(10),artemetin(11),半齿泽兰素(12).化合物1～5为首次从该植物中分离得到,化合物6 ～ 10为首次从该属中分离得到.
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基于LTQ-Orbitrap的白芷中5种呋喃香豆素类化合物的质谱裂解规律研究
目的:采用LTQ-Orbitrap高分辨质谱仪,对白芷中5种呋喃香豆素类成分进行多级裂解研究,探讨此类化合物的裂解规律.方法:采用直接进样法,在正离子模式下对补骨脂素、花椒毒素、佛手柑内酯、氧化前胡素和白当归脑进行碰撞诱导解离反应(CID),碰撞能为35 eV,根据碎片离子的精确相对分子质量,利用Xcalibar V2.0软件进行数据分析,对碎片离子进行推导.结果:通过对5种呋喃香豆素类成分的质谱数据分析及推导,可知呋喃香豆素类化合物有相似的裂解方式,如在C-5,C-8位易发生取代基断裂,在呋喃环位置丢失CO,以及内酯基团丢失CO2中性分子.结论:通过该研究中对呋喃香豆素类化合物裂解方式和途径探讨,为该类化合物及其代谢产物的结构鉴定提供依据.
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储藏过程中易霉变中药材的科学养护技术评述
中药材种类繁多,化学成分和性质各异.多数中药材在生产、采收、加工、运输尤其储藏过程中,由于条件和技术的简陋,加之没有科学的养护,在自身和外界因素的相互作用下,极易出现霉变现象,不仅影响中药材的品质、安全性和有效性,而且造成严重的药材浪费和经济损失,甚至威胁人们的健康和生命安全.中药材储藏过程与其质量密切相关,受干扰因素多,因此,储藏过程中进行中药材科学养护是防止中药材霉变的关键措施.该文分析了中药材霉变的危害,总结了导致药材储藏过程中霉变的内、外在因素,提出进行中药材养护的重要性.进而针对现行中药材养护技术的特点和局限性,展望了新型科学合理的中药材养护技术的应用前景,以期为做好中药材的科学养护、防止药材霉变、保证药材质量提供参考.
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兔儿风属植物化学成分的研究进展
菊科Compositae兔儿风属Ainsliaea植物是我国民间广泛使用的传统中药.该属植物含有多种类型的化学成分,主要为倍半萜内酯及其苷类成分.此外,还有三萜、黄酮、甾体、酚酸、长链脂肪酸及挥发油等成分.目前国内外对该属植物的研究主要集中在杏香兔儿风品种,该文将对兔儿风属药用植物的化学成分进行综述,为该属植物利用提供理论依据.
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斑马鱼在药物筛选中的应用
与其他模式动物相比,斑马鱼在药物的活性成分筛选方面具有独特的优势,近年来在药物研究开发中受到越来越多的重视.该文着重就斑马鱼在中药有效部位研究、中药单体筛选、天然产物和药物“老药新用”的应用前景以及药物的早期毒理评估等方面的新研究进展进行了综述,以期为广大中药研究开发人员在中药新药研发方面提供借鉴参考.
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熊胆粉研究进展述评
该文对近年来关于熊胆粉在化学成分、药理作用、临床应用的相关文献进行了较为详尽的论述,表明熊胆粉在治疗多种疾病方面具有显著的药理作用及临床疗效.由于熊胆粉成分比较复杂,且有一定的毒副作用.因此要在对熊胆粉药理作用和临床应用进行深入研究的同时,也要对化学成分、毒副作用详加探讨,旨在为临床广泛而合理地应用熊胆粉提供科学依据.
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基于肠道屏障的食物过敏机制研究进展
食物过敏是对摄入食物蛋白的一种有害的免疫学反应,目前食物过敏已成为严重危害成人和儿童健康的公共卫生问题且发病率呈逐年上升的趋势,但目前针对食物过敏尚无有效的治疗方法,多采用规避过敏原及对症治疗.大量研究发现食物过敏性疾病的发生与肠道屏障功能损伤有关,在食物过敏患者中肠道通透性显著增加.因此,该文就近年来食物过敏与肠道屏障功能的相关性研究,食物过敏中肠道屏障损伤机制研究,以及基于肠道屏障功能的食物过敏干预策略研究进行了综述,以期为食物过敏性疾病的实验室研究和临床治疗提供参考.
