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微型种植体导致牙龈上皮异位植入的可能性初探
目的:初步探讨微型种植体植入时携带牙龈上皮进入牙槽骨的可能性.方法:以Beagle犬为实验动物,在种植部位牙龈处注射含GFP的2型腺相关病毒(adeno-associated viral-2-green fluorescent protein,AAV2-GFP).3周后采用无切口植入方式植入12枚微型种植体,并于当天处死动物,制作连续组织切片,通过GFP荧光和角化蛋白免疫组化检测种植体周围牙龈上皮是否存在.结果:两种检测方法均未发现种植体-骨界面有牙龈上皮的存在.结论:微型种植体植入时未发现携带牙龈上皮进入牙槽骨.
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Semaphorin3A及其受体Neuropilin-1在人舌鳞状细胞癌/大鼠背根神经节共培养中对轴突芽生的影响
目的:构建人舌鳞状细胞癌/大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)体外共培养的实验模型,研究神经轴突导向因子Semaphorin 3A(Sema3A)及其受体Neuropilin-1(NRP-1)在肿瘤排斥神经的现象中可能发挥的作用.方法:鉴定Sema3A在人舌鳞状细胞癌细胞系SCC25中的表达以及NRP-1在大鼠DRG神经元中的表达,建立人舌鳞状细胞癌/大鼠DRG体外共培养的实验模型,针对NRP-1靶点进行特异性拮抗,观察SCC25排斥DRG轴突生长的程度变化.结果:免疫荧光结果显示,Sema3A在SCC25中表达,而NRP-1在大鼠DRG神经元中也呈阳性表达;共培养实验结果表明,DRG组织块中NRP-1被特异性拮抗后,SCC25对DRG轴突的排斥程度较对照组明显减弱.结论:Sema3A及其受体NRP-1在SCC25排斥大鼠DRG轴突生长过程中起着重要作用.
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隆力奇DL复合酶牙膏对部分口腔微生物体外抑菌作用的实验研究
目的:检测隆力奇DL复合酶牙膏(含葡聚糖酶和溶菌酶)对口腔部分微生物的抑菌作用.方法:采用Dentocult SM法检测葡聚糖酶水溶液和隆力奇DL复合酶牙膏提取液对变形链球菌黏附性的作用;采用琼脂扩散法检测溶菌酶水溶液和隆力奇DL复合酶牙膏对伴放线放线杆菌、牙龈卟啉单胞菌和粘性放线菌的抑菌作用.结果:葡聚糖酶水溶液和隆力奇DL复合酶牙膏提取液能够减少变形链球菌在Dentocult SM附着板上的黏附;溶菌酶水溶液可以在伴放线放线杆菌、牙龈卟啉单胞菌和粘性放线菌的含菌培养基上形成清晰的抑菌环,其直径大小随溶菌酶浓度增加而增大;隆力奇DL复合酶牙膏也可在牙龈卟啉单胞菌和粘性放线菌的含菌培养基上形成清晰的抑菌环,而在伴放线放线杆菌培养基上形成的抑菌环不清晰.结论:葡聚糖酶和隆力奇DL复合酶牙膏能够降低变形链球菌的黏附性;溶菌酶和隆力奇DL复合酶牙膏对部分口腔微生物具有一定的体外抑菌效果.
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不同组织来源单核/巨噬细胞对伴放线放线杆菌吞噬能力的比较研究
目的:比较血液单核细胞(monocytes,Mo)、肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)、腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PM)和肝脏枯否细胞(kuffer cells,KC)对伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)吞噬能力的差别.方法:3只健康新西兰兔,分离培养Mo、AM、PM和KC;荧光素标记Aa,以感染复数25∶1的比例感染细胞;流式细胞术检测0.5、1.0、1.5 h时吞噬细菌的阳性细胞率和平均荧光强度,计算吞噬指数.结果:1.5 h内,随着孵育时间增加,AM和PM对Aa吞噬能力逐渐升高,Mo和KC的吞噬能力在1 h达到高峰;Mo、AM、PM和KC吞噬功能存在明显差异,孵育0.5 h吞噬指数AM、PM＞Mo、KC,1.0 h时AM＞PM＞Mo、KC,1.5 h时AM＞PM＞KC＞Mo.结论:不同部位单核/巨噬细胞对Aa的吞噬能力不同,可能是造成牙周病对不同部位影响不同的重要原因.
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中国汉族人群rs1229984多态性与头颈癌发病风险的关联研究
目的:研究寻找与中国汉族人群头颈癌遗传易感性相关的多态位点.方法:采用病例-对照的研究设计,运用TaqMan基因分型方法,在397例新发头颈癌患者和900例性别、年龄相匹配的对照中分析了5个多态位点(rs1494961、rs1229984、rs1789924、rs971074、rs4767364)的遗传变异与中国汉族人群头颈癌易感性的关系.结果:rs1229984(A>G)的遗传变异能够显著影响头颈癌的发病风险.携带rs1229984 AG/GG基因型者罹患头颈癌的风险较携带AA基因型者增加34%(调整OR=1.34,95% CI=1.05~1.71).本研究未发现其余4个位点多态性与头颈癌之间存在显著性相关.结论:染色体4q23区域的rs1229984多态性与中国汉族人群头颈癌的易感性有关.
