南方医科大学学报杂志
Journal of Southern Medical University 남방의과대학학보
- 主管单位： 广东省教育厅
- 主办单位： 南方医科大学
- 影响因子： 1.65
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-4254
- 国内刊号： 44-1627/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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腰椎运动节段数字模型建立及三维可视化研究
目的 寻求基于CT断层图像重建腰椎运动节段数字模型及三维可视化的方法.方法 基于腰椎L4-5的64排螺旋CT连续断层二维图像,Mimics软件分别对腰椎骨性结构及各种软组织进行重建,并导人有限元分析软件进行模型验证.结果 建立腰椎L4-5运动节段三维数字模型,包括两个椎体、皮质骨、松质骨、终板、纤维环、髓核及6种韧带,数字模型可输出用作CAD(计算机辅助设计)、RP(快速成型)及FEA(有限元分析)研究.结论 薄层CT、Dicom标准的应用使数字模型的建立更为精确,Mimics软件建立人体骨骼及软组织各种结构更为方便,并可以输出数字模型用于进一步研究.
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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响
目的 研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(LKB1)基因表达沉默对肺癌细胞生物学行为的影响.方法 以RNA干扰技术建立LKBI表达抑制的细胞模型,Westem blotting方法检测干扰LKB1蛋白表达的效果;通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测LKB1基因沉默肺癌细胞的增殖变化;应用Annexin V/PI双染法和流式细胞技术分析LKB1基因沉默后肺癌细胞周期的变化及其凋亡和坏死情况.结果 成功建立了LKB1基因沉默肺癌细胞模型,稳定表达LKB1-siRNA细胞的LKB1蛋白表达被明显抑制,LKB1基因沉默后肺癌细胞增殖速度明显加快,但其早期与晚期凋亡率较对照组相比并无显著变化.结论 LKB1基因的下调表达对95D细胞部分恶性生物学行为的发生具有一定的促进作用.
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分化抑制因子1相互作用蛋白AGGF1的筛选
目的 利用酵母双杂交方法,筛选成人肺组织文库中与分化抑制因子1(Id1)相互作用的蛋白.方法 PCR方法扩增Id1的编码序列并定向克隆入诱饵质粒pHybLex/Zeo,构建重组诱饵质粒pHybLex/Zeo-Id1,酶切鉴定后转化人酵母株EGY48/pSH18-34,检测重组诱饵质粒有无非特异激活报告基因Leu2、LacZ作用;扩增并提取成人肺组织文库质粒,将文库质粒及重组诱饵质粒转化入酵母细胞,依次筛选Leu2+,Leu2+LacZ+克隆;设置阴性及阳性对照,重复筛选Leu2+LacZ+克隆并排除假阳性克隆,获取真阳性文库质粒,进行测序和同源性比对.结果 酶切证实,重组诱饵质粒构建成功.重组诱饵质粒转化入酵母细胞后.经检测无非特异激活报告基因作用.扩增并筛选成人肺组织文库.获得198个Leu2+及19个Leu2+LacZ+克隆.经排除假阳性克隆,终获得1个Leu2+LacZ+真阳性克隆,经测序和同源性比较证实该克隆与蛋白AGGF1高度同源(556/559,99.5%),Westem blotting证实其在酵母细胞中有表达.结论 利用酵母双杂交方法,通过筛选成人肺组织文库,发现Id1与AGGF1存在相互作用.
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毛囊细胞混合物移植诱导裸鼠毛囊样结构形成
目的 观察毛囊细胞复合物移植诱导裸鼠毛发再生和毛囊重建情况.方法 采用裸鼠移植技术,将混合分离出来的毛囊细胞,包括毛囊毛乳头细胞、毛囊外根鞘细胞、毛囊真皮鞘细胞和毛囊真皮成纤维细胞等,移植到裸鼠皮下,观察毛囊形成情况.结果 在裸鼠的皮肤切片中可以看到较为完整的毛囊结构形成.结论 毛囊细胞混合物可以在体内诱导出毛囊样结构形成.
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Smo siRNA对LoVo细胞Smo基因表达及细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究Smoothened (Smo)小干扰RNA(siRNA)对结直肠癌LoVo细胞Smo基因表达,以及LoVo细胞增殖与凋亡的影响.方法 设计针对目标基因的siRNA.阳性脂质体介导转染LoVo细胞,半定量RT-PCR检测转染后LoVo细胞的Smo mRNA水平,MTT法和流式细胞术检测转染后LoVo细胞的增殖水平及细胞凋亡率.结果 siRNA-1、siRNA-2均能抑制LoVo细胞Smo基因的表达,siRNA-1抑制作用明显,达63.56%,siRNA-2抑制作用为46.54%,两组与隐性对照组相比.差异均具有显著性.siRNA-1转染LoVo细胞后,细胞增殖水平较隐性对照组显著降低(P＜0.05);转染48 h后,细胞凋亡率较隐性对照组显著升高(P＜0.05).结论 Smo siRNA能有效地抑制结直肠癌LoVo细胞Smo基因表达,可以降低LoVo细胞的增殖水平,诱导细胞的凋亡.
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肝细胞生长因子对c-kit+Lin-细胞的增殖作用
目的 探讨在无血清无基质的条件下,肝细胞生长因子(HGF)和因子组合对扩增c-kit+Lin-细胞的影响.方法 采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit+Lin-细胞,研究在干细胞因子(SCF),FLt-3配基(FL),促血小板生成素(TPO)和白血病抑制因子(LIF)组合中添加不同浓度的HGF培养7 d,检测细胞总数,c-kit+Lin-细胞扩增倍数及细胞凋亡率.结果 各因子组均可显著扩增c-kit+Lin-细胞,扩增倍数2～8倍不等.其中,10ng/ml HGF组扩增c-kit+Lin-细胞效果为显著.为8.00倍,细胞总数扩增45.43倍,细胞凋亡率为17.42%.但随剂量加大,虽然细胞总数上升,c-kit+Lin-细胞扩增反而下降.40 ng/ml组细胞总数扩增80.50倍,c-kit+Lin-细胞扩增效果不明显,仅为2.87倍,细胞凋亡率低.为5.91%.结论 10 ng/ml的HGF能协同SCF+FL+TPO+LIF扩增c-kit+Lin-细胞,使细胞凋亡率降低,其表型并不受影响,但过高剂量会诱导其分化.
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脊髓内移植间充质干细胞的转铁蛋白受体显像
目的 探索放射性核素显像活体追踪移植干细胞的可能性.方法 用放射性受体分析定量测定体外培养人间充质干细胞(hMSCs)的转铁蛋白受体表达.兔脊髓内移植人间充质干细胞,蛛网膜下腔注入 131Ⅰ标记铁胞和转铁蛋白后不同时间,用伽玛相机采集图像.感兴趣区(ROI)技术对图像进行半定量分析.磷屏放射自显影验证活体显像.结果 hMSCs高表达转铁蛋白受体(10,770/细胞),并且对铁饱和转铁蛋白具有高亲和力(KD=0.982nmol/L).实验组动物在注射显像剂后16和24h观察到了移植区放射性浓聚灶,而以PBS作为移植物和以 131Ⅰ标记的血清白蛋白作为显像剂的2个对照组均呈阴性显像,ROI分析显示实验组与对照组之间具有显著的统计学差别(P＜0.05).磷屏放射自显影证实了间充质干细胞移植部位能够特异结合铁饱和转铁蛋白.结论 应用核素显像活体示踪移植干细胞具有可行性,经过进一步改进,有望为干细胞移植治疗提供无创的监测手段.