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莪术主要化学成分预防支架后再狭窄药理作用的研究进展
中药莪术主要含挥发油、姜黄素等有效成分,具有抗血小板聚集、降血脂、抗氧化及抗炎等药理作用.近年来,研究表明莪术某些提取物和化学成分通过增强血管血红素氧合酶-1活性,缓解心肌细胞线粒体损伤以保护血管内皮;抑制核因子-κB(NF-κB)、靶基因白介素-受体相关激酶-1(IRAK-1)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)减少炎症浸润;且通过影响细胞磷酸酶氧化以抑制生长因子诱导的平滑肌细胞增殖及迁移等多重药理作用.因此,利用莪术对血管内皮细胞和平滑肌细胞的不同药理作用,应用于药物涂层支架,对预防支架后再狭窄和血栓形成可能具有潜在作用.该文就中药莪术提取物及主要化学成分,对预防支加内再狭窄的药理作用及机制研究作一综述.
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短时外源甘草酸刺激下的甘草次生代谢产物影响关系研究
试验拟在人工模拟的高甘草酸含量环境下,探寻甘草中次生代谢产物间的相互影响关系,筛选出与甘草酸含量明显相关的次生代谢产物.通过根部浸泡甘草酸铵溶液,分析浸泡后72 h内甘草根中4种次生代谢产物含量的变化,统计学软件分析各成分与甘草酸含量的相关性.结果表明高浓度1.0mmol· L-1甘草酸的根部浸泡对于在甘草中模拟高甘草酸含量环境是切实可行的,且在短时外源甘草酸刺激时,甘草中甘草酸和甘草苷的含量存在明显的正相关关系.外源甘草酸刺激对甘草植株体内甘草酸的合成积累产生一定的影响,且甘草酸的积累与甘草苷含量密切相关.
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沙苑子及其伪品直立黄芪的显微鉴别研究
直立黄芪种子与沙苑子在外观形态上极为相似,是市场上常见的沙苑子伪品之一,其外观性状鉴别以及荧光法、紫外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法和蛋白电泳法等鉴别方法均有报道,但显微鉴别的相关报道较少.该文对沙苑子正品(扁茎黄芪种子)及其伪品直立黄芪种子进行了外观性状及显微鉴别研究,结果表明沙苑子和直立黄芪种子在颜色、形状上略有差异,在种皮和种脐的显微结构、子叶细胞中脂肪油滴的分布上与直立黄芪种子有显著差异.因此,显微鉴别可区别沙苑子和直立黄芪种子,为沙苑子药材鉴别提供科学依据.
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白花丹参鲨烯合酶SQS2的克隆与原核表达分析
该研究根据丹参的转录组数据提供的基因片段设计引物,采用逆转录聚合酶链式反应方法,从白花丹参中克隆鲨烯合酶SQS2的全长cDNA序列,命名为SmSQS2,GenBank注册号KM244731.序列长度为1 597 bp,包含1 245 bp的开放阅读框,推测编码414个氨基酸,含有115 bp的5'UTR和237 bp的3'UTR.利用生物信息学软件对获得的序列进行同源性分析,得出白花丹参SQS2的与紫花丹参SQS2的序列无明显差异.原核表达分析结果表明SmSQS2在大肠杆菌中能表达出与预测蛋白大小相当的目标蛋白,对影响蛋白表达的4个因素,即诱导温度、诱导时间、IPTG浓度和诱导时宿主菌的吸光度(A600)进行了优化,得出SmSQS2蛋白表达的佳条件为:IPTG终浓度0.2 mmol· L-1,宿主菌的吸光度(A600)为0.6,温度30℃,诱导时间20 h.这为进一步研究白花丹参鲨烯合酶SQS2在丹参萜类和甾醇类生物合成途径中的作用提供了理论依据.
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刺五加P450基因原核表达体系的建立与表达条件的优化
根据已克隆得到的刺五加P450基因的cDNA序列设计引物,构建刺五加P450基因的原核表达载体pET30a-P450,并对重组菌株BL21/pET30a-P450的原核表达条件进行了筛选优化.实验结果显示,pET30a-P450转化大肠杆菌BL21后可实现P450基因的原核表达,SDS-PAGE分析显示其在53 kDa处有显著诱导条带;表达体系的佳诱导温度为27～37℃,佳IPTG浓度为1 mmol·L-1,佳培养基为LB液体培养基,佳诱导时间为24h.因此,刺五加P450基因能够通过表达载体BL21/pET30a-P450实现该基因的原核表达,该体系的诱导温度、IPTG浓度、培养基种类以及诱导时间均可影响目的蛋白的表达量,但影响强度不同.
