中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位： 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2866/R
- 国内刊号： 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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乙型肝炎与载脂蛋白基因多态性相关性研究
目的 探讨ApoAⅠ-75 Msp1、ApoB-Msp1、ApoCⅢ-Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性.方法 将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组,每组80人,共720人份,采用SnaPshot法检测上述基因的多态性,后用测序法佐证检测结果的准确性.结果 ApoAⅠ-75 Msp1、ApoE基因在乙型肝炎血清标志物不同模式之间差异有统计学意义(P＜0.05),ApoCⅢ-Sst1、ApoB-Msp1、LRP5基因则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ApoAⅠ-75Msp1、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式有相关性,ApoCⅢ-Sst1、ApoB-Msp1、LRP5与乙型肝炎血清标志物不同模式无相关性.
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黏液瘤病毒体外对胶质瘤细胞杀灭作用的研究
目的 了解C6细胞在体外对黏液瘤病毒的易感性,并测定黏液瘤病毒对体外C6胶质瘤细胞的杀灭作用.方法 以黏液瘤病毒感染体外培养的C6胶质瘤细胞,以灭活病毒作为阴性对照,5-FU作为阳性对照,DEMD液做空白对照,应用Western-Blot法、倒置显微镜及MTT法观察各组细胞的形态、成活率.结果 病毒感染组及5-FU组24 h后细胞成活率明显低于空白对照组及阴性对照组,同时病毒感染组细胞出现明显细胞病变.结论 C6胶质瘤细胞在体外对黏液瘤病毒易感,黏液瘤病毒在体外对C6胶质瘤细胞有杀灭作用.
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SARS冠状病毒N蛋白6个不同原核表达区段的抗原特性分析
目的 确定原核表达的SARS-COV N蛋白不同片段抗原特性及在血清学诊断中的应用.方法 在前期N蛋白抗原性初步分析的基础上,从39个原核表达不同区段的N蛋白中选取6个纯化的N蛋白即PN360(1 -360aa),PN301(1- 301aa),PN199( 30 - 228aa),PN185(30 - 214aa),PN155b(60 - 214aa),PN125 (90 - 214aa),采用Western-Bolt和ELISA方法,检测SARS-COV阴性正常人血清与SARS-COV患者恢复后血清中抗SARS-COV N蛋白抗体.结果 Western-Bolt结果表明6个片段皆能与SARS-COV阳性血清反应,但PN360和PN301与SARS-COV阴性血清存在明显交叉反应;使用PN199,PN185,PN155b,PN125作为包被抗原进行ELISA检测,分析表明PN185,PN155b区段的敏感性较好.结论 原核表达的SARS-COV N蛋白PN185与PN155b区段是SARS-COV病毒感染的特异性抗体检测的较佳抗原.
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我国汉、回和藏族部分人群HEV感染的血清学调查
目的 了解我国不同民族的健康人群戊型肝炎病毒感染情况.方法 采用ELISA方法检测人群血清中戊型肝炎病毒(戊肝,HEV)IgG抗体.汉族人群血清分别来自于四川、北京、黑龙江和山东,回族和藏族人群血清来自于甘肃、宁夏和青海,总共10 448份血清采集于2006 -2008年.结果 七省市人群HEV抗体总阳性率为17.97％(1878/10 448).汉、回和藏不同民族人群HEV抗体阳性率分别为24.32％ (1794/7376)、3.59％(81/2258)和0.37％(3/814).不同地区人群HEV抗体阳性率分布,四川、北京、黑龙江和山东汉族人群阳性率分别为27.45％、20.30％、22.89％和22.68％,甘肃汉和回族分别为24.63％( 184/747)和6.12％( 77/1258),宁夏回族和青海藏族分别0.40％和0.37％.汉回藏不同民族各年龄组人群HEV感染分布,汉族各年龄组人群HEV抗体阳性率,在≤10岁年龄组为5.19％,11～20岁组为11.64％,21 ～ 30岁组为20.08％,31 ～ 40岁组为34.17％,41 ～50岁为41.75％,51 ～60岁组为48.58％,≥61岁组为57.43％.回族人群各年龄组人群HEV抗体阳性率依次为3.11％,3.96％,2.11％,3.98％,2.52％,4.57％和6.67％.藏族人群3份阳性者分布在21～30岁组、31 ～40岁组和51 ～60岁组各1份,阳性率为0.63％、0.58％和1.01％.结论 汉族人群戊肝病毒感染明显高于回族和藏族,感染率随年龄增长而升高.回藏族人群HEV抗体阳性率低下,应加强对HEV感染的监测.