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血管紧张素Ⅱ2型受体对AngⅡ诱导成年大鼠心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β的作用
目的 探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensm Ⅱ type2 receptors,AT2)在成年心肌成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(α-TNF)和白介素1β(IL-1β)中的作用,明确AT2受体和AT1受体作用的差异.方法 差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将细胞分为4组进行药物干预:对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、AngⅡ+氯沙坦(losartan)组、AngⅡ+PDl23319组,应用放射免疫法检测各组细胞分泌α-TNF和IL-1β的水平.结果 AngⅡ诱导使心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-β明显增加.与AngⅡ组相比,α-TNF在AT1受体阻断后下调了58.7%(P＜0.05).AT2受体阻断后下调了65.9%(P＜0.05);IL-1β在AT1受体阻断后下调了69.1%(P＜0.05),AT2受体阻断后下调了78.7%(P＜0.05).结论 AT2受体参与介导心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β.
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CD137和CD28分子对衰老T细胞bcl-2表达的调控
目的 观察两种共刺激分子CD137及CD28对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠及自然衰老小鼠T细胞活化后的bcl-2表达的调控,分析这两种共刺激分子调节衰老T细胞凋亡的可能机制.方法 7周龄BALB/c雄性小鼠每日背部皮下注射D-半乳糖溶液(120 mg/kg,溶于0.1 ml蒸馏水中),连续注射5个月,建立亚急性衰老模型组;自然衰老组为16月龄BALB/c雄性小鼠.分离小鼠的脾脏T细胞,分别用conA+IgG、conA+CD137单抗、conA+CD28单抗体外活化,48h后用流式细胞术及半定量RT-PCR分析各组T细胞bcl-2的表达.结果 (1)衰老模型组T细胞经conA+IgG、conA+CD137单抗、conA+CD28单抗活化48 h后,胞内bcl-2蛋白表达率分别为(24.4±1.5)%、(34.4±2.4)%、(45.1±2.7)%,自然衰老组T细胞经conA+lgG、conA+CD137单抗、conA+CD28单抗活化48 h后,胞内bcl-2蛋白表达率分别(19.6±2.0)%、(26.3±1.9)%、(48.5±2.2)%;(2)衰老模型组T细胞经conA+IgG、conA+CD137单抗、conA+CD28单抗活化48 h后,胞内bcl-2 mRNA表达率(IOD(bcl-2)/IOD(β-actin)分别为0.309±0.039、0.547±0.036、0.780±0.041,自然衰老组T细胞经conA+IgG、conA+CD137单抗、conA+CD28单抗活化48 h后.胞内bcl-2 mRNA表达率分别0.283±0.038、0.535±0.041、0.771±0.063.结论 CD137单抗及CD28单抗.均可以显著提高衰老模型组及自然衰老组小鼠T细胞bcl-2mRNAbcl-2蛋白的表达,这可能是CD137分子及CD28分子抑制衰老T细胞凋亡、维持衰老T细胞功能的主要机制之一.
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有机镓治疗维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠的实验研究
目的 对比研究有机镓和无机镓对维甲酸致大鼠骨质疏松模型骨代谢的影响及治疗作用.方法 用维甲酸按85mg/(kg·d)灌胃15 d,建立大鼠骨质疏松模型,经有机镓、氯化镓灌胃给药治疗4周后,应用生化、病理等方法研究其对骨代谢相关指标的影响,并比较其治疗效果.结果 维甲酸可引起大鼠骨结构、骨钙及其它元素含量的改变,血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(AKP)明显上升等改变.应用有机镓、氯化镓治疗后,可改善骨密度及骨形态计量学参数,增加股骨和牙齿中的镓、钙、磷含量,降低TRAP和AKP活性,其中以有机镓效果明显,且用量少.结论 在动物实验中,镓盐能通过降低骨转换率而改善骨质疏松,且有机镓较无机镓更安全、有效.
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肠易激综合征患者肠粘膜紧密连接蛋白claudin-1,-3,-4表达改变的意义
目的 探讨claudin-1,-3,-4蛋白的改变在不同类型肠易激综合征患者发病中的作用.方法 随机选择肠易激综合征患者43例分为腹泻型组23例、便秘型组20例,对照组20例,用Western blotting方法分别检测各组肠粘膜claudin-1,-3,-4蛋白含量.结果 与对照组相比,小肠和结肠粘膜claudin-1蛋白含量在便秘型组均明显上升(P＜0.05).在腹泻型组均明显下降(P＜0.05);claudin-3在便秘型组明显上升(P＜0.05),在腹泻型组无明显的变化(P＞0.05),claudin-4变化跟claudin-1一致.结论 claudin-1,-4蛋白表达下降可能与腹泻型肠易激综合征的发病有关,而claudin-1,-3,-4蛋白表达的升高可能与便秘型肠易激综合征的排便性状和习惯改变有关.
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贝伐单抗对荷耐顺铂人肺腺癌A549/DDP裸鼠皮下移植瘤生长的影响
目的 探讨贝伐单抗联合或不联合顺铂对耐顺铂肺腺癌A549/DDP移植瘤生长的抑制作用.方法 建立裸鼠移植瘤模型,随机分成空白对照组(A组)、单药贝伐单抗组(B组)、单药顺铂组(C组)、联合用药组(D组)和联合半剂量组(E组)5组,连续用药4周.观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度(MVD);RT-PCR分析各组经治疗后凋亡基因bcl-2及耐药基因(LRP、GST-Π)mRNA表达情况.结果 与空白对照组比较,经贝伐单抗治疗组(B、D、E组)抑瘤率分别为20.96%、51.67%、50.95%,联合用药组(D、E组)效果佳.经贝伐单抗治疗组微血管密度分别为18.6±1.14、13.6±1.14、14.4±0.55,联合用药组为显著,而单药顺铂组与对照组在抑瘤率和微血管密度表达上均无差异(P=0.632).经贝伐单抗治疗组bcl-2 mRNA表达较对照组有显著差异(P＜0.001),但三组之间无差异(P＞0.05);五组之间在LRP、GST-Π mRNA表达上无明显差异(P＞0.05).结论 贝伐单抗对荷A549/DDP裸鼠移植瘤有抑制作用,联合顺铂用药有显著协同作用,同时提高A549/DDP耐药细胞对顺铂的敏感性,其作用机制可能与抑制肿瘤微血管形成、诱导细胞凋亡增加有关.
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正常幼龄豚鼠巩膜组织毒蕈碱受体五种亚型的表达
目的 探讨正常幼龄豚鼠眼巩膜组织毒蕈碱受体(M受体)五种亚型的表达.方法 2周龄三色豚鼠6只,RT-PCR检测巩膜组织M受体亚型的mRNA的表达,免疫荧光法染色检测M受体的蛋白水平的表达.结果 豚鼠巩膜组织中有M受体五种亚型mRNA的表达,其中以M1亚型的表达高.激光共聚焦显微镜观察发现,在巩膜基质中可见到M受体五种亚型的表达绿色荧光,围绕在成纤维细胞核周围.结论 豚鼠巩膜组织中存在M受体五种亚型,提示M受体参与调控眼球的生长.
