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人口腔癌相关成纤维细胞的分离培养及鉴定
目的:分离培养及鉴定口腔癌相关成纤维细胞( CAFs),为探究CAFs可能在肿瘤微环境促进口腔癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用奠定基础。方法:用组织块培养法和酶消化法分离培养、纯化原代口腔癌相关成纤维细胞CAFs和口腔黏膜正常成纤维细胞( NFs);细胞免疫荧光技术及免疫蛋白印迹法对口腔CAFs和NFs进行鉴定。结果:口腔CAFs和NFs分离培养成功,口腔CAFs呈长梭形,达到一定密度时呈多层生长,排列紊乱;NFs呈多胞质突的扁平星状,无重叠生长现象,排列有一定方向性。上皮标志物细胞角蛋白18( CK18)免疫荧光染色在口腔CAFs和NFs均呈阴性,间质标志物波形蛋白( Vimentin)染色均呈阳性。α?平滑肌动蛋白(α?SMA)、成纤维细胞特异性蛋白?1(FSP?1),成纤维细胞激活蛋白(FAP)、血小板衍生生长因子受体α( PDGFR?α)在CAFs染色呈阳性,而在NFs中染色呈阴性。结蛋白( Desmin)在CAFs和NFs中染色均呈阳性。蛋白表达水平上,相对于NFs,CAFs中α?SMA、PDGFR?α蛋白表达呈升高趋势,FSP?1呈下降趋势,而FAP、Desmin在 NFs和CAFs中表达无明显差异。结论:CAFs与NFs相比,在形态结构、生长方式、蛋白表达等方面均有明显差异。
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后牙氧化锆单端固定桥抗折强度的研究
目的:探讨冷热循环对氧化锆晶相结构的影响,并测试两种不同厚度后牙氧化锆单端固定桥基底支架的抗折强度。方法:制作10 mm ×15 mm ×1 mm氧化锆试件2个,分为冷热循环组(10000次,5~55℃)和对照组,用X射线衍射仪( XRD)测定试件单斜相含量。运用CAD/CAM系统制作后牙氧化锆单端固定桥基底支架12个,按照基底冠厚度分为0.7 mm和0.8 mm两组,每组6个。将所有支架粘固于钴铬合金模型上,在万能力学试验机上进行抗折强度测试,记录试件断裂时的临界载荷并进行单因素方差分析。结果:冷热循环前后的氧化锆试件均未出现单斜相;后牙氧化锆单端固定桥基底支架断裂的临界载荷分别为(1262.08±100.57)N(0.7 mm组)和(1345.87±191.17)N(0.8 mm组),经统计学分析无显著性差异(P>0.05)。结论:冷热循环对氧化锆晶相结构无影响,两组后牙氧化锆单端固定桥基底支架的抗折强度均大于口腔大咬合力888 N。
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慢病毒载体介导Golli-MBP基因过表达的体内实验初探
目的:通过过表达Golli?MBP基因尝试诱导口腔黏膜产生OLP病损,探讨Golli?MBP在OLP发病中的作用。方法:通过动物体内实验利用慢病毒载体系统包装诱导Golli?MBP过表达基因,将其注射于叙利亚金黄地鼠口腔黏膜下,肉眼观察黏膜改变,HE染色观察组织学改变,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测细胞增殖情况。结果:Golli?MBP未能诱导实验动物口腔黏膜产生肉眼可见的OLP病损变化,7天实验组上皮层细胞凋亡率与对照组无明显差异( P>0.05),14天实验组上皮层细胞凋亡率低于对照组(P<0.05)。7天及14天实验组上皮层细胞增殖率低于对照组(P<0.05)。结论:Golli?MBP 过表达能够抑制叙利亚金黄地鼠颊囊黏膜上皮细胞增殖和凋亡,但未能成功诱导其黏膜产生OLP病损。
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MageD1在口腔鳞癌中的表达及其促进凋亡作用的研究
目的:检测口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中黑色素瘤相关抗原D1( MageD1)的表达,并在口腔鳞癌细胞系HN6中通过转染慢病毒的方法过表达MageD1,探讨其对细胞凋亡的影响。方法:收集临床标本,通过Western blot和RT?PCR的方法检测口腔鳞癌以及HN6细胞系中MageD1的表达量,用载有MageD1的慢病毒转染HN6细胞,检测转染效果和Bax、Cleaved?Casepase3等凋亡相关蛋白的表达,并采用裸鼠荷瘤实验研究肿瘤体内生长的情况。结果:MageD1在口腔鳞癌组织及HN6细胞株中较正常组织呈低表达,Western blot及RT?PCR结果表明,MageD1成功转染并得到稳定过表达MageD1的Lv?Maged1细胞,并且过表达MageD1的HN6细胞中Cleaved?Casepase3和Bax的表达量高于HN6细胞,荷瘤实验证明MageD1具有抑制肿瘤生长作用( P<0.05)。结论:MageD1在口腔鳞癌组织及细胞系中表达降低,过表达MageD1能促进肿瘤细胞凋亡。
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TNF-α抑制miR-21影响小鼠骨髓基质干细胞成骨分化
目的:探讨肿瘤坏死因子?α( TNF?α)是否能通过微小RNA( miR)?21影响小鼠骨髓基质干细胞( mBMSCs)的成骨分化。方法:利用实时定量 RT?PCR检测 TNF?α对 miR?21的影响。在实时定量 RT?PCR、Western blot 等技术验证 TNF?α对mBMSCs成骨能力的影响后,通过转染技术在含有TNF?α的成骨环境下上调miR?21的表达,进而观察转染后mBMSCs的成骨能力。结果:TNF?α抑制mBMSCs成骨分化,转染miR?21至含有TNF?α的成骨环境下的mBMSCs能部分恢复其成骨分化能力。结论:miR?21介导的成骨分化是TNF?α抑制mBMSCs成骨的途径之一。
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肿瘤相关巨噬细胞和MMP-2在成釉细胞瘤中的表达及意义