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人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立
目的 获得高表达量的人博卡病毒( HBoV1、HBoV2) VP2蛋白,建立血清学检测方法.方法 按照大肠埃希菌密码子使用偏性,对HBoV1、HBoV2 VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成.将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-VP2,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),使用IPTG诱导表达并摸索佳表达条件;粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验( ELISA),进行临床血清标本筛查,分析人群HBoV1、HBoV2感染情况.结果 优化合成的HBoV1、HBoV2 VP2基因正确连接至pET30a载体,开放阅读框正确,用1 mmol/L IPTG过夜诱导表达(25℃)得到高表达量的VP2蛋白,目的蛋白主要以包涵体的形式存在.粗提取蛋白经NiNTA亲和层析,在pH4.5时获得较理想的纯化蛋白,以其为抗原建立ELISA检查方法,筛查临床血清标本IgG抗体水平,结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62.2％,HBoV2阳性率为55.5％,混合感染率为37％.结论 本研究成功将HBoV1、HBoV2 VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化,得到了较高的蛋白表达量,所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查.
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乙型肝炎病毒增强子Ⅰ/X基因启动子变异与HBV慢性感染疾病谱的关系
目的 探讨乙型肝炎病毒增强子Ⅰ (HBV Enh Ⅰ)/X基因启动子变异与乙型肝炎病毒慢性化感染疾病谱的关系.方法 随机收集275例HBV感染者的血清标本,包括慢性乙型肝炎( CHB) 100例,肝硬化(LC)74例,肝细胞癌(HCC) 101例.以入选病例的基因型为分组,采用半巢式PCR的方法扩增HBV Enh Ⅰ/X基因启动子并测序,测序结果与HBV参照序列比对,确定变异位点,使用x2检验和多变量logistic回归进行数据分析.结果 ①HBV基因分型结果:HBV B基因型患者158例(61.48％),包括CHB 70例,LC 36例,HCC 52例;HBV C基因型患者117例(38.52％),包括CHB 30例,LC 38例,HCC 49例.②HBV B基因型A1123Y变异在LC组明显高于CHB组(30.56％vs.8.58％,x2=8.533,P=0.005,A=4.693,95％ CI[1.567～14.056]),HCC组明显高于CHB组(28.85％ vs.8.58％,x2 =8.607,P=0.003,OR=4.324,95％ CI[1.544 ～ 12.109]);A1317G变异在HCC组明显高于CHB组(30.77％ vs.7.14％,x2=11.687,P=0.001,A=5.778,95％ CI[1.955～17.076]).HBV C基因型T1323C变异在HCC组明显高于CHB组(30.61％ vs.6.67％,x2 =6.318,P=0.012,A=6.176,95％ CI[1.301～29.331]).③多变量logistic回归分析发现A1317G(A =5.706,95％ CI[1.770 ～ 18.837],P =0.004)和T1323C (A =5.810,95％ CI[1.114 ～30.306],P =0.037)变异是HCC发生的独立危险因素.结论 乙型肝炎病毒增强子Ⅰ/x基因启动子突变与肝硬化、肝癌的发生有关,对变异位点的检测有助于预测肝硬化和肝癌的发生.