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梓醇人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
基于单克隆抗体的免疫分析方法具有高特异性、高灵敏性等特点,在中药的质量控制和动物体内微量成分的检测等方面均具有重要的意义,该方法建立的前提条件就是成功制备中药活性小分子化合物的人工抗原.该研究采用高碘酸钠氧化法,首次制备了梓醇的人工抗原,通过基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)和分子排阻色潽法鉴定梓醇与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功,用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗梓醇抗体效价在1∶8000以上,成功制备梓醇的人工抗原,为下一步单克隆抗体的制备和相关免疫方法的建立奠定基础.
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基于GC-MS同时测定蓬莪术及其醋制品挥发油中β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮的含量
建立一种同时测定蓬莪术及其醋制品挥发油中β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮4种主要有效成分的分析方法,为完善蓬莪术和醋制品挥发油及其制剂的质量控制提供依据,并为进一步优化蓬莪术炮制工艺及机制研究奠定基础.采用GC-MS,以正十三烷为内标物,同时对蓬莪术挥发油中4种主要有效成分进行定量分析.色谱条件为Agilent 19091 S-433柱(0.25 μm×250 μm×30 m),进样口温度250℃,初始温度60℃,保持1 min,以5℃·min-1速率升温至110℃,保持5 min,以1℃·min-1速率升温至140℃,以5℃·min-速率升温至160℃,以10℃·min-速率升温至240℃,载气为氦气,流速1.0mL·min-1,进样量1 μL.质谱条件为EI源,轰击电压70 eV;正离子模式,离子源温度200℃,以选择离子检测(SIM)定量,选择m/z 85.1,93.1,121.1,107.1,180.1分别为正十三烷、β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮的检测离子.蓬莪术挥发油中β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮全部检出,分离效果较好;在各自浓度范围内均有良好的线性关系;平均回收率在98.2％～101％.经过方法学验证,该方法可有效地对蓬莪术和醋制品挥发油及其相关制剂的质量进行控制.
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支持向量机法优化复方威灵仙喷雾剂的水提工艺研究
该文优化了复方威灵仙喷雾剂的水提工艺.实验采用L9(34)正交试验设计复方威灵仙喷雾剂的水提工艺;熵值法求解各有效成分及出膏率的权重系数;再利用支持向量机结合遗传算法参数寻优建立模型,网格搜索优化复方威灵仙喷雾剂的工艺条件.结果显示经过新方法优化后的工艺条件为水提3次,每次2h,加水倍数为6.支持向量机在此条件下的预测值与验证的实际值相比,相对误差为1.23％.将支持向量机法与传统的正交直观分析方法进行对比,结果表明这种新方法用于优化复方威灵仙喷雾剂水提工艺更精确,可靠.
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基于炮制学理论初探知母润肠通便作用的有效成分
该实验对知母盐炙前后水煎液通便作用及化学成分进行比较研究,通过观察生、盐知母水煎液对便秘大鼠的通便作用,采用超高效液相-质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对知母盐炙前后化学成分进行比较,苯酚硫酸法测定其总糖含量.盐知母水煎液低、中、高剂量组使大鼠粪便粒数显著增加,与同等剂量生知母相比有显著差异(P＜0.05);总离子流图比较无明显差异,但总糖含量明显高于生知母.结果表明,知母盐制品在同等剂量时通便作用明显强于生品,与其盐制后甘味的作用增强有关,是其滋阴降火作用增强的具体体现;糖类化合物可能是其滋阴降火作用的物质基础,也是知母甘味的物质基础.
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同时制备克级高纯度酪醇、大花红天素及红景天苷的工艺研究
酪醇、大花红天素及红景天苷3种化合物均是红景天的主要活性成分,具有广泛的药理活性.该实验首次从大花红景天中同时分离出克级高纯度的酪醇、大花红天素及红景天苷,红景天经70％乙醇提取后,以3种化合物的收率为指标,对树脂工艺进行优化筛选,再利用硅胶柱分离纯化,终同时得到克级高纯度的酪醇、大花红天素及红景天苷,经HPLC测定,3种化合物的纯度均超过98％.该方法工艺简洁、操作简单、有机溶剂用量少、收率及重复率都很高,适合3种化合物的同时制备.
