中华实验和临床病毒学杂志
Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지
- 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 0.71
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-2866/R
- 国内刊号: 段树学
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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负载HPV16L1抗原的DC疫苗的构建及免疫效果的研究
目的 构建负载HPV16L1抗原的树突状细胞疫苗DC-L1,研究DC-L1在小鼠体内诱导的特异性体液及细胞免疫应答.方法 使用重组细胞因子组合对树突状细胞的前体细胞进行体外分化及诱导成熟,利用表达HPV16L1抗原的重组腺病毒载体Ad5-HPV16L1感染成熟DC细胞获得树突状细胞疫苗DC-L1.使用DC-L1与Ad5-HPV1 6L1疫苗分别免疫C57BL/6小鼠,在不同的时间点使用定量ELISA及ELISPOT对疫苗诱导的L1特异性体液及细胞免疫应答进行检测.结果 DC-L1细胞具有典型的树突状细胞的形态特征,Western blot可检测到HPV16L1抗原的表达;DC-L1及重组腺病毒疫苗均可在小鼠体内诱导L1特异性的细胞免疫应答,但二者动力学特征存在差异,重组腺病毒组单针接种后可快速诱导L1特异性细胞免疫应答,免疫后第3周反应达到峰值,之后缓慢下降,而DC-L1组呈缓慢上升的趋势,在免疫后第5周才逐渐超过重组腺病毒组的反应水平.体液免疫方面,DC-L1及重组腺病毒疫苗单针接种后均能在小鼠体内诱导L1特异性体液免疫应答,且具有相似的免疫动力学特征.结论 成功构建了树突状细胞疫苗DC-L1;DC-L1可在小鼠体内诱导高水平的HPV16L1特异性的细胞及体液免疫应答.
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2014-2015年北京顺义急性胃肠炎成年患者中诺如病毒分子进化规律分析
目的 了解北京市顺义区急性胃肠炎成年患者中诺如病毒的感染规律及其基因特征.方法 采集2014年1月至2015年12月份北京市顺义区肠道门诊急性胃肠炎成年患者的粪便标本240份,并收集患者的流行病学资料.标本进行诺如病毒实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测,阳性标本应用逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)扩增诺如病毒RNA依赖性RNA聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp),并进行序列测定和基因分析.结果 诺如病毒阳性检出率23.33% (56/240),以GⅡ群为主(20.83%,50/240),GⅠ群次之(2.50%,6/240);男女阳性检出率无统计学差异(x2=0.21,P=0.65);2014-2015全年均有诺如病毒检出,高峰在11月份至次年3月份.RdRp区序列分析显示,2014年诺如病毒GⅡ.4型多(37.50%,6/16),2015年GⅡ.17型多(71.43%,20/28);所得的11条GⅡ.4型RdRp区序列与2009年之前的GⅡ.4型参考株不在同一个进化分枝,且同源性差异较大,而与2012年澳大利亚Sydney NSW0514株等近年参考株在同一个进化分枝,且同源性差异较小;所得的23条GⅡ.17型RdRp区序列与各GⅡ.17型参考株均位于同一进化分枝,虽然实验株与参考株的核苷酸同源性有所差异,但有氨基酸差异的只有14115和15017两株.结论 北京市顺义区急性胃肠炎成人患者中诺如病毒的主要流行基因型在2014年为GⅡ.4型,2015年转变为GⅡ.17型,且存在多种基因型共同流行的特点.
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2011-2012年深圳市手足口病疫情流行病学和病原学特征分析
目的 了解深圳市2011-2012年手足口病聚集性疫情的流行病及病原学特征,为进一步开展防控工作提供依据.方法 应用描述流行病学方法对手足口病疫情资料进行分析,同时对各起疫情采集的标本,采用荧光PCR方法进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16型(CA16)和其他肠道病毒的核酸检测.结果 2011-2012年实验室共收到160起手足口病疫情的标本501份,其中EV71引起的疫情36起,占22.50%;由CA16引起的疫情52起,占32.50%;由其他肠道病毒引起的疫情40起,占25%.各区均有疫情发生,其中南山区84起,占52.50%;罗湖区36起,占22.5%.除8月份以外,其他月份均有疫情发生,3-7月份为发病高峰,9-11月份出现第2个小高峰.男性阳性率72.3%,女性阳性率73.4%.结论 2011-2012年深圳市手足口病聚集性疫情有地区和月份差异;不同性别间的阳性率没有显著性差异;病原体2011年以CA16为主,2012年则是非EV71、非CA16的其他肠道病毒占主导地位.
