中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国医药生物技术协会
- 影响因子: 0.36
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-713X
- 国内刊号: 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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短片段扩增KIR基因的PCR-SSP分型法的建立及其应用
目的 建立短片段扩增杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因的序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)分型法.方法 选取330例湖南汉族健康志愿者血液标本,提取基因组DNA;合成短片段扩增KIR基因的序列特异性引物,采用PCR-SSP分型法扩增已知的16个KIR基因,分析湖南汉族人群KIR基因的频率分布特征.从330例DNA标本中随机选取100例,比较长、短片段扩增KIR基因的PCR-SSP分型法检测基因的阳性率差异.结果 ①短片段扩增KIR基因的PCR-SSP分型法可检测出所有KIR基因,扩增产物条带清晰,结果准确;②湖南汉族健康人群KIR2DL4、KIR3DL2、KIR3DL3、KIR3DPI基因阳性率均为100%,KIR2DLl、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR2DS4、KIR2DP1基因阳性率分别为96.4%、96.1%、94.2%、94.2%和99.7%,而KIR2DS1、KIR2DL5、KIR3DS1、KIR2DL2、KIR2DS2、KIR2DS3、KIR2DS5基因阳性率均<40%;③长、短片段扩增KIR基因的PCR-SSP分型法(长、短片段方法)均可检测出16个KIR基因,且KIR2DL3、KIR2DL4、KIR3DL2、KIR3DL3、KIR3DP1基因的阳性率一致,但长片段方法检测其余KIR基因的阳性率均低于短片段方法,其中短片段方法检测KIR3DL1、KIR2DS1、KIR2DS4、KIR3DS1基因阳性率均明显高于长片段方法(分别为94%vs.84%、40%vs.26%、94%vs.62%、38%vs.20%,均P<0.05),同时漏检和误检降低.结论 短片段扩增KIR基因的PCR-SSP分型法简单、易行、准确,具有良好的应用价值.
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两种纳米金标记p53抗体探针的制备、表征和性质研究
目的 制备IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP两种纳米金标记p53抗体探针,并对其进行生物学特征表征和性质研究.方法 利用纳米金粒子与蛋白质非共价吸附和与巯基修饰的寡核苷酸以Au-S键共价结合的特点,将辣根过氧化物酶(HRP)直接或通过寡核苷酸链间接标记在纳米金表面,制备两种多功能纳米金生物探针(IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针);应用透射电镜、紫外-可见光光谱等对纳米金探针性能进行表征,对纳米金探针表面HRP酶活性进行分析,并通过酶免疫标记技术(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)优化探针制备条件和比较两种探针标记效率.结果 ①两种新型探针具有良好的单分散性,大小均一,粒径约10 nm;②p53蛋白检测效果对IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针制各条件优化结果表明:制备IgG-Au-HRP探针时,HRP分子和p53抗体的佳比例为10:1;制备IgG-Au-DNA-HRP探针时,DNA和p53抗体的佳比例为2.5:1;③HRP分子定量检测显示:一个IgG-Au-HRP探针可标记HRP数量约11个,IgG-Au-DNA-HRP探针可标记HRP数量为20个;④两种探针结合ELISA法初步检测p53蛋白判定IgG-Au-DNA-HRP探针比IgG-Au-HRP探针检测蛋白灵敏度高.结论 两种新型纳米金探针制备简单,可作为一种新型探针应用于微量蛋白的高灵敏检测.
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一株产紫杉醇内生真菌的分离及其代谢产物的研究
目的 从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)中分离产紫杉醇内生真菌,并研究其抗肿瘤细胞活性.方法 采用组织块法从南方红豆杉的树根部、树主干内层、侧枝及针叶分离纯化内生真菌,经液体发酵培养,抽提发酵粗产物,以标准紫杉醇为对照进行薄层层析(TLC)、紫外光谱(UV)、HPLC、质谱(MS)分析.同时将经上述方法确认后的内生真菌产的紫杉醇作用于人宫颈癌HeLa细胞,采用MTT法分析其抗肿瘤细胞活性.结果 从南方红豆杉主干韧皮部分离得到1株产紫杉醇内生真菌D62,其紫杉醇产量为148.95μg/L.对菌株D62的菌落和菌丝体的形态学分析表明其属于镰刀属(Fusarium sp.).将该菌株产紫杉醇作用于HeLa细胞,表现出明显的致细胞凋亡作用.结论 南方红豆杉中分离得到的产紫杉醇内生真菌D62具有优良的发酵特性.
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H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究
目的 研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗.方法 根据马 A 型流感病毒 A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM.用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认.采用电转录法免疫新西兰白兔.ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平.结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体.其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性强.结论 新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础.
