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骨髓间充质干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠缺血皮质神经元核抗原和神经元素1表达的影响

牟青杰;赵岩松;王晓莉;王芳;蔡立珍

摘要: 目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)移植对局灶性脑缺血大鼠缺血皮质神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)和神经元素1(neurogenm1,Ngn1)的影响.方法 64只健康雄性成年Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照(normal,N)+磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS)组、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)+PBS组、正常对照+BMSC组和MCAO+ BMSC组,每组16只.线栓法制作大鼠MCAO模型.体外培养BMSC,在模型制作后24 h进行脑内移植.采用MRI活体检测脑梗死体积,NeuN/DAPI和Ngn1/DAPI免疫荧光双标法以及蛋白印迹法检测缺血周围脑组织NeuN和Ngn1表达.结果 移植后14 d,MCAO组大鼠T1和T2加权成像均可见大脑皮质和纹状体存在异常信号区,MCAO+ BMSC组脑梗死体积显著性小于MCAO+ PBS组(32.5%±4.2%对47.9%±7.9%;P<0.001).免疫荧光双标染色显示,MCAO+ PBS组NeuN+/DAPI+[(976.2±87.5)个/mm2对(1 908.3±127.8)个/mm2;P<0.01]和Ngn1 +/DAPI+[(251.6 ±23.1)个/mm2对(285.1 ±25.2)个/mm2;P<0.01]细胞数量均显著性少于N+ PBS组,但MCAO+ BMSC组NeuN+/DAPI+[(1 439.9±101.7)个/mm2;P<0.01]和Ngn1 +/DAPI+[(356.3±35.6)个/mm2;P<0.01]显著性多于MCAO+ PBS组.蛋白质印迹分析显示,MCAO+ PBS组NeuN(0.69±0.06对0.91 ±0.09;P<0.01)和Ngn1(0.53 ±0.05对0.62±0.07;P<0.01)蛋白表达水平显著性低于N+PBS组,但MCAO+ BMSC组NeuN(0.82 ±0.07;P<0.01)和Ngn1(0.77 ±0.09;P <0.01)蛋白表达水平显著性高于MCAO+ PBS组.结论 BMSC移植可促进NeuN和Ngn1表达,减轻MCAO脑损伤.

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