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黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9表达及其与EBV感染的关系
目的 探讨MMP9在黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤的表达及其与EBV感染的关系.方法 用免疫组化SP法和原位杂交法检测59例黏膜NK/T以及成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER表达情况,统计MMP9表达与EBV感染的关系.结果 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER阳性率分别为83.05%和72.88%,EBER阳性率与组织学类型有关(P＜0.01);MMP9和EBER表达与临床分期和生存期均无显著性关系(P＞0.05),MMP9表达与EBV感染无明显相关性(P＞0.05).结论 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤发生与EBV感染密切相关,它可能通过间接上调MMP9等癌基因的表达而促进肿瘤的发生和发展.防治EBV感染有助于预防淋巴瘤的发生和发展.
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二甲基亚砜、透明质酸酶对长春瑞滨外渗性大鼠皮肤损伤的疗效
目的 探讨单用或联合二甲基亚砜(DMSO)外涂、透明质酸酶局部注射对长春瑞滨外渗性损伤大鼠的疗效.方法 30只SD大鼠随机分为6组,在每只大鼠双后肢制作成长春瑞滨血管外渗模型后分别外涂二甲基亚砜、局部注射透明质酸酶、透明质酸酶与二甲基亚砜联合应用,并以外涂生理盐水、局部注射生理盐水作为处理对照,模型对照组不进行任何治疗措施.观察各组大鼠1、4、8、12、18、24、30d的损伤面积和损伤愈合时间.结果 二甲基亚砜外涂组1d、4、8、12、18、24 d损伤面积均显著低于生理盐水外涂组和模型对照组(P＜0.05);透明质酸酶局部注射组1、4、8、12、18、24 d损伤面积均显著低于生理盐水局部注射组和模型对照组(P＜0.05);联合应用组的损伤面积与单药组相比差异无统学意义.二甲基亚砜外涂组、透明质酸酶局部注射组和联合应用组的损伤愈合时间分别为(24.9±3.2)d、(21.9±3.0)d和(23.3±3.8)d,均显著低于生理盐水外涂组、生理盐水局部注射组和模型对照组[(29.8±2.6)d、(28.6±4.1)d和(30.6+3.0)d,(P＜0.05)].结论 单用二甲基亚砜外涂、透明质酸酶局部注射对长春瑞滨外渗性损伤具有较好的疗效,联合用药未能提高疗效.
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骨桥蛋白基因多态性与狼疮肾炎的相关性研究
目的 研究骨桥蛋白(OPN) 因第7外显子9250位点多态性在中国南方地区汉族人群中的分布及其与狼疮肾炎(LN)的相关性.方法 109例LN患者诊断均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE分类标准,其中男12例,女97例.正常对照组180例,其中男34例,女146例.全部研究对象均为无血缘关系的中国南方地区汉族人群.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对所有上述研究对象进行OPN基因9250位点多态性检测.结果 OPN基因9250位点多态性在中国南方地区汉族人群中普遍存在.与正常对照组比较,中国南方地区汉族LN患者OPN基因9250位点TT基因型频率明显降低(70% vs 51%,P＜0.05),TC基因型频率明显升高(29.4% vs 45%,P＜0.05),等位基因频率和携带者频率分布也有显著性差异(P＜0.05).女性LN患者与女性正常对照组比较,其OPN基因9250位点TT基因型频率明显降低(54% vs 68.5%,P＜0.05),等位基因频率分布也有显著性差异(P＜0.05).结论 OPN基因9250位点多态性与LN明显相关,提示OPN基因可能是LN的易感基因.
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DNA损伤检测点介质1和p53结合蛋白1在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109中的表达及意义
目的 研究DNA损伤检测点介质1(MDC1)和p53结合蛋白1(53BP1)在人食管癌细胞系中的表达及意义.方法 采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学法、间接免疫荧光法和Western blotting检测MDC1、53BP1mRNA和蛋白在人食管癌细胞系TE-1.TE-13.Eca109的表达水平.结果 RT-PCR结果显示MDC1、53BP1mRNA在所检测的人食管癌细胞系中均有表达;免疫细胞化学法、间接免疫荧光法和Western blotting均在人食管癌细胞系中检测到MDC1、53BP1的蛋白表达.结论 首次证实了MDC1、53BP1在食管癌细胞系中的表达.推测MDC1、53BP1可能和食管癌细胞的放射敏感性有关.
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抗哇巴因抗体IgY的制备及其应用
目的 制备高度特异性的抗哇巴因多克隆抗体,并将其应用于组织中内源性哇巴因的免疫学检测.方法 采用哇巴因.牛血清蛋白耦联物作为免疫原免疫母鸡.免疫后1周收集鸡蛋.鸡蛋黄采用PEG-6000方法进行纯化分离,并采用12%SDS-PAGE分析其纯度.酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价.然后应用IgY的竞争性酶联免疫吸附法检测哇巴因水平,并将IgY应用于大鼠肾上腺组织中内源性哇巴因的检测.结果 IgY抗体效价在第二次免疫后迅速升高,高效价达到1:10240,并持续至少4周左右.竞争性酶联免疫吸附法检测哇巴因的批内差异及批间差异分别为2.03%、2.34%.免疫组化结果显示内源性哇巴因主要分布于大鼠肾上腺皮质的网状带,髓质未见明显阳性颗粒.结论 免疫母鸡简单、快速,并且高效价抗体持续时间较长.同时本研究结果提示IgY抗体可用于常规免疫学检测.
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许旺细胞源运动神经营养因子单克隆抗体的研制及特性鉴定
目的 研制针对许旺细胞源神经营养因子(SDNF)的单克隆抗体并鉴定Ig亚类.方法 用SDNF免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞按1:5比例进行融合,间接ELISA法筛选阳性克隆,有限稀释法进行克隆化培养;制备单克隆抗体,鉴定MeAb的Ig亚类.结果 获得4株能稳定分泌抗体的细胞株6D3,B8,C9E9,A6C6.效价为1:5120,亚类为IgG1.结论 所获得的4株杂交瘤细胞株均又较强稳定分泌抗BDNF单克隆抗体的能力,这为进一步的研究打下了基础.
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沉默组织因子重组腺病毒的构建和胰岛中沉默效果检测
目的 构建复制缺陷型重组腺病毒介导短发夹RNA(shRNA):干扰组织因子(TF)在胰岛表达.方法 设计并合成四对单链寡核苷酸(ss oligo),经变性退火为双链寡核苷酸(ds oligo)插入穿梭质粒pENTR/U6载体,测序正确后经脂质体介导入成人胰岛,通过实时定量RT-PCR方法筛选对TF沉默效果佳穿梭质粒pENTR/U6-shRNA,然后与腺病毒骨架质粒行同源重组.筛选出正确重组子,用293A细胞包装出表达TF-shRNA的复制缺陷型重组腺病毒并测定其病毒滴度.通过实时定量RT-PCR腺病毒沉默TF效果予以检测.结果 测序结果提示所构建的pENTR/U6-shRNA质粒正确,并从四对ds oligos筛选出对组织因子沉默效果佳的穿梭质粒pENIR/U6-shRNA,经同源重组后成功构建了介导shRNA-TF复制缺陷型重组腺病毒.转染胰岛后,通过实时定量RT-PCR方法检测发现shRNA-TF腺病毒感染胰岛后对TF mRNA的沉默效果4 d后达佳效果,为54.29%(P＜0.05 vs NC).结论 成功构建的介导shRNA复制缺陷型重组腺病毒可以体外抑制胰岛细胞中组织因子的表达.