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聚乙二醇化重组人白细胞介素-6药效研究
目的 探讨体内外不同修饰度的聚乙二醇(PEG)化重组人白细胞介素-6(rhIL-6)的药效.方法 以相对分子质量20 000的PEG2-NHS修饰剂化学耦合修饰rhIL-6,利用毛细管电泳仪分离得单修饰PEG-rhIL-6(mono-PEG-rhIL-6)和双修饰PEG-rhIL-6(di-PEG-rhIL-6),采用标准方法(即7TD1细胞/MTI比色法)测定体外IL-6的生物学活性,参考品为已标定的rhIL-6.体内实验:小鼠腹腔注射环磷酰胺构建BALB/c小鼠模型,分为模型组、阳性对照组、mono-PEG-rhIL-6高剂量组、mono-PEG-rhIL-6低剂量组、di-PEG-rhIL-6高剂量组和di-PEG-rhIL-6低剂量组.各组按上述剂量1次,d皮下注射给药,连续5 d,于给药的第3天各组小鼠同时腹腔注射环磷酰胺,每日1次,连续3 d.于给药的第8、11、14、17天切尾采血测定各小鼠血小板数并进行统计学处理.结果 体外生物活性检测表明,mono-PEG-rhIL-6与di-PEG-rhIL-6相差不大,均比rhIL-6低lO倍;体内活性测定表明,阳性对照组、mono-PEG-rhIL-6和di-PEG-rhIL-6的高、低剂量组小鼠血小板数回升速度较同时期模型组快,它们之间的差异具有统计学意义(P<0.05).结论 PEG单修饰和多修饰(≥2)的rhIL-6在体外均具有促7TD1细胞增殖的活性;在体内均具有抗环磷酰胺致小鼠血小板减少的作用.mono-PEG-rhIL-6和di-PEG-rhIL-6均是药物的主要成分.
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利用噬菌体展示技术研究功能基因组和蛋白质-蛋白质相互作用——与酵母双杂交方法比较
近年来基因组测序工作已揭示了数以万计的新基因,但是这些基因序列的价值只有当这些数据被翻译成蛋白质功能的时候才能被了解.而蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,不仅可以从分子水平揭示蛋白质的功能,而且为我们更好地理解生命过程、疾病机制和新药开发等提供了一个很好的基础.
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治疗性人源抗狂犬病毒抗体研究进展
狂犬病是由狂犬病毒(rabies virus,RV)引起的人兽共患疾病,发病后死亡率几乎达百分之百.狂犬病毒属弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病毒属(Lyssavirus),基因组编码五种结构蛋白,其中由G基因编码的糖蛋白,是病毒与宿主细胞结合的配体,能诱导机体产生中和抗体,与病毒的毒力、致病性密切相关.
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共激活分子及相关因子对机体抗肿瘤免疫的调节作用
肿瘤在生长过程中,由于细胞转化产生的基因毒性应激和微环境的破坏,可激活具有抗肿瘤能力的效应细胞刺激专职抗原提呈细胞,触发T细胞和B细胞的特异性免疫反应.机体尽管存在免疫监视机制,但肿瘤的存在提示了瘤细胞逃避免疫反应的能力,其中包括各种逃避免疫识别的策略,例如表达死亡配体排除病灶的免疫细胞[1],通过降低主要组织相容性复合物(MHC)或共激活分子削弱免疫原性,以及干扰自然杀伤细胞(NK)和NKT细胞的识别能力.尽管面临诸如此类的问题,现代免疫治疗在治疗恶性疾病方面仍然显示出发展的前景.
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微生物转化人参皂苷研究进展
人参皂苷属于达玛烷型四环三萜类,是由苷元与糖连接而成的一种苷,依据苷元不同,可分为原人参二醇皂苷如Rbl、Rb2、Re、Rd、Rh2等和原人参三醇皂苷如Re、Rg1、Rg2、Rf、Rh1等[1].人参皂苷主要存在于五加科人参属植物,如人参、三七、西洋参、高丽参、越南人参、珠子参、竹节参,以及葫芦科绞股蓝属绞股蓝和喙果绞股蓝等植物的根、茎、叶或花蕾中12J,是人参属植物的主要活性成分之一,具有多方面药理活性.2002年,日本学者Zou等[3]从云南野生三七中分离出六种新型达玛烷型三萜皂苷.现已分离出的人参皂苷有50多种[4],相信将来会有更多的人参皂苷被发现.