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河北省卢龙地区2008-2009年5岁以下腹泻住院儿童中诺如病毒的检测和分型
目的 了解河北省卢龙地区2008 -2009年5岁以下住院儿童中诺如病毒的分子流行病学特征.方法 收集2008年10月至2009年8月325例5岁以下腹泻住院患儿粪便标本和流行病学资料,采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测轮状病毒抗原,利用多重RT-PCR方法检测诺如病毒,并对部分诺如病毒阳性株进行序列测定和系统进化分析.结果 诺如病毒的检出率为11.3％ (37/325),仅次于轮状病毒的检出率(48.6％),高于腺病毒(6.5％)和星状病毒(4.3％),主要感染2岁以下儿童,季节高峰在11月,系统进化分析表明诺如病毒流行优势株为GⅡ-4/2006b变异株,并发现一株未见报道的新型GⅡ-4变异株.结论 诺如病毒是引起2008 -2009年卢龙地区的急性胃肠炎的重要病原之一,GⅡ-4/2006b变异株仍是流行优势株,要进一步监测新型GⅡ-4变异株的流行.
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南京地区婴幼儿杯状病毒感染的分子流行病学研究
目的 了解南京地区婴幼儿杯状病毒腹泻的感染状况、临床表现以及分子流行病学特征.方法 采集2010年7月至2011年6月南京医科大学附属南京儿童医院5岁以下腹泻患儿粪便标本及儿童保健中心健康婴幼儿粪便标本各428份.采用反转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测杯状病毒,测序确定其基因型别.结果 428份腹泻样本中有63份为杯状病毒阳性,检出率为14.72％.其中诺如病毒GⅡ型58例,未检出诺如病毒GⅠ型,札如病毒5例,以诺如病毒GⅡ-4 2006b型为主要流行株.428份健康对照组标本杯状病毒检出19例,诺如病毒6例,札如病毒11例,2例为诺如病毒GⅡ型和札如病毒混合感染.结论 南京地区婴幼儿中存在不同基因型杯状病毒感染,流行毒株以GⅡ.2006b为主.
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烟台沿海地区人源和猪源戊型肝炎病毒基因型别的研究
目的 调查烟台市沿海地区人源与猪源戊型肝炎病毒(HEV)基因型别的相关性.方法 应用逆转录一巢式聚合酶联反应( RT-nPCR)方法对当地急性散发戊型肝炎患者、正常人群中抗HEV-IgM阳性者和当地养猪场的猪进行HEV RNA检测,并对HEV RNA阳性标本进行克隆测序和序列分析.结果 16例急性散发戊型肝炎患者中有7例粪便标本HEV RNA阳性;51份lgM阳性正常人群血清标本中有1份HEV RNA阳性;34份猪胆汁标本中有1份HEV RNA阳性.序列分析发现该地区HEV人株与猪株在ORF2部分区域的核苷酸序列同源性为87％～ 98.1％.7株患者的戊肝病毒基因型和1株猪的戊肝病毒基因型均为Ⅳ型,基因序列同源性在87％ ～ 98.1％之间;其中有6例患者和猪的基因序列同源性在93.9％ ～98.1％之间,为Ⅳ型a亚型;1例患者和猪的基因序列同源性为87％,为Ⅳ型d亚型.正常人群的1例戊肝病毒基因型为Ⅰ型d亚型.该地区人与猪HEV的ORF2的部分基因片段与HEV Ⅰ～Ⅳ型的代表株进行比较,核苷酸序列同源性分别是82.5％～100％,81.7％ ～92.9％,81.4％ ～93.9％,84.9％ ～ 100％.结论 该地区人群中流行的HEV存在2个基因型3个亚型,主要以基因Ⅳa型为主,与猪群中流行的HEV基因Ⅳa型同源性较高;HEV Ⅰ型在人群中散在存在.