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补肾壮骨中药对模拟失重大鼠股骨远端松质骨的扫描电镜观察
目的 观察补肾壮骨中药对模拟失重状态下大鼠股骨远端松质骨超微结构的改变.方法 SPF级雄性SD大鼠15只.随机等分为3组:A组为自由活动对照组,B组和C组为尾吊模拟失重组,C组大鼠给予补肾壮骨中药灌胃,其他2组灌胃等量生理盐水,实验期28 d.利用扫描电镜对大鼠股骨远端松质骨的结构进行观察.结果 B组较A组大鼠的骨小梁变细,断裂,数量减少,微损伤增多;C组较B组大鼠骨小梁数量增加,骨吸收面减少,胶原纤维排列规律、整齐.结论 补肾壮骨中药能够对模拟失重状态下大鼠股骨远端松质骨的骨微结构产生有益影响.
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环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响
目的 探讨环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响,为塞来昔布在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据.方法 应用体外细胞培养技术培养人肝癌细胞株SMMC-7721,并以重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及损伤刮擦实验观察不同浓度塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭、转移能力的影响.结果 塞来昔布作用于人肝癌SMMC-7721细胞后,其细胞黏附率明显下降,而运动抑制率及侵袭抑制率明显上升,与对照组相比差别均有统计学意义,且塞来昔布浓度与肿瘤细胞黏附率,运动抑制率及侵袭抑制率均有相关性.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布能明显抑制人肝癌SMMC-7721细胞的黏附、运动及侵袭能力,故可阻抑肝癌细胞的转移,可能是预防肝癌复发的重要候选药物之一.
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氩氦刀冷冻消融和射频、微波热凝固治疗兔VX2肝癌的对比研究
目的 通过观察肿瘤残留和转移情况、治疗前后免疫功能变化以及兔的生存期并加以对比,探讨氩氦刀冷冻、射频消融(RFA)及微波凝同(MCT)治疗兔WX2肝癌的疗效.方法 将45只兔VX2肝癌模型随机分为五组,每组9只,即氩氦刀冷冻组(A组)、射频消融组(B组)、微波凝固组(C组)、手术切除组(D组)和对照组(E组).观察肿瘤转移情况(肝内转移、肺部转移、腹腔淋巴结转移和腹腔种植转移)和可溶性白介素-2受体(sIL-2R)变化及生存期等.结果 ①肝内肿瘤残留在A、B、C、D、E组分别为2、4、5、0、9只,差异有显著性(χ2=20.700,P=0.000);肝内转移分别为1、3、4、6、9只,差异有显著性(χ2=15.652,P=0.004);腹腔种植转移率分别为2、5、6、0、1只,差异有显著性(χ2=13.894,P=0.008);肺部及腹腔淋巴结转移各组均为9只,差异无显著性.②各组治疗前sIL-2R无明显差异,治疗后各组间差异有显著性(F=31.58,P=0.000);各组内治疗前后比较,A组、B组、C组和D组差异均无统计学意义,E组差异有显著性(t=10.119,P=0.000).③平均生存期:氩氦刀冷冻、RFA、MCT和手术切除组与对照组比较有显著性差异(F=73.084,P=0.000);氩氦刀冷冻和手术切除组显著高于RFA、MCT组;氩氦刀冷冻和手术切除组之间、RFA和MCT组之间无显著性差异.结论 在治疗兔VX2肝癌中,无论是在减少肿瘤残留和转移方面,还是在增强机体免疫力方面及延长实验兔生存期方面,氩氦刀冷冻治疗均优于RFA和MCT;而RFA和MCT疗效相当.
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诺瓦克病毒广州株N蛋白基因的克隆、表达及抗原性鉴定
目的 克隆、表达和鉴定诺瓦克病毒广州株NVgz0l全长N蛋白.方法 在成功构建诺瓦克病毒广州株全基因组克隆并测序的基础上,将全长N蛋白基因克隆到表达载体pET28a(+)上,经IPTG诱导表达后,利用Ni2+亲和层析柱对重组N蛋白进行纯化,并用Westem blotting和ELISA方法检测其抗原性.结果 重组诺瓦克病毒N蛋白基因在大肠杆菌中可以高效表达,其相对分子质量为62×103,可在Ni2+亲和层析柱上高度纯化;经抗原检测试剂盒检测和免疫学方法分析,均表明重组N蛋白具有良好的抗原性.结论 本研究克隆和表达了诺瓦克病毒广州株的全长N蛋白,为诺瓦克病毒诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础.
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Ad-1.2乙型肝炎病毒感染HepG2细胞后HBV cccDNA的动态分析
目的 研究Ad-1.2 HBV感染HepG2细胞后HBV的复制情况.方法 携带1.2拷贝FIBV DNA的腺病毒体外感染人肝癌细胞株HepG2,ELISA法检测培养上清中HBsAg、HBeAg的动态表达;利用质粒抽提试剂盒提取细胞内cccDNA,经绿豆核酸酶处理后,用特异引物进行实时定量PCR检测.结果 Ad-1.2HBV感染HepG2细胞后,可有效表达HBsAg及HBeAg;感染后第1天即可在细胞内检出cccDNA,第4天达到高峰.结论 Ad-1.2HBV感染细胞,可作为抗病毒药物筛选和评价的模型.
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持续低剂量率辐射下HepG2细胞辐射敏感性与ATM磷酸化的关系
目的 探讨持续低剂量率辐射下HepG2细胞ATM磷酸化的变化及其对HepG2细胞增殖活性的影响.方法 体外培养的HepG2细胞分别接受持续低剂量率(7.76 cGy/h)和高剂量率(4500 cGy/h)电离辐射,比较同等剂量下低剂量率和高剂量率辐射后HepG2细胞ATM磷酸化程度和细胞存活分数.结果 无论给予低剂量率或高剂量率照射.HepG2细胞接受0.5 Gy的电离辐射时,ATM蛋白均可达到大的磷酸化.随着辐射剂量的增加,在持续低剂量率辐射下.HepG2细胞ATM磷酸化蛋白表达逐渐减弱;而在高剂量率辐射下,ATM磷酸化蛋白稳定不变.当高、低剂量率辐射诱导产生的ATM磷酸化程度相当时,两者的存活分数无明显差异(P＞0.05);当持续低剂量率辐射组ATM磷酸化蛋白表达明显弱于高剂量率辐射组时,HepG2细胞的存活分数显著低于高剂量率辐射组(P＜0.01).结论 持续低剂量率辐射增加了HepG2细胞的辐射敏感性,其机制与持续低剂量率辐射下部分ATM磷酸化蛋白失活有关.抑制ATM磷酸化,可以增加HepG2肝癌细胞的辐射敏感性.
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热疗与阿霉素联合作用动物的实验研究
目的 研究阿霉素与热疗联合作用对人B细胞淋巴瘤细胞株Raji裸鼠成瘤及肿瘤生长的影响.方法 将24只BALB/C裸鼠分为4组:对照组(37℃)、化疗组(37 ℃+ADM)、热疗组(42℃)、热化疗组(42℃+ADM),每组6只.将对数生长期的Raji细胞配制成每0.2ml含5×106个Raji细胞的悬液,每只裸鼠皮下接种5×106的Raji细胞,观察各组裸鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤体积变化.并绘制肿瘤生长曲线.成瘤后3周,处死老鼠,取肿块称质量,计算抑瘤率,肿瘤组织行常规病理检查.结果 对照组(37℃)、化疗组(37℃+ADM)、热疗组(42℃)、热化疗组(42℃+ADM)的肿瘤出现时间分别为(11.2±1.7)、(20.2±2.3)、(15.3±1.6)及(23.8±1.7)d,热化疗组成瘤时间明显延长(P＜0.01).热化疗能明显减缓Raji细胞BALB/C裸鼠体内肿瘤的生长速度.治疗结束,热化疗组的肿块较对照组肿块明显缩小.对照组(37℃)、化疗组(37℃+ADM)、热疗组(42℃)、热化疗组(42 ℃+ADM)裸鼠的肿瘤质量分别为(3.33±0.57)、(2.26±0.28)、(2.76±0.26)及(1.73±0.33)g,热化疗组抑瘤率为48.0%.结论 热联合化疗能有效抑制肿瘤的生长,为恶性淋巴瘤的治疗提供了另一种辅助治疗方法.