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静注人免疫球蛋白抗补体活性测定影响因素的探讨
静注人免疫球蛋白(pH 4)(IVIG)是我公司生产的具有多种抗体活性的血液制品,因具有广泛的应用价值而受到临床重视.其低pH值能更好地保证Fc段生物学活性,一般认为少量的IgG多聚体能暴露出Fc段补体结合位点,从而促使抗补体活性(ACA)产生[1-3].ACA是ICIG中一项重要的指标,它指IVIG中IgG多聚体在没有结合抗原的情况下,激活补体的能力.IgG多聚体通过激活补体使补体消耗,从而使机体的免疫防御能力下降.头痛、潮红、颤抖、背痛、恶心是较常见的不良反应症状[4].因此,ACA的高低对IVIG的质量起着至关重要的作用.据文献报道[5],影响AcA的因素可能与IgG多聚体含量、Na+浓度、pH值、葡萄糖的浓度有关.据此,我们进行了研究.另外,还研究发现枸橼酸含量对ACIA也有一定影响.本文就以上因素对其进行实验分析.
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如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料IX.用SAS软件实现交叉设计定量资料的统计分析
编者按生物统计学是生物学领域科学研究和实际工作中必不可少的工具,在分子生物学迅速发展的今天,生物统计学更显示出了它的重要性.实验设计与数据统计分析是现代生物学的基石,是生物学研究者检验假说、寻找模式、建立生物学理论的有利工具,也是生物学研究者探索微观和宏观生物世界的必备基础知识.对于每天甚至是每时每刻涌现的大量的、以天文数字计量的分子遗传数据,必须借助统计学知识加以分析处理,才能从中获得有意义的信息.
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对中国生物安全的思考及建议
众所周知,实验室生物安全问题的提出由来已久.生物安全所涉及的领域很广泛,如食品、药品、生物及血液制品、农产品、畜牧业及畜产品、进出口检验检疫、环境保护等行业,尤其是近年来病毒性及细菌性流行性疾病的全球化影响,使整个社会对"生物安全"有了进一步的重视及了解,而转基因技术的广泛应用也使"生物安全"成为全社会及相关部门的热门话题.然而,许多科研单位的一线科研人员对安全防护知识仍仅仅局限于来自实验室管理者的简单传授和自身操作实践.他们往往对技术环节比较精通和重视,但对实验室的规范管理和应承担的安全责任意识淡薄[1].
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生物安全防护水平三级实验室新风口设计的考虑
目前,随着SARS病毒、禽流感病毒、耐药结核菌等高致病性病原微生物的不断涌现,生物安全成为世界各国普遍关注的研究焦点,同时生物安全实验室的建设也进入一个快速发展的时期.为加强对病原微生物感染的控制、提高生物安全防护能力,我国各省市疾病预防控制中心、高校或科研院所建造了生物安全防护水平为三级的实验室(biosafety level 3 laboratory,简称BSL-3实验室).BSL-3实验室必须建立可使空气定向流动的可控通风系统,以确保实验室内维持正确的定向气流[1];并要求送风系统和排风系统联动互锁、协调工作,以维持实验室压力梯度[2].压力梯度的控制常采用定新风变排风的模式[3],因此多注重排风系统的设计.
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解读特色企业——美国健赞公司
美国健赞公司(Genzyme Corporation)是全球较早成立的前十大生物制药公司,也是前二十大纳斯达克上市公司.其销售产值排全球前十位,是生物制药领域的五大企业之一.作为当今世界知名生物技术公司之一,健赞致力于研究和治疗患有严重疾病的病人.于1981年成立于波士顿,现已成长为年收入超过30亿美元,全球超过8000名员工的多样化企业.一直致力于发展和应用生命科学中先进的技术以服务于医学的需要.它所生产的产品和提供的医学服务救助着超过80个国家的患者,其产品主要集中于罕见遗传病、肾病、骨关节炎、免疫系统疾病和诊断测试.健赞公司至今仍在不断创新,继续研究开发基因遗传、免疫系统疾病、心脏病和癌症等病症.
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季节性流感与甲型H1N1流感
流行性感冒(流感)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病.流感病毒传染性强,传播速度快.主要通过呼吸道传播,接触患者的呼吸道分泌物、体液和被污染的物品也可造成传播.流感病毒为了自身生存不断发生变异.当新的病毒亚型出现时可引起人类流感大流行,感染率在50%左右.由于流感发病基数大、死亡人数多,成为危害人类大的瘟疫.季节性流感与甲型H1N1流感在临床症状方面十分相似,但甲型H1N1流感传播更快,病死率较高.随着科学技术的飞速发展,人们对流感的认识不断深化,生物医学模式向生物-心理-社会-环境医学模式转换.加强健康宣传,动员一切社会力量,采用各种手段消除疾病流行的危险因素.实践表明,流感也是一种可控可治的感染性疾病.