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安阳地区不同食管鳞癌标本HPV感染率的比较研究
目的 对安阳地区的食管鳞癌新鲜手术标本和石蜡标本进行HPV检测,比较两种不同标本来源食管鳞癌HPV感染检测结果,统计学分析二者之间的差异,并同其他区域检测结果进行比较,分析不同标本对检测结果的影响.方法 对安阳的23例新鲜手术标本及23例石蜡标本分别进行核酸提取;分别用通用引物PCR鉴定,并用人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒对样品进行分型检测;比较两种标本来源检测结果并进行统计分析;比较分析检测结果与其他地区检测结果的差异.结果 经检测新鲜标本HPV感染率为82.6％,其中HPV16型感染率34.8％,HPV18型感染率34.8％.石蜡包埋组织标本HPV感染率78.2％,其中HPV16型感染率30.4％,HPV18型感染率17.4％.结论 首次证明两种来源标本对HPV检测结果无显著性影响,均可作为检测HPV的样本,为HPV科研检测提供更广的标本来源.
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26例有偿献血员HIV-1基因分型与变异特征
目的 分析某地区有偿献血人员中流行的人免疫缺陷病毒1型( HIV-1) gag、pol、env基因亚型及基因变异特征.方法 提取HIV-1感染者外周血单核细胞(PBMC) DNA,经巢式PCR( Nested PCR)扩增gag(p17-p24)、pol( PR-RT)、env(C2-V5)基因片段,纯化测序后用MEGA5.0等生物学软件对核苷酸序列进行分析.结果 23份样本为B亚型,2份为B亚型与C亚型重组,1份为CRF01_AE与B亚型重组.PR区未发现蛋白酶抑制剂主要耐药性突变,RT区检测到核苷类逆转录酶抑制剂耐药性突变M184V和非核苷类逆转录酶抑制剂耐药性突变K101E,G190A.结论 流行于该地区的HIV-1毒株以B亚型为主.大多数毒株对常规抗病毒药物仍然敏感,使用HARRT治疗方案依然有效.CXCR4型辅助受体的毒株顶端四肽多为GPGR(91.7％),提示GPGR可能与疾病的进展有关.
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2010-2011年兰州地区5岁以下腹泻患儿杯状病毒和腺病毒感染的流行特征
目的 了解兰州地区腹泻患儿中杯状病毒和腺病毒感染的分子流行病学及临床特点.方法 收集兰州大学第一医院2010年7月至2011年6月腹泻患儿粪便标本295份,采用RT-PCR或PCR的方法检测杯状病毒及腺病毒,腺病毒阳性标本利用多重PCR及巢式PCR的方法分型,并对序列进行分析.结果 295份粪便标本中杯状病毒的检出率为13.2％( 39/295),腺病毒的检出率是5.1％ (15/295).分型结果显示:杯状病毒中69.2％为诺如病毒,其余是札如病毒,诺如病毒中以GⅡ-3(13例)为主,其次为GⅡ-4(12例),GⅡ-6(2例);腺病毒主要以F组的41型(10/15)为主,同时还检测到1例A组的31型,2例B组的3型及C组的1例5型和1例6型,两种病毒均主要感染2岁以下儿童,无明显的季节高峰.结论 杯状病毒和腺病毒是2010 -2011年兰州地区病毒性腹泻患儿的重要病原,长期监测具有重要意义.
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成都地区婴幼儿病毒性腹泻分子流行病学研究
目的 通过分子流行病学研究成都地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点,掌握本地区病原分布特征,为疫苗研制和疫情控制提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验( ELISA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对成都地区2006 -2008年度376例婴幼儿腹泻粪便标本进行轮状病毒(RV)、杯状病毒(HuCV)、星状病毒(AstV)及肠道腺病毒(Adv)检测.结果 RV的检出率为37.76％(142/376),其中42例进行G分型,45例进行P分型,G分型以G3型为主21例(50％),其次为G2和G1型,P分型以P[8]型为主21例,其次是P[4]型19例.RV感染主要为6～23月的婴幼儿,发病高峰在10 ～12月份(75.8％).RT-PCR法检出HuCV、AstV及Adv的检出率分别为15.85％、1.64％及2.04％.结论 RV是成都地区婴幼儿病毒性腹泻的主要病原,其流行的主要血清型为G3型、P[8]、P[4]型.除RV外,HuCV也是重要的病原.