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应用二维电泳和质谱技术筛选食管癌及癌旁组织的差异表达蛋白质
目的 筛选食管癌组织与正常食管组织中的差异表达蛋白质,以发现用于食管癌早期诊断的生物学标志物.方法 收集食管癌组织及其配对的正常食管组织,提取组织蛋白质,进行二维电泳,选取在癌组织中高表达的3个点和在正常食管组织中高表达的3个点进行基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱分析,将获得的肽质量指纹图进行生物信息学分析,鉴定差异蛋白质,利用RT-PCR方法验证蛋白质组筛选结果.结果 建立了分辨率高、重复性较好的食管癌和食管正常组织蛋白质的二维电泳图谱,经鉴定发现了鳞状细胞癌抗原1、细胞角蛋白4和膜联蛋白Ⅰ在食管癌组织中表达下调.磷酸丙糖异构酶1、锰超氧化物歧化酶和热休克蛋白27在食管癌组织中表达上调.RT-PCR的实验结果验证了差异蛋白质的可靠性.结论 食管癌组织和正常食管组织的差异表达蛋白质可做为食管癌早期诊断的候选生物学标志物.
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基于多分辨熵的VF/VT ECG信息研究
目的 对心室纤颤和室性心动过速ECG信号的信息熵进行分析.方法 先将ECG信号进行小波变换,然后,计算小波变换后第二尺度上的Shannon熵和Tsallis熵均值.结果 绝大部分VT信息熵均值比VF信息熵大.结论 Shannon熵和Tsallis熵均值可以用来识别VF/VT ECG信号.
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重组腺相关病毒-NT4p53(C22)Ant对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用
目的 研究NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒(rAAV)对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用.方法 构建NT4p53(C22)Ant,将其亚克隆于重组腺相关病毒载体中,经293细胞包装、扩增构成具有感染性的rAAV-NT4p53(C22)Ant,将小鼠源的H22肿瘤细胞接种于ICR小鼠皮下,成瘤后根据瘤体质量、抑制率、动物生存时间及病理组织学结果,评价rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗肝癌细胞(H22)的移植瘤作用.结果 一次性肿瘤局部注射NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒100 μl/次(2x1011 pfu/ml)接种于ICR荷瘤小鼠皮下的H22肝癌细胞,12只小鼠7只瘤块消失,1只死亡,瘤体的质量明显减小,生存时间大于70d;而对照组中,7只小鼠均死亡,死亡率100%,生存时间约为30 d,较治疗组明显缩短.治疗组肿瘤抑制率大于90%,较未治疗和注射空病毒对照组有显著性差异,组织学观察rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗组较对照组肿瘤细胞明显减少.结论 NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒可以有效地杀伤小鼠体内的H22肝癌细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,生存期延长.
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症状性癫痫致痫灶电生理学与影像学检查空间相关性的临床研究
目的 研究症状性癫痫患者致痫灶电生理学与影像学检查的空间相关性,探索症状性癫痫的发生原理.方法 分析2004年9月～2006年3月间于我院诊治且资料完整的91例症状性癫痫患者的临床资料及术后随访情况.分析电生理学与影像学检查的空间相关性.结果 膨胀坏死类疾病影像学和电生理学检查结果多为相邻关系;变性类疾病影像学和电生理学检查结果多为包含关系.结论 对于膨胀坏死类疾病,影像学检查发现的器质性病灶可能只是引起癫痫放电的诱发因素,而其周围并无明显影像学改变但已产生病理改变的大脑白质是导致癫痫发作的根本原因.变性类疾病病灶本身即与癫痫放电有着密切关系.症状性癫痫的发生可能是原发病灶或疾病造成癫痫产生区反馈不足而造成代偿泛滥所致.
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腹腔镜并用氨甲喋呤治疗异位妊娠近远期疗效
目的 比较腹腔镜保守手术合并使用注射氨甲喋呤与开腹手术治疗异位妊娠的疗效.方法 回顾性分析我院收治的异位妊娠患者315例,其中腹腔镜保守手术加注射氨甲喋呤203例,开腹手术组112例,比较两组手术时间、住院日、术中出血量、术后肛门排气时间、镇痛剂和抗生素应用以及术后HCG值降低至正常水平的时间,持续性异位妊娠的发生率以及恢复工作和生活情况.结果 两组患者的手术时间、住院日及持续性异位妊娠的发生率无显著性(P＞0.05),术中出血量、术后肛门排气时间、镇痛剂和抗生素应用以及术后HCG值降低至正常水平的时间.恢复工作利生活情况两组相比差异有显著性(P＜0.05).结论 腹腔镜合并注射氨甲喋呤治疗异位妊娠具有效果显著、恢复快等优点.
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肝移植术后主要神经系统并发症的发生和治疗
目的 观察肝移植术后主要神经系统并发症的类型及临床表现,并探讨其病因、易发因素及防治策略.方法 回顾性分析2003年10月至2005年9月完成的467例肝移植患者的临床资料,对肝移植术后出现神经系统并发症的病例进行统计分析并结合文献进行讨论.结果 共有91例(19.49%)患者发生神经系统并发症,其中弥漫性脑病72例,脑血管意外12例,癫痫发作4例,脑桥中央髓鞘溶解症3例,中枢神经系统感染2例.高龄、术前高胆红素血症、高渗透压、低血小板、肺部严重感染与弥漫性脑病密切相关.5例脑病患者施行了持续的肾脏替代治疗,8例脑出血患者中5例施行了开颅血肿清除术.出现神经系统并发症的患者中有79例痊愈,12例死亡,与神经系统相关死亡率为10.98%.结论 神经系统病变是肝移植术后常见并具有潜在危险的并发症,产生的原因是多因素的,免疫抑制剂的神经毒性只是一个促进因素.脑出血的发生多提示预后不良,针对病因的综合治疗和免疫抑制剂的及时调整有利于改善预后.
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HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究
目的 已知X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)在胃肠癌细胞中低表达,本研究的目的 在于探讨XAF1与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系.方法 应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原刺激诱导HSFl表达.观察对XAF1表达的作用.结果 在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达.结论 胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一.
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2型糖尿病合并肾结石的危险因素分析
目的 分析2型糖尿病(T2DM)患者合并肾结石的危险因素.方法 采用回顾性分析方法,分别测定46例T2DM伴肾结石组患者与82例T2DM不伴肾结石组患者的血清胰岛素、C肽、血脂水平,计算胰岛索敏感指数.并进行差异性比较.结果 2型糖尿病伴肾结石组患者与不伴肾结石组患者相比较,血清总胆固醇水平无明显差异(P＞0.05),伴肾结石组患者空腹血清胰岛素、c肽较不伴肾结石组显著升高(P＜0.05),胰岛素敏感指数明显降低(P＜0.05),甘油三酯、低密度脂蛋白与载脂蛋白B水平显著增高(P＜0.05).结论 高胰岛素血症、脂代谢紊乱可能是T2DM病合并肾结石的危险因素.