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人巨细胞病毒感染与孕妇脐血ADAMTS13蛋白酶活性相关性研究
目的 研究人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染与晚孕妇女脐血血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13)活性的相关性.方法 选择2014年10月份至2015年10月份在河南省人民医院产科住院分娩的470例健康晚孕孕妇,于分娩时采集脐血,PCR法检测脐血HCMV DNA和mRNA水平,残余胶原结合试验法检测脐血中ADAMTS13的活性,ELISA法检测脐血血友病因子(vWF)抗原水平.结果 470例孕晚期孕妇中,脐血HCMV DNA阳性率7.65%(36/470),其中21例HCMV mRNA阳性,阳性率58.3% (21/36);HCMV DNA阴性孕妇(正常对照组,n=70) ADAMTS13活性为82.4±12.3%,显著高于宫内感染组(60.4±16.7%,P<0.001);HCMV mRNA阳性病例ADAMTS13活性为(51.3±15.9%),显著低于HCMV mRNA阴性病例(65.8±19.1%,P<0.01);正常对照组脐血vWF水平为(105.6±25.4) ng/ml,显著低于宫内感染组[(147.2±29.1)ng/ml;P <0.05];HCMV mRNA阳性病例脐血vWF水平为(161.3 ±23.3)ng/ml,显著高于HCMV mRNA阴性病例[(130.5±26.4) ng/ml;P =0.034];宫内感染组病例ADAMTS13活性水平与vWF抗原水平呈显著负相关(r=-0.343,P=0.014).结论 孕妇脐血ADAMTS13活性下降与HCMV宫内感染密切相关.
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中国2015年狂犬病流行特征分析
目的 分析中国2015年狂犬病病例流行病学特征与趋势,探讨相应防治对策建议.方法 利用2015年“传染病报告信息管理系统”和6省监测点监测上报的数据,进行回顾性描述分析.结果 2015年全国27个省份共报告病例801例,较2014年下降13.78%.疫情主要分布在南方地区,西藏、吉林于2015年分别报告1例新病例.狂犬病发病以夏秋季较多.病例仍以农民和中老年为主,男女性别比为2.74∶1,共收集109例狂犬病病例个案调查表,主要致伤动物为犬,少数为猫.6省区共报告狂犬病暴露后门诊就诊者588 870例,90.51%的门诊就诊者全程接种了疫苗,12.95%的就诊者注射被动免疫制剂.结论 2015年,全国报告病例数继续下降,疫情主要分布在南方地区,广西、河南、湖南、贵州和云南疫情较重;多年未报告病例省份疫情有所上升趋势.病例主要以农民和中老年人为主.
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2014年北京佑安医院手足口病病原谱分析
目的 分析首都医科大学附属北京佑安医院2014年手足口病(Hand-foot-and-mouth disease,HMFD)的病原谱组成,为HMFD的防治提供科学依据.方法 利用LIS系统对北京佑安医院2014年HMFD相关资料进行统计,分析全年HFMD病原谱特征.结合PCR测序及生物信息学分析对部分分型未知肠道病毒(Enterovirus,EV)进行核酸分型.结果 2014年首都医科大学附属北京佑安医院HMFD确诊病例全年2 031例,男女病患比率约1.5∶1.病原谱构成EV-A71 (34.6%)、CVA16(34.6%)和其他未分型EV(30.8%).该年度HMFD发病高峰期为4-8月份,期间HFMD病原谱中EV-A71、CVA16和未分型EV的构成比分别为:46.5%/30.8%/22.7%、41.3%/29.6%/29.1%、31.8%/38.4%/29.8%、32.6%/36.1%/31.3%和30.9%/37.4%/31.7%,各月份间差异有统计学意义(x2=24.866,P=0.002 <0.05).高发期内HFMD患者以5岁以下儿童居多,且年龄越小发病率越高.53例未分型EV经基因测序分析,33例鉴定出型别,其中CVA10、CVA6比例较高,且可引发重症.结论 2014年首都医科大学附属北京佑安医院HFMD病原谱中仍以EV-A71和CVA16为主,未分型EV也占据相当比例,且其中CVA10、CVA6检出率较高,并可引发重症.