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更昔洛韦治疗新生儿先天性症状性巨细胞病毒感染
目的 应用不同剂量更昔洛韦(GCV)治疗新生儿先天性症状性巨细胞病毒(CMV)感染,观察临床疗效和不良反应,评价其治疗效果和安全性.方法 先天性症状性CMV感染新生儿37例随机分为高剂量治疗组(n=19)和低剂量治疗组(n=18),其中高剂量治疗组予GCV的剂量为:诱导治疗每次7.5 mg/kg,维持治疗每次10 mg/kg;低剂量治疗组予GCV的剂量:诱导治疗每次5mg/kg,维持治疗每次5 mg/kg.观察两组的临床疗效和不良反应.结果 不同剂量的GCV治疗先天性症状性CMV感染后临床症状均有所好转,高剂量治疗组CMV- IgM转阴率89.5％,CMV-DNA转阴率73.7％;低剂量治疗组CMV-IgM转阴率83.3％,CMV-DNA转阴率为77.8％,两组比较差异无统计学意义.低剂量GCV治疗先天性症状性CMV感染新生儿的不良反应低于高剂量GCV,低剂量治疗组中性粒细胞减少、贫血、血小板减少发生率低于高剂量治疗组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低剂量GCV治疗新生儿先天性症状性CMV感染与高剂量有同样的临床疗效,且不良反应低于高剂量GCV.
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基于郑州甲型H1N1流感疫情来评估相关诊断标准
目的 基于郑州市2009年5月至2010年1月甲型H1N1流感疫情来评估甲型H1N1流感诊断标准.方法 对疫情进行流行病学分析,使用卡方检验检测数据中所记录特征间的关联,通过Logistics回归、潜在类别分析分别评估了甲型H1N1流感病毒检测试剂盒三组探针和除其以外是否需额外的特征用于临床诊断.结果 流行病学分析表明平均世代时间为(3.59±1.41)d([2.01,7.26]),感染率为0.258±0.088 3,再生数为1.94([1.12,3.18]).统计模型结果表明,三组探针、性别、年龄、体温均与甲型H1N1流感相关并且加入性别等特征,预测结果有显著性的提高.结论 甲型H1N1流感诊断中,试剂盒三组探针和其他额外特征应一起作为标准来诊断甲型H1N1流感.
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乙肝加急性肝衰竭患者HBeAg与HBV DNA载量和终末期肝病模型分值关系的分析
目的 探讨乙型肝炎慢加急性肝衰竭(ACLF)患者临终前HBeAg状态与HBV DNA载量和MELD(终末期肝病模型)分值变化的关系及其临床意义.方法 分析120例乙型肝炎ACLF患者临终前0～14d,15 ～ 28 d和29 ～ 90 d时段血清HBeAg状态、HBV DNA载量和MELD值.结果 51例HBeAg阳性患者上述三时段的HBV DNA载量依次是(5.25±1.99),(5.45±1.47)和(6.06±1.77) log10拷贝/ml,MELD值分别为(30.33±5.25),(26.36±6.43)和(20.13±6.47).而69例HBeAg阴性患者上述三时段的HBV DNA载量顺次是(5.14±1.84),(5.49±1.75)和(4.62±1.65) log10拷贝/ml,MELD值按序为(32.38±9.95),(28.17±6.82)和(26.19±5.56).同一时间段比较,HBeAg阳性与HBeAg阴性患者间HBV DNA载量和MELD值均仅在临终前29～90 d的差异有统计学意义(P＜0.05).三个时段间比较,不论HBeAg阳/阴性,HBV DNA载量的差异均无统计学意义(P＞0.05),而MELD值随着病情进展呈持续升高且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 为启动乙型肝炎ACLF,HBeAg阳性患者的HBV DNA水平高于HBeAg阴性者.一旦ACLF启动,无论HBeAg状态如何,持续高HBV DNA载量可促进病情向终末期发展.