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离子液体辅助萃取山高粱中4种黄酮类成分的研究
建立离子液体1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([HMIM] PF6)/甲醇溶液为萃取剂超声萃取,结合反相高效液相色谱同时测定山高粱中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和山柰酚4种黄酮成分的方法.采用Purospherstar RP-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)进行分离,以乙腈-甲醇-0.4％磷酸水溶液梯度洗脱,流速0.7 mL· min-1,紫外检测波长360 nm,柱温室温.在优化条件下,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和山柰酚分别在2.54×10-～2.54,2.50×10-2 ～2.50,1.54×10-3 ～0.154,1.49×10-3～0.149 μg线性关系良好,平均加样回收率分别为101.1％,98.90％,101.0％,101.6％.该方法绿色环保、简单快速,结果准确可靠,为山高粱中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和山奈酚的分析提供了有效的方法.
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微波连续抽提用于灵芝三萜类成分的分析
结合索氏提取的原理,自制了微波连续抽提装置,通过与传统方法的比较,研究了微波连续抽提法的特点和萃取效率,并将其用于灵芝三萜类成分的分析.该法的萃取条件为:以95％乙醇为萃取溶剂,微波功率200 W,微波时间14.5 min(5个循环).将上述条件下的萃取结果与传统的回流提取、索氏提取、超声提取和微波萃取法进行比较.结果,微波连续抽提和常规的微波萃取分别需要14.5,10 min即可将灵芝三萜类成分的提取量达到高,而其他非微波提取的方法则需要几十分钟甚至上百分钟.微波萃取10 min与回流提取120 min所得灵芝三萜的量基本一致,明显高于索氏提取和超声提取法,同时又远低于微波连续抽提法.更为重要的是,由三萜提取量所占粗提物的比例可知,微波连续抽提所得提取物的纯度远远优于其他方法.微波连续抽提有效结合了微波萃取和索氏提取的优点,因此比常规的微波萃取更能将药材中的目标成分提取完全,使分析结果更为准确,为中药的成分分析提供了一种新颖的、高效、快速、可靠的样品前处理技术.同时,由于该方法提高了药材利用率,并且所得提取物具有杂质含量低,有效成分含量高的特点,也可将其用于中药成分的制备和提取工艺的研究.
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中国近30年临床研究中安慰剂的应用现状
分析近30年来中国临床研究文献中有关安慰剂的信息,包括安慰剂的剂型、成分、制备工艺、质量监控等方面内容.检索中国知网(CNKI)全文数据库,初步得到安慰剂临床研究相关文献700篇,再通过手工筛选得符合纳入标准的文献共301篇,后通过逐一阅览文献提取研究中安慰剂的相关信息,并做出统计及分析讨论.结果表明,中国随机安慰剂对照临床研究中安慰剂剂型种类呈现出多样化的特点,组成成分的报道极度欠缺,301篇文献中明确描述了安慰剂制备工艺或具体配比情况的仅有17篇.安慰剂对照的临床试验所研究疾病的疾病谱较广,但从系统分类来看疾病具有一定的的趋向性.安慰剂在盲法临床研究中作用关键,但临床研究中研究者对安慰剂的叙述普遍不够,可能是由于临床研究者对安慰剂关注程度不够,或因其更关注研究过程,或其他客观条件限制所致;且安慰剂的生产、质量监控、质量评价也亟待标准化.
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Logistic模型和ROC曲线对参麦注射液致不良反应的预测分析
应用Logistic模型和ROC曲线探讨参麦注射液致不良反应/事件的相关危险因素,对其相关不良反应/事件发生的风险进行预测.采用前瞻性、多中心、大样本、巢式病例对照研究的方法收集使用参麦注射液患者的病历资料,分析接受参麦注射液治疗患者致不良反应/事件的危险因素,建立Logistic模型,绘制风险因素的ROC曲线.研究期间有7 632例(男3 477名,女4 155名)患者纳入研究,8例患者出现药品不良反应/事件.多因素Logistic模型分析显示,年龄分组(≥50) (OR =5.061,95％CI:2.197 ～7.924,P=0.001)、用药总天数(OR=-1.020,95％ CI:-1.652～,-0.388,P=0.002)、单次用药剂量(OR=0.245,95％ CI:0.127 ～0.364,P=0.000)等是发生药物不良反应/事件的独立危险因素.根据Logistic模型分析结果,分别用年龄分组(≥50)、用药总天数、单次用药剂量及联合预测因子构建ROC曲线,联合预测因子的ROC曲线下面积(0.975 3,95％ CI:0.9443～ 1.000,P＜0.005)大于其他3个单一指标,风险预测价值优先.与参麦注射液不良反应的独立危险因素包括年龄分组(≥50)、用药总天数和单次用药剂量.在临床实际工作中,可将患者的年龄分组(≥50)用药总天数和用药剂量带入联合预测因子计算公式(P预测=1/[1 +e-(-21.588+5.061×X年龄-1 020×Xtl+0.245×XmL)]),预测患者可能发生不良反应,以便调整给药方案.
