疟原虫配子体蛋白Pys48核酸疫苗的构建与免疫活性观测

为探讨约氏疟原虫配子体蛋白Pys48核酸疫苗的免疫效果及其效应,以约氏疟原虫Pys48全基因序列克隆和真核表达载体pcDNA3.1+为基础获得核酸重组质粒,肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中特异性抗体水平,并通过IFA检测疫苗的免疫活性以及免疫血清对有性阶段虫体发育的阻断效应.测序结果和酶切鉴定均证实构建的质粒为Pys48全基因插入质粒.ELISA结果显示疫苗免疫小鼠血清特异性抗体滴度明显高于对照组;IFA结果显示免疫血清能够明显阻断配子体向合子与动合子的发育,并且其传播阻断效应与免疫血清呈剂量依赖性关系.实验表明,真核表达载体pcDNA3.1+表达的Pys48核酸疫苗具有良好的免疫原性,其免疫血清可显著抑制有性阶段原虫的进一步发育.

利用SAS中非线性混和效应模型分析城市中阿拉伯按蚊水体滋生环境的时空变异系数

目前对于时间序列分析中出现的空间自相关现象,已经有很多的的文献详述了如何对这种现象进行识别与建模分析.但是,对于撒哈拉以南非洲地区疟疾的主要媒介-阿拉伯按蚊幼虫滋生地的地理空间相关性方面的研究还没研究报道.在空间回归分析中,空间相关性主要通过空间滤波方法完成,该滤波方法通过分析时间序列中随机误差的分布特征.运用基于地理连接矩阵的非参数特征向量分解空间滤波方法,以寻求能鉴别阿拉伯按蚊幼虫滋生水生环境的预测因子.首先,选择肯尼亚的两个城市, Kisumu 和 Malindi,进行了蚊虫滋生水体的现场采样工作.然后获取快鸟(QuickBird) 卫星数据;并利用该数据对冈比亚按蚊的滋生水体进行遥感影像分析.把这些水体的地理空间信息数据输入SAS/GIS模型中,进行单因素分析、相关分析、数据分布分析、以及全局空间自相关统计.然后,利用空间协方差参数生成局部空间自相关指数(如:Morans 指数).并由该模型生成了选择性特征向量的粗子集,此粗子集可以被用来研究这些样方变量间的空间互作效应.后,利用贝叶斯系数估计法定义矩阵中各参数的期望先验参数值,得知水体环境的深度是决定该水体能否滋生阿拉伯按蚊的关键预测性因素,并且深度与其滋生可能性呈明显的正相关关系;由转移空间连接矩阵生成的特征向量的特殊子集可以获知由阿拉伯按蚊水生环境预测因子以及所建立的空间回归模型中空间误差的相关性.

诱蚊诱卵器不同指标在白纹伊蚊种群动态研究中的应用

为了研究诱蚊诱卵器的不同指标在不同孳生地状态的白纹伊蚊Aedes albopictus 种群动态研究中的应用效果,2006年在上海市共青森林公园(试验区)和内燃机研究所(对照区)进行实验研究.试验中试验区采用各种方法清除孳生地,对照区不采取任何措施.采用诱卵阳性率,诱卵器平均卵数,诱蚊阳性率记录白纹伊蚊种群动态.结果显示,诱卵阳性率和诱卵器平均卵数在对照区和试验区都有很好的相关性;相比诱卵阳性率,诱蚊阳性率灵敏度在对照区和试验区分别为78.6%和67.6%,特异度分别为96.2%和98.7%,符合率分别为90.3%和94.2%.可见诱蚊诱卵器在不同孳生地水平的场所研究白纹伊蚊种群动态好指标都为诱卵阳性率,其诱捕成蚊功能是有效补充.

Hydroethidine-流式细胞术法相对定量分析恶性疟原虫虫血率及其生长周期

本文结合活体荧光染料Hydroethidine (HE)和结合流式细胞术,对实验室培养的恶性疟原虫虫血率及其生长周期进行了相对定量研究和分析,以期寻求一种可替代血涂片镜检法的检测方法.结果表明,染料Hydroethidine工作浓度10 μg/ml即可获得与50 μg/ml相同的效果;Hydroethidine-流式细胞术法与常规血涂片镜检法具有强相关性;此外,该方法可以进一步分析培养恶性疟原虫中早期(环期、滋养体期)和晚期(裂殖体期)的组成和比例.因此,Hydroethidine-流式细胞术法作为一种客观、准确、快速的相对定量分析方法,在疟原虫研究中具有广泛的应用空间,可以替代血涂片镜检法.

贝氏柯克斯体抑制宿主单核细胞的碳源代谢

贝氏柯克斯体是一种专性细胞内寄生的革兰阴性小球杆菌,为Q热的病原体.本文通过比较贝氏柯克斯体感染单核细胞和非感染单核细胞的蛋白表达谱,研究该病原体感染引发宿主细胞表达差异的蛋白.用贝氏柯克斯体I相毒株感染人单核细胞(THP-1),采用等电聚焦和SDS-PAGE双向电泳对感染单核细胞和非感染单核细胞进行比较蛋白质组学研究,用电泳图谱分析软件发现它们之间的差异表达蛋白,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定差异表达蛋白.结果发现,电泳图谱分析发现137个差异蛋白,质谱分析鉴定到15种差异蛋白与细胞生理代谢有关.这些蛋白的表达变化说明贝氏柯克斯体感染单核细胞使宿主细胞碳源代谢受到抑制,由此可能影响单核细胞正常杀菌功能,而有利于贝氏柯克斯体在细胞内的生存.