目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞( TAMs)和基质金属蛋白酶?2( MMP?2)在人成釉细胞瘤( ABs)中的表达及意义。方法:采用免疫组化通用二步法,分别检测43例ABs和10例正常口腔黏膜中CD68标记的巨噬细胞数目及MMP?2的表达情况。结果:TAMs和MMP?2在ABs中的表达均高于正常黏膜,差异有统计学意义( P<0.01)。在ABs中,TAMs主要表达于肿瘤间质,MMP?2主要表达于肿瘤实质,MMP?2表达强度随着TAMs计数增加而增加,二者呈正相关关系( r=0.331,P<0.05)。结论:ABs中TAMs和MMP?2的共同表达可能在其发生发展中发挥重要作用。
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白念珠菌RAS1基因高表达菌株的构建及鉴定
目的:构建白念珠菌RAS1基因高表达菌株pCaEXP?RAS1?CAI4。方法:将白念珠菌RAS1基因的开放阅读框( ORF)置于高表达载体pCaEXP的启动子MET3之后,构建高表达质粒载体pCaEXP?RAS1。将整合的重组质粒转化进入大肠杆菌DH5α,经扩增后采用质粒抽提试剂盒大量制备pCaEXP?RAS1质粒。单酶切线性化质粒,将线性化的pCaEXP?RAS1经醋酸锂法转化入白念珠菌CAI4细胞内,随后在SD?ura?met?cys选择性培养基获得转化子,构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。挑取单克隆菌落,经菌落PCR验证阳性转化子,并采用实时定量PCR检验RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平。结果:酶切及测序鉴定表明高表达质粒载体pCaEXP?RAS1构建成功,实时定量PCR检验转化子RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平,表明pCaEXP?RAS1?CAI4菌株构建成功。结论:通过高表达质粒载体pCaEXP?RAS1可以成功构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。
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根尖孔大小对冷冻保存牙移植愈合效果的影响
近年来有关冷冻保存自体牙移植的研究进展迅速,越来越多地得到口腔医师的重视。牙髓组织在牙齿中的重要功能不言而喻,如何在冷冻过程中保存牙髓活力,是冷冻保存完整牙齿所面临的大挑战。本综述阐述了保存牙髓活性对于冷冻保存牙齿移植术成功的重要意义,回顾了根尖孔对活髓保存影响的相关研究,介绍了各种根尖切除方法在成熟牙冷冻保存中的应用。
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牙周膜来源细胞膜片在牙周再生中的应用研究进展
牙周炎作为危害口腔健康的严重疾病之一,其引起的牙周支持组织的损害和丧失却得不到良好的治愈,使得患者的生活质量严重下降。细胞膜片技术作为细胞移植的一种新方法,可以减少细胞的流失,提高细胞的利用率,且在移植的过程中无需外源性支架材料,其在牙周组织工程中表现出了巨大的潜力。本文就组织工程中细胞膜片技术及牙周膜来源的细胞膜片在牙周再生中的研究进展做一综述。
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加速正畸牙移动方法及其机制的研究进展
如何在生理允许范围内加速牙齿移动,缩短治疗时间,降低龋坏、牙根吸收及牙周疾病等治疗风险,是绝大多数正畸医生都关心的问题。目前,加速牙齿移动的方法较多,大致可分为手术治疗、物理治疗、药物治疗和基因治疗四类。牙齿移动速度取决于牙周骨代谢速率,纵观目前的各类加速方法,均是通过作用于牙周骨代谢通路上的某一环节来加速牙齿移动。本文将对这些方法的分子机制进行综述。
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自体移植牙牙周牙髓组织再生机理的研究进展
自体移植牙是修复牙缺失的一种有效方法,可以避免种植牙的关键缺陷。但自体牙移植时机临床难以自如控制,一直是其在临床无法广泛应用的难点,近年来的生物冷冻技术的发展有望破解难题。本文介绍了牙齿生物冷冻保存技术及冷冻保存牙移植的研究现状,并就自体牙移植后的牙周牙髓再生机理,以及冷冻保存对自体移植牙牙周及牙髓组织影响的研究进展进行综述。
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牙内吸收研究进展
牙内吸收作为一种特殊类型的牙髓疾病,其发病率较低,发病原因和机制还不完全清楚。目前国内关于牙内吸收的研究较少,多为病例报告,缺乏对牙内吸收的系统阐述。本文主要从病因、分子生物学机制、临床诊断和治疗几个方面对牙内吸收的研究进展进行综述。
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Nd:YAG激光对牙周致病菌作用的研究进展
牙周炎是指发生在牙周组织的慢性炎症性疾病。菌斑生物膜为其始动因子,控制菌斑是治疗牙周炎的必要措施。研究发现激光治疗具有抗菌作用,其中掺钕钇铝石榴石( Nd:YAG)激光容易被含色素组织吸收,因此能产生多种反应发挥杀菌作用。本文就Nd:YAG激光对牙周致病菌作用的研究进展作一综述。
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2016年第五届口腔生物医学优秀青年研究奖评选通知
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投稿须知
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2016全国口腔生物医学学术年会暨2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会通知(第一轮)
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2016年第一届中华口腔医学会口腔生物医学新锐奖评选通知
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关于《口腔生物医学》启用在线投稿系统的通知
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