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终末期肝病模型动态评分评估HBV相关肝衰竭预后的价值
目的 评估终末期肝病模型(MELD)评分及其变化率(△MELD)在预测HBV相关肝衰竭患者预后的价值.方法 采用前瞻性研究,选取HBV相关肝衰竭患者98例,随访24周,收集相关临床资料,计算MELD、△MELD分值.比较不同时间点存活与死亡患者MELD及△MELD分值,应用ROC曲线下面积比较MELD及△MELD预测预后的准确性,以佳临界值分组,比较不同组别不同时间点的病死率;绘制Kaplan-Meier生存曲线,运用生存分析方法比较各组生存率变化.结果 98例患者24周内死亡52例,存活46例,死亡组与存活组间MELD、△MELD分值的差异有统计学意义(P ＜0.01);MELD≥23组8、12、24周病死率均明显高于MELD＜23组,△MELD＞4.5组病死率也高于△MELD＜4.5组,差异有统计学意义(P＜0.001);判断患者12、24周预后△MELD的AUC(0.823、0.815)明显大于MELD的AUC(0.680、0.684) (P ＜0.05);生存分析显示以佳临界值分组,各组间累积存活率的差异有统计学意义(P =0.000).结论 终末期肝病模型评分系统适用于我国HBV相关肝衰竭患者预后的预测;△MELD评估预后的准确性要高于初始MELD,有着重要的临床应用价值.
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诺如病毒快速检测试剂的评价
目的 评价德国R-Biopharm公司生产的RIDA(R)QUICK诺如病毒快速检测试剂卡(免疫层析法)的准确性、安全性以及与对照试剂的等效性.方法 以上市的IDEATMNorovirus检测试剂盒(酶联免疫法)平行测定结果为参考,评价RIDA(R) QUICK诺如病毒快速检测试剂卡(免疫层析法)的灵敏度、特异性及符合率.结果 临床检测样本1042份,新型快速检测试剂诺如病毒检测特异性98.4％,灵敏度92.4％,与对照试剂的符合率为97.6％.结论 RIDA(R)QUICK诺如病毒快速检测试剂卡对于诺如病毒抗原的检测具有良好的特异性和灵敏度.
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我国主要HIV-1流行株耐药基因型检测方法的研究
目的 研究针对中国主要HIV-1流行株优化的实验室自建耐药基因型实验室自建检测方法( in-house)的扩增效果及检测敏感度.方法 选取中国主要流行亚型的B、CRF07 _BC、CRF01_AE亚型各10份样本,这些样本为2007 -2009年本实验室采集采自河南、新疆、湖南三地已接受抗病毒治疗患者的样本,并已确定亚型.选用生物梅里埃公司的Nuclisens Easy Q方法对选取的30份样本的病毒载量平行进行3次病毒载量检测,取平均值作为载量数值.对每份样本用HIV阴性血浆进行5个浓度的梯度稀释,稀释为＞ 1000、401～1000、101 ～400、50 ～100和＜50拷贝/ml 5个浓度梯度.提取核酸后,进行RT-PCR和巢式PCR扩增,对扩增结果进行统计扩增结果,确定每种亚型的扩增效果和低检测限.随机选取12份样本的初浓度和低浓度进行测序,对测序结果进行耐药结果分析和序列一致性分析.结果 所选样本的病毒载量介于2.03×102 ～5.92×104拷贝/ml之间.自建的In-house法对载量50 ～1000拷贝/ml范围的样本仍可达到较高的扩增效果(86％).样本稀释前后耐药位点相似,序列一致性在97％以上,在低病毒载量时优势病毒株的检测则更敏感.结论 自建的实验室方法的灵敏度较高,对低病毒载量水平的样本仍有较高的扩增效果.