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2010-2015年徐州市流行性感冒病原学监测分析
目的 了解徐州市2010-2015年流行性感冒(流感)流行季节、毒株构成及人群感染情况,为流感防控提供科学依据.方法 对国家级流感哨点医院的流感样病例标本和暴发疫情标本进行核酸检测和病毒分离鉴定.结果 流感病毒有明显的季节流行特征,每年的12月份到第2年3月份均有一次流行高峰,8-9月份也有一次明显的流行.各年龄组流感样本阳性率存在差异,10岁以下年龄组占病毒阳性的64.36%;其次为10-19岁年龄组,占10.69%;低的为50-59岁年龄组,为3.77%.2010-2015年共采集流感样病例咽拭子标本15 245份,流感阳性标本1 459份(总阳性率为9.57%),其中H3亚型593份(40.64%)、B型627份(占42.97%)和甲型H1N1亚型237份(占16.24%).分离出细胞毒株440株,相对分离率为30.16%(440/1459).分离出鸡胚毒株59株,分离率为13.78%.结论 徐州市2010-2015年间,甲型H3和乙型流感交替流行,偶有甲型H1N1流行,但流行态势不稳定.
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隐匿性感染的慢性乙型肝炎患者HBV S基因分析
目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者中隐匿性乙肝病毒(HBV)感染的特点,分析S基因突变及发生隐匿性感染的可能原因.方法 收集CHB患者经治疗后血清学HBsAg检测结果转为阴性而HBV DNA阳性的标本10例.采用实时定量PCR进行HBV DNA定量检测.PCR扩增HBV S区基因,并进行克隆测序.结果 10例标本ALT均正常(23.3±13.3U/L),定量和定性试剂检测血清学HBsAg结果均为阴性,HBV DNA定量结果均为阳性且病毒载量相对偏低(中位数:4.82×104拷贝/ml).经S基因测序分析,10例标本均存在S区基因突变,其中8例标本存在不同突变株或突变株与野生型的混合感染,突变频率较高的位点为T47A、L98V、I/T126N/S、T131N、M133T/I、W172*、M198I、W199*、N207T.结论 CHB患者经过抗病毒治疗后HBsAg转为阴性的病例中存在隐匿性HBV感染,发生隐匿性感染可能与HBV S基因突变或循环HBsAg低于检测限有关,使用敏感度高的试剂进行HBV DNA检测有利于CHB患者治疗后隐匿性HBV感染的发现.
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ADC患者体内HIV-1gp120基因的变异及其对U87细胞合成PDGF-BB与MCP-1的影响
目的 探讨HIV-1gp120在HIV-1入侵中枢神经系统(CNS)机制中的作用.方法 扩增1例艾滋病痴呆综合征(ADC)患者外周主动脉周淋巴结(PL)和CNS颞叶灰白质连接处(TGWJ)、脑室周围组织(PV)的HIV-1 gp120基因,测序并进行序列分析;构建真核表达载体pEGFP-gp120,在U87细胞中表达gp120蛋白,观察绿色荧光蛋白荧光强弱判断gp120表达;同时用免疫组化方法检测蛋白的表达,ELISA法检测U87细胞中血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量.结果 gp120基因序列分析结果显示,3个部位的HIV-1均为巨噬细胞嗜性,CNS来源的TGWJ和PV的HIV-1使用CCR5受体,与神经致病性有关.成功构建pEGFP-gp120表达载体,并在U87细胞中表达了gp120蛋白,转染后48 h蛋白表达量高.ADC患者不同部位来源的gp120蛋白对U87细胞PDGF-BB水平无影响(P>0.05),但能增强其MCP-1的分泌水平,且来自外周PL的gp120对MCP-1的升高作用较CNS更显著(P<0.05).结论 ADC患者CNS gp120的变异提高了其对CNS环境的适应能力,与HIV的神经致病性有关;gp120蛋白可刺激U87细胞分泌MCP-1,而且外周来源的gp120作用较强,利于HIV-1入侵CNS.