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防风通圣颗粒治疗亚急性湿疹的随机、安慰剂对照研究
为进一步评价防风通圣颗粒治疗亚急性湿疹(表寒里热、表里俱实证)的有效性和安全性开展临床试验.将符合纳入标准的108例患者采用按照中心分层、区组随机的方法,按照2:1分为试验组和安慰剂对照组.试验组服用防风通圣颗粒,3g/次,2次/日;对照组服用防风通圣颗粒模拟剂,3g/次,2次/日,疗程14 d.观察2组中医证候疗效、皮肤症状疗效等,并观察在用药过程中的不良事件及不良反应.试验结果显示共入组108例病例,1例因违反方案退出试验.其中试验组71例,对照组36例,107例病例均全部完成临床试验.中医证候疗效:用药2周后试验组愈显率33.81％ (24/71),对照组愈显率0％(0/36),试验组优于对照组,2组比较差异有统计学意义.中医证候积分:用药2周后试验组下降(12.82±7.96),对照组下降(3.67±4.12),试验组下降幅度大于对照组,2组比较差异有统计学意义.皮肤症状疗效:用药2周后试验组愈显率25.35％(18/71),对照组愈显率0％ (0/36),试验组优于对照组,2组比较差异有统计学意义.皮肤症状积分:用药2周后试验组下降(10.04±7.17),对照组下降(2.33±3.57),试验组下降幅度大于对照组,2组比较差异有统计学意义.试验过程中无明显与药物有关的不良事件.说明防风通圣颗粒治疗亚急性湿疹(表寒里热、表里俱实证)安全、有效.
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“二神丸”中补骨脂、肉豆蔻炮制前后对脾肾阳虚泄泻大鼠血清代谢组学的影响
运用代谢组学的方法,研究“二神丸”中补骨脂、肉豆蔻炮制前后干预脾肾阳虚泄泻大鼠血清内源性代谢物的变化,筛选出与脾肾阳虚泄泻相关的差异代谢物,探讨与脾肾阳虚泄泻相关的代谢模式及“二神丸”中补骨脂、肉豆蔻炮制增效机制.检测分析各组SOD,MDA,应用GC-MS检测不同时段的大鼠血液代谢图谱,采用主成分分析(PCA)方法和偏小二乘法判别分析方法(PLS-DA)分析,通过变量重要性投影(VIP)和t检验筛选潜在生物标志物.结果显示,“二神丸”能使SOD活性升高,MDA含量降低.确定了10个与脾肾阳虚泄泻相关的差异代谢物.与模型组比较,“二神丸”干预后代谢物水平不同程度回调,且“二神丸”Ⅳ组(盐炙补骨脂+麸煨肉豆蔻)效果好,推测“二神丸”中补骨脂、肉豆蔻炮制增效可能从抑制过氧化、改善糖脂、氨基酸及能量代谢等多层面协同发挥作用,具有多靶点性.
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藏医学药用唇形科植物药材品种与标准整理
对藏医学中药用唇形科植物的品种、基原及标准状况进行了分析整理.结果表明,相关文献记载的藏医学药用的唇形科植物共有21属71种(含变种),涉及44个药材品种,其中与中药交叉使用的品种7个,约占9.9％;在我国现行各级药材标准中收载的药材品种19个,约占43％;涉及的其原植物有27种,约占38％.在藏药的标准和文献中,药材的藏文名称和藏文音译汉文名称用字以及其原植物物种存在着较大的差异.除少数几种与中药材交叉使用的品种在《中国药典》中有比较完善的标准规定外,而在《部颁标准·藏药分册》、《藏药标准》及地方标准中收载的品种仅有性状、显微或理化鉴别等项规定,标准极不完善.通过文献考证、资源和使用现状调查,结合现代药学研究推动藏药材的品种-其原规范、质量标准体系建立是当前迫切需要开展的工作.