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Kimura病的病理学分析
目的:探讨Kimura病(Kimura′s disease,KD)的临床病理学特点,提高对该病的认识及诊断.方法:分析和观察7例KD的临床资料、病理组织学表现及免疫组织化学特征.结果:7例KD患者均为男性,发病年龄21~73岁,主要表现为头颈部皮下或大唾液腺的无痛性肿块,组织学上以淋巴组织增生为主,可见淋巴滤泡形成,生发中心扩大,滤泡间见血管增生,大量嗜酸性粒细胞浸润.免疫组织化学显示KD中的淋巴滤泡表达B细胞抗原,滤泡间的淋巴细胞多表达T细胞标记.结论:KD是一种少见的淋巴组织增生性疾病,需与部分富含淋巴组织的肿瘤鉴别,组织病理学及免疫组化对其诊断具有重要意义.
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RUNX家族蛋白在小鼠磨牙发育过程中的表达分析
目的:观察Runt相关转录因子(Runt-related transcription factor,RUNX)1、RUNX2、RUNX3在小鼠下颌第一磨牙不同发育阶段的表达情况,探讨其在Balb/c小鼠牙齿发育过程中的作用机制.方法:取Balb/c小鼠出生前19.5 d和出生后0、6、14、28 d的包含下颌第一磨牙胚或牙齿的下颌骨组织,分别进行HE染色和免疫组织化学方法观察牙齿发育中RUNX1、RUNX2、RUNX3的表达情况.结果:RUNX1在胚胎19.5 d的小鼠牙胚中有表达,出生当天、出生后6、14、28 d,RUNX1的表达递增.RUNX2在胚胎19.5 d和出生当天牙胚中呈颗粒状表达;出生后6、14、28 d均有表达,表达量在出生后6 d呈现低,然后又在14、28 d时升高.RUNX3在胚胎19.5 d和出生当天牙胚中基本无表达;出生后6 d,RUNX3在牙本质中表达量低,出生后14、28 d时表达量逐渐升高.结论:RUNX1在成釉细胞分化、成牙本质细胞分化和牙本质成熟过程中起一定作用,RUNX2与牙本质的成熟过程相关,RUNX3主要与后期牙本质的成熟和牙齿形态相关.
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PCR-DGGE检测早期儿童龋治疗前后口腔菌群多样性的初步研究
目的:应用PCR-变性梯度凝胶电泳技术(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术检测早期儿童龋治疗前后唾液中微生物多样性的变化.方法:选取北京大学燕东幼儿园22名3~5岁儿童进行口腔检查,在龋齿治疗前和治疗后2周分别取样,采用PCR-DGGE技术检测受试儿童唾液样本,分析治疗前后唾液微生物多样性的变化.结果:治疗前唾液样本DGGE条带数为23±2.9,治疗后唾液样本DGGE条带数为28±4.1,差异有显著性(P<0.01);在同一时期内各唾液样本DGGE图谱的相似性高于不同时期样本之间.结论:PCR-DGGE技术可用于与龋病相关细菌的生物多样性的研究以及监测微生物群落组成的动态变化.
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17β-雌二醇对人根尖牙乳头干细胞RANKL、OPG表达影响的研究
目的:探讨17β-雌二醇对人根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs)核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响.方法:通过酶消化法分离培养SCAPs,将SCAPs分别于对照组(普通培养基+10 μmol/L 无水乙醇)和含0.1 μmol/L 17β-雌二醇的培养基培养3 d和7 d后,实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法分别检测RANKL、OPG mRNA和蛋白表达.结果:17β-雌二醇刺激3 d和7 d组,OPG mRNA和蛋白表达均较对照组升高(P<0.01),RANKL mRNA和蛋白表达均较对照组降低(P<0.01).结论:17β-雌二醇可能通过调节RANKL/OPG系统,参与调节SCAPs成牙/骨及破牙/骨活性.
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HDAC8过表达慢病毒载体构建、转染及表达的研究
目的:构建大鼠组蛋白去乙酰基转移酶(histone deacetylase 8,HDAC8)基因过表达的慢病毒载体,转染大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)后观察HDAC8的表达.方法:采用DNA重组技术将HDAC8基因插入到慢病毒表达载体质粒pGC-FU中,重组获得慢病毒载体pGC-FU-HDAC8.重组慢病毒载体经过测序鉴定后,转染293T细胞生产病毒液,用得到的病毒液转染大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法分析转染前后HDAC8表达情况.结果:测序结果证实HDAC8基因正确插入载体中,成功构建大鼠HDAC8基因过表达载体.大鼠BMSCs转染后HDAC8 mRNA及蛋白表达显著上调.结论:针对大鼠HDAC8基因过表达慢病毒载体构建成功,并能有效增强BMSCs中HDAC8基因的表达.
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全反式维甲酸与骨形态发生蛋白的联合成骨作用研究进展
骨再生和骨重建过程依赖于多种生物活性因子的时序性表达及协同效应.利用不同生长因子之间的协同作用,是目前解决极限骨缺损、促进骨再生的研究热点之一,也是降低生长因子的临床有效使用剂量的途径之一.本文就目前国内外关于应用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)协同促进骨再生和骨重建的研究现状做一综述.
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齿科常用金属合金的腐蚀及细胞毒性研究进展
在齿科的临床治疗中,金属合金常用于牙体及牙列缺损的修复.在口腔复杂的环境中,金属易发生电化学腐蚀,析出金属离子.这些金属离子会在局部或全身分布,引起局部或全身的过敏反应.体内外实验已发现金属离子会造成细胞DNA的损伤,导致细胞因子释放的增加.但是,金属离子的细胞毒性反应机制目前尚没有充分的研究来证实.本文对导致齿科金属腐蚀的因素和细胞毒性的研究进展做一综述.