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肝癌TACE治疗后发热影响因素分析
目的 探讨影响肝癌经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗后发热因素.方法 回顾分析45例患者60例次肝癌经TACE治疗后发热情况,同时采用多元回归分析影响TACE后发热的影响因素.以术后发热天数为因变量,自变量即分析因素包括患者年龄、Okuda分期、肿瘤类型、有无腹水、碘油用量、是否加用栓塞剂、术前血清谷丙转氨酶、总胆红素、白蛋白、甲胎蛋白水平、红细胞数、白细胞数、血小板数、血浆凝血酶原时间、既往有无TAE史等15项.结果 影响TACE治疗后发热的因素按标准化回归系数绝对值大小依次为碘油用量(P=0.005)、加用栓塞剂(P=0.019)、Okuda分期(P=0.037)、年龄(P=0.724)、肿瘤类型(P=0.989).碘油用量在患者的发热中起重要作用.结论 碘油用量是导致TACE治疗后发热的首要因素,加用栓塞剂会加重发热,治疗前全身状态和肝脏的局部状态包括Okuda分期、患者年龄、肿瘤类型也是影响发热的因素.
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HER-2表达与乳腺癌不同方案新辅助化疗疗效的关系
目的 探讨HER-2表达与乳腺癌不同方案新辅助化疗疗效的关系,为HER-2阳性患者筛选有效的化疗方案.方法 应用CMF、CEF、NEF 3种化疗方案对132例局部进展期乳腺癌进行新辅助化疗.所有患者完成2个周期新辅助化疗后评价疗效,免疫组织化学SP法检测标本中HER-2的表达.结果 CMF、CEF、NEF三组总有效率分别为39.5%(17/43)、54.3%(25/46)和72.1%(31/43).常见不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应和脱发.CMF、CEF和NEF三组白细胞下降发生率分别为34.9%(15/43)、58.7%(27/46)、60.5%(26/43),CMF组明显低于其余两组.三组其他不良反应均无显著性差异(P＞0.05).CMF、CEF、NEF三组患者化疗前后HER-2阳性表达率均无显著性差异.CMF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为21.1(4/19)、54.2(13/24),差异有显著性(P＜0.05);CEF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为42.9(9/21)、64.0(16/25),NEF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为65.0(13/20)、78.3(18/23),差异无显著性(P＞0.05).结论 新辅助化疗对乳腺癌HER-2表达无影响,HER-2阳性患者对CMF方案不敏感,对CEF、NEF较敏感.
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食物依赖运动诱发性过敏反应的临床研究
目的 探讨食物依赖运动诱发性过敏反应(FELAn)临床特点以对这种可能威胁生命的疾病提供正确和及时的防治.方法 对10例FEIAn患者的临床资料进行回顾性分析.结果 10例FEIAn年龄范围从7～57岁,家族和/或个人过敏史(100%),过敏反应在运动后40 min内出现,小麦是常见的诱发食物,荨麻疹是常见的过敏反应.绝大多(90%病人无前驱症状且在作出诊断前有过两次以上发作.皮肤过敏原点刺试验和过敏原特异性IgE检测有助于找出食物过敏原,食物运动激发试验可确诊FEIAn.结论 FEIAn可发生于任何年龄,运动的激烈程度和FEIAn的发展无关,正确认识FEIAn并作出预警对FEIAn的处理至关重要,从而使患者能安全地进行日常活动.
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Galectin-1在大肠癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测Galectin-1在大肠癌组织、癌旁正常组织及淋巴结转移癌中的表达情况,初步探讨其与大肠癌发生发展,侵袭转移的关系.方法 (1)用SP免疫组化法检测158例临床石蜡组织标本(癌旁正常组织30例,腺瘤组织25例.大肠癌组织65例,淋巴结转移癌38例)中的Galectin-1蛋白的表达.(2)用实时RT PCR法分析Galectin-1mRNA在32对新鲜大肠癌组织及相应癌旁正常组织中的表达情况.结果 (1)Galectin-1蛋白在癌旁正常组织、腺瘤及大肠癌组织中的表达具有明显差异,其强阳性率逐渐增加;正常粘膜中的强阳性率为0,在腺瘤中的强阳性率为8%,两者之间有显著性差异(P=0.000);在大肠癌组织中的强阳性率为66%,明显高于腺瘤组织,两者之间有显著性差异(P=0.000);淋巴结转移癌中Galectin-1的强阳性率为86%,明显高于大肠癌组织,两者之间有显著性差异(P=0.022);在浸润程度深、分化程度低及发生淋巴结转移的大肠癌组织中的表达明显高于浸润程度浅、分化程度高及未发生淋巴结转移的大肠癌组织(P＜0.05).(2)在32对大肠癌组织中浸润程度深、分化程度低及发生淋巴结转移的组织中的Galectin-1mRNA表达明显高于浸润程度浅、分化程度高及未发生淋巴结转移的组织.其表达量的平均倍比关系分别为1.98、2.27、1.42倍.结论 Galectin-1参与了大肠癌的发生发展过程,可能与大肠癌的浸润、分化及淋巴结转移有一定的相关性.
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丘脑肿瘤的核磁共振诊断与鉴别诊断
目的 探讨丘脑肿瘤的MRI表现,以其提高MRI对丘脑肿瘤诊断的准确性.方法 回顾性分析41例经手术病理证实的丘脑肿瘤的MRI表现.结果 41例丘脑肿瘤中,星形细胞瘤17例,主要发生在背侧丘脑及上丘脑,Ⅰ～Ⅱ级强化较轻,占位效应较轻,Ⅲ～Ⅳ级囊变坏死多,强化明显;生殖细胞瘤12例,主要分布背侧丘脑和上丘脑近松果体区,易发生梗阻性脑积水;室管膜瘤3例,占位效应明显,不均匀明显强化,易通过脑脊液播散;畸胎瘤1例,信号混杂.钙化灶明显,占位效应轻;淋巴瘤1例,水肿范围较大,强化均匀、明显;转移瘤4例,结节与水肿不成比例,呈不规则环形强化;动静脉畸形2例,强化常见粗大的供血动脉及引流静脉;海绵状血管瘤1例,强化轻,可见含铁血黄素沉积.结论 MRI是丘脑肿瘤的诊断及鉴别诊断的主要检查方法,MRI可更清楚、准确地显示病变侵犯范围,为治疗提供可靠依据.
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泌乳素对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞表面CD40/CD154表达的影响
目的 研究泌乳素(PRL)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞表面CD40、CD154表达的影响,从而探讨其在系统性红斑狼疮发病机制中的作用.方法 检测30例系统性红斑狼疮患者和20例正常健康人血清PRL水平,分离外周血单个核细胞(PBMC).采用流式细胞仪检测CD40、CD154的表达水平.结果 ①高PRL的SLE患者组CD154的表达水平明显高于正常PRL的SLE患者组和正常对照组(P＜0.05);②正常PRL的SLE患者组PBMC经重组泌乳素(rhPRL)刺激后CD154的表达水平较刺激前明显增加(P＜0.05),而正常对照组PBMC经rhPRL刺激后CD154表达增加不明显(P＞0.05);③高PRL的SLE患者组、正常PRL的SLE患者组(加rhPRL)加入溴隐亭(Brc)前后,CD154表达水平无明显差异(P＞0.05).④SLE患者组PBMC表面CD40表达水平与正常对照组差异无显著性(P＞0.05).结论 PRL可通过上调PBMC表面CD154的表达,在SLE的发病中起重要作用;Brc对内源性、外源性PRL均无明显抑制作用.