调节性T细胞修饰前炎症应答对小鼠脑型疟疾发生的影响

为探讨调节性T细胞(Tregs)对伯氏疟原虫感染所致鼠脑型疟发生和感染结局的影响机制,用伯氏疟原虫ANKA株分别感染对照组和抗CD25单克隆抗体注射组C57BL/6小鼠,计数红细胞感染率;感染前和感染后3、5、8天制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾Tregs百分含量;ELISA和Griess方法检测脾细胞培养上清IFN-γ、IL-10和NO水平.结果表明大多数C57BL/6鼠于感染后8～11天死于脑疟,抗CD25单克隆抗体注射组小鼠感染后3～4周死于贫血和过度原虫血症.对照组小鼠脾细胞培养上清IFN-γ、NO、IL-10水平于感染后开始升高,感染后5天达到峰值,感染后8天与感染后5天相比,IFN-γ、NO轻微下降,IL-10显著下降.感染后3、5天,实验组IFN-γ、NO水平显著高于对照组,IL-10水平显著低于对照组.感染后8天,实验组和对照组IFN-γ、NO、IL-10水平得到逆转.这表明Tregs通过修饰前炎症应答影响伯氏疟原虫感染鼠脑型疟发生和感染结局.

版纳池蝇雌性的重新描述(双翅目:蝇科)

本文描述了海南省的一个新纪录种,即版纳池蝇 Limnophora bannaensis Zhang, Xue et Wang, 1998,补充了雌性外部形态的描述,对雌性生殖器结构进行了详细描述,并绘制了生殖器特征图.根据捕获的交尾标本的生殖器特点提出了交配抱握扣(Copulation hook)的形态学名词概念.

西安地区汉坦病毒L及S部分片段的编码序列分析

应用巢氏PCR法从陕西西安地区间接免疫荧光抗原初检为阳性的黑线姬鼠标本中扩增汉坦病毒的L和S片段部分序列.序列分析显示:不同标本来源的汉坦病毒均为汉滩型病毒,彼此之间L和S部分片段序列同源性较高,与贵州地区优势汉滩型病毒S2/L4群毒株同源性高,分别为95.0%～97.0%和97.7%～99.3%,但与该地区已报道的汉坦病毒同源性较低.系统发育树显示:所有来自西安的病毒株处在同一个进化分支上,但可分成两个较小的分支.证实目前检测到的西安地区流行的汉坦病毒株与贵州地区汉滩型病毒株亲缘关系近,而与当地既往流行毒株的差异较大,究竟是西安地区汉坦病毒流行株发生了变化还是当地同时流行多种毒株还有待于进一步研究证实.

虻科昆虫与宿主防御系统间相互关系的分子基础

牛虻是一种吸血的昆虫,在长期进化过程中,与宿主形成了稳定的寄生关系.本文主要从吸血性牛虻的角度来阐述其如何调整与宿主的关系来适应寄生生活,介绍牛虻中各种已经被鉴定的药理活性分子的生理功能及其与宿主防御的关系,包括止血和免疫反应相关的活性,同时对这些分子潜在的医学价值进行展望.

免疫佐剂在寄生虫核酸疫苗中的应用研究

核酸疫苗是近年发展起来的一种新型疫苗,它能诱导机体产生持久的体液免疫和细胞免疫应答,能够抗病毒、细菌和寄生虫的感染,对自身免疫性疾病和过敏性疾病也有一定的疗效.但与传统的灭活疫苗相比,其免疫效价还比较低.目前研究表明,一些免疫佐剂如细胞因子、CpG ODN 等有助于提高核酸疫苗的免疫效价,这为更有效、安全的核酸疫苗的研制开发开辟了新的思路.本文就应用免疫佐剂提高寄生虫核酸疫苗免疫效价的新研究进展做一综述.

书讯

河北邯郸某学校隐翅虫皮炎暴发的流行病学调查

2008年9月10日,河北省邯郸市磁县岳城镇中学发生一起急性皮炎暴发事件,到调查结束时共发病100人,罹患率为13.3%.经现场调查和采集昆虫样本,结果显示此次急性暴发性皮炎为隐翅虫皮炎暴发,原因是学校地处郊外,教室无纱窗及门帘,学生晚自习采用日光灯照明,经采取灭虫等有效控制措施后,疫情得到控制.

2008年浙江省血吸虫病疫情监测结果分析

为掌握血吸虫病疫情,提供制定防治策略的科学依据,根据<浙江省血吸虫病监测巩固方案(2007年修订版)>开展螺情、病情监测及晚期血吸虫病人救助.2008年,全省54个县的438个乡(镇)3 751个村开展查螺,投工163 145工,在21个流行县(市、区)中查出有螺面积96.05 hm2,解剖钉螺81 821只,未发现感染性钉螺.查病199 379人,未发现本地患者,但查到输入性病人13例.全省共救助晚期血吸虫病人1 060例.浙江省血吸虫病疫情稳定,但残存钉螺面积居高不下,输入性病例时有发生,今后血防重点是查灭钉螺和防控外来传染源.

红枣牛肉汤与肝浸液培养阴道滴虫比较

用自制红枣牛肉汤培养基培养疑似滴虫性阴道炎患者阴道拭子标本30份,与传统肝浸液培养基做对照.结果阴道毛滴虫在红枣牛肉汤培养基的阳性率较肝浸液培养基高,差异有统计学意义(P<0.05).结果表明改良后的红枣牛肉汤培养基更适合于临床试验室中阴道滴虫的培养.