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北京地区收集的人乳头瘤病毒52型基因突变和型下分类的研究
目的 了解国内人乳头瘤病毒(human papillomavirus type,HPV) 52型E7癌基因和长调控区(long control region,LCR)的序列信息,并对其进行型下系(lineage)分类的研究.方法 共收集了1 244例宫颈脱落细胞样品,从中提取DNA并进行HPV DNA分型检测.使用PCR法扩增了其中79例HPV52单独感染样品的E7基因和LCR并进行了序列分析,其中全部测序成功的样本数为50例.分析了该50例样品代表的大陆地区与亚洲其他地区的HPV52型下系分布构成.结果 E7基因和LCR的变异频率分别为92.0% (46/50)和96.0% (48/50).E7基因和LCR分别存在5种和14种基因型.测序成功的50例HPV52分离株在型下系分类上,B占90.0%(45/50),A占8.0% (4/50),C占2.0% (1/50),没有发现分类为D的样品.亚洲各地区间HPV52的系分布构成比不同.结论 国内的HPV52在E7基因和LCR上存在着高频率的突变.亚洲各地区间HPV52的系分布构成存在地域性.
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河北省儿童病毒性脑炎和脑膜炎患者埃可病毒6型VP1基因特征分析
目的 阐明河北省儿童病毒性脑炎/脑膜炎患者中埃可病毒6型(Echovirus 6,ECHO6)分离株的基因特征及与国内外其他流行株的进化关系.方法 对河北省2013-2015年间儿童病毒性脑炎/脑膜炎病例中鉴定为肠道病毒阳性的157份脑脊液标本进行毒株分离,通用引物分段扩增毒株VP1基因获得序列;BLAST比对确定ECHO6毒株,并与来自中国9个省和其他国家的175株ECHO6病毒VP1基因序列进行同源性及亲缘关系分析.结果 获得19株ECHO6分离株;我国ECHO6流行株属于C及D基因型,本研究中19株河北分离株分属C及D9c基因亚型.19株分离株间VP1基因核苷酸同源性为79.3%-100%,氨基酸同源性为95.8%-100%,与原型株(D'Amori)核苷酸和氨基酸同源性分别为76.2%-78.3%和92.3%-95.1%.VP1基因的序列分析显示,19株ECHO6分别与我国云南、浙江和山东的ECHO6分离株存在较高核苷酸和氨基酸同源性.结论 2013-2015年间引起河北省儿童病毒性脑炎/脑膜炎的ECHO6病毒流行株主要为C及D9c基因亚型,同时存在多个传播链.
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1例手足口病患者及其密切接触者的病原检测与序列分析
目的 对山东省济宁市手足口病患者及其接触者标本进行病毒分离以及基因组序列测定与分析,捕捉病毒在传播过程中的变异情况.方法 使用RD细胞分离病毒,通过8对位于保守区的首尾重叠的全序列扩增引物进行扩增和序列的测定与拼接,并对全基因序列以及氨基酸序列与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)各亚型标准株进行同源性分析以及遗传进化分析.结果 自1例患儿及其密切接触者各分离得到1株EV71分离株,分别命名为SDJN2015-01和SDJN2015-01.1;同源性分析显示分离到的两株病毒与C4a亚型株EU703813同源性高;遗传进化分析显示两株病毒同属于C4a亚型.序列比对发现,两株病毒共存在12个核苷酸的差异,导致6个氨基酸的差异,分别为VP1区K98E(全编码区为K663E)和A133T(A698T)以及2C区D48N(D1159N)、V126I(V1237I)、I238V(I1349V)和N314Y(N1425Y).结论 SDJN2015-01和SDJN2015-01.1株同属EV71C4a亚型,其与C4a亚型标准株EU703813具有高度同源性;两株病毒间在VP1和2C区产生的氨基酸的变异对病毒毒力以及感染能力是否有影响有待进一步研究.