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液基细胞学结合高危型HPV检测在宫颈病变筛查中的应用
目的 探讨超薄液基细胞学(LCT)结合高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测在宫颈病变筛查中的作用.方法 回顾性分析4264例行LCT检查的患者,其中621例结果为意义不明的不典型鳞形细胞(ASCUS)及以上患者同时行HR-HPVDNA检测和阴道镜检查并活检,分析2种方法对诊断宫颈病变的临床意义.结果 将细胞学结果与组织学结果作对比分析,细胞学异常的621例样本中ASCUS 388例,低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)147例,高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)75例,鳞状上皮细胞癌(SSC)11例.细胞学与病理诊断符合率分别为LSIL 72.41%(147/203),HSIL 92.60%(75/81),SCC 100%(11/11).621例ASCUS异常患者中HPV感染率43.32%(269/621),HPV在不同宫颈病变中的阳性率分别是:宫颈癌100.00%(11/11),宫颈上皮瘤样增生(CIN)Ⅲ 84.85%(28/33),CIN Ⅱ 70.83%(34/48),CIN Ⅰ 84.073(172/203),正常或炎症7.32%(24/326),高危型HPV感染阳性率随宫颈病变程度加重而明显升高.LCT检查的敏感性为81.04%,特异性为91.64%;HR-HPV检测的敏感性为90.47%,特异性为93.14%.结论 液基细胞学(LCT)结合高危型人乳头状瘤病毒(HPV)检测提高了宫颈病变诊断的敏感度和特异度,是防治宫颈癌的关键.
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化学发光法中和抗体检测技术对广州地区人5型腺病毒的流行病学研究
目的 建立高通量、可定量中和抗体检测方法,并且调查广州健康成人及儿童人群中人5型腺病毒中和抗体存在情况.方法 采用以带有分泌型碱性磷酸酶报告基因的5型重组腺病毒使用化学发光法,调查116份成人血清和94份儿童血清中5型腺病毒中和抗体情况.结果 该方法是一种适合高通量调查的血清学调查方法,广州地区成人中人5型腺病毒中和抗体阳性比例占26.72%,儿童中阳性比例为17.02%.结论 5型腺病毒在广州人群中具有一定的免疫程度,结合中和实验结果来应用该种病毒载体并同时开发其他血清型的腺病毒载体很有必要.
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面神经外膝部与砧骨短脚解剖关系的CT影像学研究
目的 采用高分辨率CT研究面神经鼓室段外膝部与砧骨短角之间的关系.方法 受试者为因各种原因而行颞骨CT检查的30例成人耳鼻喉科门诊病人.非患病耳正常.采用颞骨轴位扫描.层厚0.625 mm.对非患病耳颞骨CT进行测量,测量砧骨短脚尖端与面神经外膝部之间的短距离,测量位于上述短距离连线后方的面神经外膝部长度.结果 面神经外膝部与砧骨短脚尖端之间平均短距离为3.32 mm(2.3～4.7mm).位于砧骨短脚尖端垂直线以后面神经鼓室段外膝部平均长度为2.65 mm(1.9～3.9mm).结论 此结果显示了面神经外膝部的空间位置,同时也为耳鼻喉科医生提供了一种术前评估面神经外膝部与砧骨短脚关系的实用方法.
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粘着斑激酶在乳腺癌的表达及其与血管生成的关系
目的 研究乳腺癌组织中粘着斑激酶(FAK)的表达及其与微血管密度(MVD)的关系,探讨FAK介导的细胞信号转导系统对乳腺癌血管生成的作用和意义.方法 应用SP法对88例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织进行FAK和CD34免疫组化染色,分析FAK蛋白表达和CD34标记的MVD值之间,及其与乳腺癌临床病理参数之间的关系.结果 在88例乳腺癌中FAK的阳性表达率为68.2%(60/88),MVD为(34.52±13.11)/HPE,与良性对照组比较均有显著差异(P＜01);FAK表达和MVD与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.05),与患者年龄、组织病理学分级未见显著相关(P＞0.05);乳腺癌FAK表达与MVD呈正相关(P＜0.01).结论 FAK蛋白表达和微血管形成与乳腺癌的侵袭转移密切相关,FAK表达对乳腺癌血管生成具有促进作用.
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骨移植在人工髋关节股骨侧假体翻修中应用
目的 探讨采用颗粒骨、结构骨植骨技术进行人工髋关节股骨侧假体翻修术的临床效果.方法 2001年6月至2005年10月,采用颗粒骨或/和结构骨植骨技术对16例人工髋关节股骨侧假体进行了翻修,平均随访时间39个月,采用Harris评分及X线片观察进行临床疗效评定.结果 Harris评分从术前平均41.7分提高到术后82.6分,术后优良率为达87.5%;9例患者无假体松动及下沉;余7例出现不同程度的股骨假体下沉,下沉的高度低于0.5～1 cm:所有患者未出现假体松动的症状,无需再次翻修术.结论 进行有效骨缺损修复,成功地重建股骨近端的骨结构是人工髋关节股骨侧骨假体翻修的关键.
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超纯水对维持性血液透析患者氧化应激和炎症水平的影响
目的 研究超纯水对维持性血液透析患者氧化应激和炎症水平的影响.方法 对36例符合条件的患者采用重复测量自身对照的方法,测定在使用超纯水前、后6个月及12个月时血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)、白蛋白(AIb)、C-反应蛋白(CRP)、新喋呤、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平.结果 改进水处理系统后,透析用水的细菌和内毒素含量明显下降(P＜0.01).随访一年中,各项检测指标在不同时间点的差异均有统计学意义(P＜0.05);6个月时血清AOPP、MDA、GSH.Px、Alb、CRP、新喋呤、TNF-α水平较使用超纯水前明显改善(P＜0.05),且MPO有非常显著的差异(P＜0.01);12个月时IL-6(P＜0.05)、MDA(P＜0.01)水平进一步下降.相关分析显示血清MPO活性与AOPP及CRP水平在改用超纯水前后均呈正相关关系.结论 改用超纯水后患者的氧化应激和炎症水平显著降低,且MPO也许可以同时提示氧化应激和炎症水平.
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"ONE-STITCH"技术在肾移植手术中的应用
目的 探讨"ONE-STITCH"技术在肾移植膀胱输尿管吻合手术中的临床应用.方法 对比总结我中心在2002年1月至2004年12月肾移植手术膀胱输尿管吻合时324例病人应用常规膀胱粘膜下隧道式吻合(内置J型支架管)同121例病人应用"ONE-STITCH"技术(无J型内支架管)的优劣.结果 应用常规膀胱粘膜下隧道式吻合的病人,均在术后需拔除支架管.时间不定;15例病人术后出现肉眼血尿(4.6%),46例病人出现尿路感染(14.2%,P＜0.05),6例病人因出血严重出现尿路梗阻,4例再次手术清除膀胱内血块,吻合膀胱输尿管;2例患者因肾盂输尿管出血严重而摘除移植肾;17例病人术后早期发生漏尿,放置导尿管引流2周后愈合;而应用"ONE-STITCH"技术行膀胱输尿管吻合的病人7例病人出现尿路轻微感染(5.78%),3例术后早期漏尿,但23例术后出现肉眼血尿(19%,P＜0.05),随访6个月-1年,输尿管通畅无狭窄、无肾积水.结论 在膀胱输尿管吻合手术中应用"ONE-STITCH"吻合技术方便、省时、可靠、经济,术中无需放置输尿管内支架管,减少了病人的痛苦及术后的并发症,但手术中需注意处理好输尿管残端.