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构建甲型流感病毒核蛋白融合基因三种方法的比较研究
目的 比较构建甲型流感病毒核蛋白NP融合基因的三种方法,以获取成功构建含绿色荧光蛋白融合基因的方法.方法 PCR扩增甲型流感病毒核蛋白NP基因片段,运用三种不同的方法构建NP表达绿色荧光蛋白的融合基因:①含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段与pEGFPN1克隆构建融合基因;②NP基因片段与pMD19-T Vector连接、TA克隆后获得限制性内切酶酶切位点,经pEGFP-N1克隆构建融合基因;③含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段与pMD19-T Simple Vector连接、TA克隆后经pEGFP-N1克隆构建融合基因.结果 含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段TA克隆后经pEGFP-N1克隆,获得高效且稳定的绿色荧光核蛋白融合基因,第一、第二两种方法构建绿色荧光核蛋白融合基因成功率低.结论 含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段经TA克隆与pEGFP-N1连接克隆,成功构建了绿色荧光蛋白的甲型流感病毒核蛋白NP融合基因pEGFPN1-NP,该方法高效且重复性好.该研究为进一步了解NP蛋白的生物功能及甲型流感病毒的致病机理奠定了基础.
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人博卡病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备
目的 表达纯化人博卡病毒( human Bocavirus,HBoV) VP2蛋白,采用杂交瘤方法制备抗HBoV VP2蛋白的单克隆抗体.方法 应用原核表达载体pET-30a和大肠埃希菌表达VP2蛋白,并用固定化金属亲和层析,纯化后的蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELASA方法筛选阳性的杂交瘤细胞,并对单克隆抗体进行分型检测和滴度测定.结果 表达并纯化获得了重组HBoV VP2蛋白,利用杂交瘤技术得到单克隆IgG抗体,抗体效价达到1∶4×105.结论 利用HBoV VP2蛋白免疫制备了单克隆抗体,并具有较高的效价.本研究为快速诊断和研究HBoV打下基础.
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植物内生菌抗病毒活性成分的研究进展
自从1993年首次从短叶红豆杉的韧皮部分分离到一株产紫杉醇的内生真菌后,研究者就开始不断地从内生菌中分离出各种活性代谢产物[1],这其中就包括抗病毒活性代谢产物.乙型肝炎病毒、甲型H1N1和H5N1型高致病性禽流感病毒、人类免疫缺陷病毒( HIV)和严重急性呼吸综合征病毒( SARS-CoV)等引起的病毒性传染病,对人类的健康产生巨大的影响.抗病毒药物已成为全世界新药研发的一个重要课题[2].植物内生菌的次生代谢产物是可以重复利用的资源,可以通过菌种诱变、培养条件改变以及代谢调控等手段进行目标产物的优化,因而在药物研发中发挥了巨大的作用.本文着重论述了国内外新近发现的抗病毒化合物,并按照化学结构官能团进行了如下分类.
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加强我国病毒性腹泻的监测
腹泻是世界范围内婴幼儿发病和死亡的重要病因,20世纪70年代确认病毒是导致婴幼儿腹泻的主要病原之一.随后的研究证实卫生状况的改善对于病毒性腹泻的控制效果甚微,其重要性越发突出.病毒性腹泻又称病毒性急性胃肠炎,属于《中华人民共和国传染病防治法》规定的丙类传染病——其他感染性腹泻中的一大类.现阶段,全球病毒性腹泻预防控制的首要目标是减少婴幼儿重症腹泻的发生,降低婴幼儿腹泻死亡率,有效遏制病毒性腹泻在人群中的暴发流行.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
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