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三尖瓣下移畸形外科治疗121例分析
目的 总结分析121例三尖瓣下移畸形的临床资料,探讨其手术治疗的方法及疗效.方法 1988年1月～2006年6月,我科共收治121例三尖瓣下移畸形的患者,其中114例行房化心室折叠术,同期47例行单纯三尖瓣成形术,12例行三尖瓣成形加上腔静脉与右肺动脉双向分流(双向Glenn)术,31例行三尖瓣置换术,房缺修补术54例,卵圆孔未闭修补术15例,室缺修补术7例,可调试房间隔造口术8例,左心房血栓清除2例,二尖瓣成形5例,肺动脉瓣狭窄矫治4例,预激旁路切断术6例.结果 住院期间死亡3例,死亡率为2.56%,死亡原因:1例为低心排综合征:1例为Ⅲ°房室传导阻滞,缺氧性脑病并心脏骤停;1例为呼吸衰竭并严重心律失常.其余118例病人康复出院,心功能明显改善,疗效满意.结论 超声心动图和心导管等检查对诊断本病具有重要价值,三尖瓣下移畸形临床表现差异很大,只要临床症状进行性加重和心脏进行性扩大及严重心律失常者均应尽早手术.手术方法有房化右室折叠,在此基础上,可选择:单纯三尖瓣成形术、三尖瓣置换术、三尖瓣成形加双向Glenn术、可调试房间隔造121术、Fantan术等,手术治疗的关键是恢复三尖瓣的位置和功能.
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尿毒症合并动脉硬化患者的肾移植治疗(附64例报告)
目的 探讨尿毒症合并动脉硬化患者肾移植的特点,总结围手术期经验.方法 回顾性分析64例动脉硬化尿毒症患者的围手术期治疗方案,结合随访结果,在诊断、手术、术后用药等方面作出评价.结果 因肾血管栓塞切除移植肾1例.发生急性排斥反应9例,术后半年移植肾动脉狭窄1例,均治愈.63例患者至今人/肾存活,肾功能正常.结论 明确的术前诊断、良好的术中血管吻合,正确的术后处理,是减少尿毒症合并动脉硬化患者肾移植并发症、提高手术成功率的必要条件.
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全淋巴细胞清除治疗儿童难治性获得性血友病甲1例
获得性血友病甲(HAA)是指体内产生凝血因子FⅧ(FactorⅧ)特异性抗体而导致的出血性疾病,临床表现与遗传性血友病甲相似,每年发生率为1/1,000,000,但常见于老年人及产后妇女,儿童少见.临床治疗以输注新鲜血浆或浓缩FⅧ止血,糖皮质激素加环磷酰胺免疫治疗一般疗效较好.
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口服葡萄糖耐量试验诱发急性左心衰1例报告
据统计约有80%～90%急性左心衰的发生是有诱因的,凡能加重心脏负荷,增加心肌耗氧,妨碍心室充盈和心肌的供血供氧、能量代谢及离子转运的各种因素等都可诱发和加重心衰.
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两性霉素B椎管内持续给药治疗新型隐球菌性脑膜炎(附首例报告)
目的 探讨两性霉素B椎管内持续给药治疗新型隐球菌性脑膜炎的可行性.方法 临床确诊1例新型隐球菌性脑膜炎.首先采用常规疗法,即常规鞘内注射及静脉注射两性霉素B,静脉滴注氟康唑及口服5-氟胞嘧啶治疗,2周后行腰大池置管给予两性霉素B椎管内持续给药替代常规鞘内注射,第1个疗程两性霉素B椎管内持续给药维持量为3mg/d,第2个疗程两性霉素B椎管内持续给药维持量为8 mg/d,每个疗程为1个月.结果 常规疗法疗效欠佳,患者耐受性差.改用腰大池置管给予两性霉素B椎管内持续给药替代常规鞘内注射完成第1个疗程停药后复发.完成第二个疗程后治愈.结论 AMB椎管内持续给药疗效明显好于常规腰椎穿刺鞘内给药.AMB椎管内持续给药维持剂量8mg/d对成人较为合适.
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一种方便酶切鉴定的shRNA表达载体改建方法
目的 建立一种用单限制性内切酶酶切来快速筛选重组小发夹RNA(shRNA)表达载体的方法.方法 制备包含单一限制性内切酶Cta Ⅰ识别序列的双链DNA插入片段(Cla Ⅰ位点两侧碱基序列不互补).与BamH Ⅰ和Hind Ⅲ线性化的shRNA表达载体pSilencer-4.1(不含Cla Ⅰ识别序列)构建载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ.用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,将酶切产物与表达绿色荧光蛋白(GFP)shRNA的DNA模板(不含Cla Ⅰ识别序列)做连接反应.构建GFP shRNA表达质粒.提取阳性克隆质粒DNA,行Cla Ⅰ单酶切鉴定,对未被Cla Ⅰ线性化的质粒行DNA测序鉴定.结果 DNA测序表明正确构建了shRNA表达载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,以pSilencer-4.1-Cla Ⅰ为载体构建的GFPshRNA候选重组子中,不能被Cla Ⅰ线性化的均为GFP shRNA表达质粒.结论 构建了可用于制备shRNA表达质粒的通用载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,所引入的单一的Cla Ⅰ识别位点可以用来快速地筛选重组shRNA表达质粒.
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小鼠胚胎显微操作针的制备方法
本文结合我们自己制备用于小鼠胚胎显微操作的持卵针(holding pipette)和注射针(injection pipette)的经验,介绍其制备的一些方法和技巧.
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4种小肠结肠炎耶尔森菌培养方法的研究与评价
目的 建立一种高效的临床培养方法检测腹泻病人粪便中的小肠结肠炎耶尔森氏菌.方法 用改良培养方法和3种传统培养方法同时检测200份腹泻病人粪便,以比较其检出率.结果 改良培养方法(YSE-CIN))从 200份腹泻粪便中检测到18份含有小肠结肠炎耶尔森氏菌的样本,而另外3种方法(PBSS-SS法、PAE-NYE法、PAE-DYS法)的阳性例数分别为3、5、8.经McNemer检验,改良方法与其他3种方法的检出率具有显著性差异.结论 改良方法比其他3种方法的检出率更高,可应用于临床.
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连续和不连续密度梯度法纯化人胰岛的效果比较
目的 使用COBE 2991细胞处理器比较连续和不连续密度梯度纯化法纯化人胰岛的效果.方法 胰腺消化产物使用COBE 2991细胞处理器分别采用不连续和连续密度梯度法进行离心纯化,并对纯化后得到的胰岛取样检测其数量、纯度.换算为胰岛当量(IEQ),计算胰岛回收率,比较两种纯化方法的效果.结果 连续密度梯度纯化法得到的胰岛产量(55 000 IEQ vs 206 000 IEQ,P=0.000)、纯度(58.0%±8.O% vs 33.5%±10.3%,P=0.000)优于不连续密度梯度纯化法,胰岛活性没有明显差异.结论 连续密度梯度法纯化效果优于不连续密度梯度法.
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4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估
目的 评价4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)方法的临床应用价值.方法 对287株临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法,头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为检测MRCNS的金标准.结果 287株中有218株为MRCNS,头孢西丁纸片扩散法筛选MRCNS敏感性为97.7%,特异性为95.7%;苯唑西林K-B法筛选MRCNS敏感性为99.1%.特异性为66.7%;苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS敏感性为98.6%.特异性为60.9%.结论 头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRCNS的简便又准确的实验方法.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