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青海地区急性呼吸道感染症候群中人冠状病毒及鼻病毒分子流行病学研究
目的 了解青海地区急性呼吸道感染人群中人冠状病毒(human coronavirus,HCoV)及鼻病毒(human rhinovirus,HRV)的分布,探讨其分子流行病学特征.方法 采集2010年5月至2015年5月青海地区急性呼吸道症候群病例鼻咽拭子445例,采用荧光定量反转录聚合酶链式反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法对HCoV 6种亚型(OC43,HKU1,229E,NL63,SARS和MERS)及HRV进行检测,并分析其分子流行病学特点.结果 445例样本中共检出HCoV 34例,检出率7.64%,其中HCoV-OC43 19例(4.26%)、HCoV-HKU1 15例(3.37%),其他亚型未检出.HRV检出16例,检出率3.59%.HCoV-OC43在20-60岁年龄组检出率高,为9.48%,且不同年龄组差异有统计学意义(Fisher's确切概率P =0.0011).HRV在门急诊病例中的检出率比住院病例高,为6.72%,且差异有统计学意义(Fisher's确切概率P =0.0432).HCoV-OC43与HCoV-HKU1夏季检出率高,分别为为7.20% (9/125)、9.60%(12/125);不同季节HCoV检出率差异有统计学意义(x2=25.08,P<0.0001).HRV春季检出率高,为10.17% (6/59),不同季节检出率差异有统计学意义(Fisher's确切概率P=0.0449).HCoV感染阳性样本Ct值中位数36.81(35.54-37.49),在住院病例中为36.93(35.54-37.53),在门急诊病例中为36.68(31.18-36.84),差异无统计学意义.HRV阳性样本Ct值中位数31.83 (27.16-33.65),在住院病例中为28.97(26.39-33.79),在门急诊病例中为32.34(30.85-33.65),差异无统计学意义.结论 HCoV及HRV流行高峰主要为夏季和春季,其中HCoV-OC43/HCoV-HKU1是HCoV感染的主要亚型.Ct值在一定程度上反映了HCoV和HRV在不同病例类型中病毒载量的差异.
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CD31分子在T淋巴细胞表面的表达频率和慢性HBV感染关系
目的 研究慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者外周血CD31分子在T淋巴细胞表面的表达频率与血清ALT水平、HBeAg、HBV DNA之间的关系,初步探讨CD31分子表达频率与慢性HBV感染之间的关系,了解CHB患者的免疫状态变化.方法 收集42例未进行抗病毒治疗的CHB患者和25例健康体检者的新鲜全血,常规分离淋巴细胞,应用流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+、CD31+、CD31+ CD4+、CD31+ CD8+、CD31+ CD4 +/CD4+、CD31+ CD8 +/CD8+细胞的百分比,同时采用全自动生化分析仪测定血清ALT水平、实时荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量、化学发光法检测HBV血清标志物.结果 CHB患者外周血CD4+、CD31+、CD31+ CD4+、CD31+ CD4+/CD4+细胞百分比显著低于健康体检者,差异具有统计学意义(t=2.293、2.183、2.765、2.200,P值均<0.05);CHB患者中ALT< 2ULN组CD31+、CD31+ CD4+、CD31+ CD8+、CD31+ CD4 +/CD4+细胞百分比显著低于ALT≥2ULN组,差异具有统计学意义(t=2.150、2.377、2.937、3.128,P值均<0.05);HBVDNA低载量组(>103-105拷贝/ml)、中载量组(>105-107拷贝/ml)和高载量组HBV DNA(>107-109拷贝/ml)CD31分子表达频率呈上升趋势,但组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);HBeAg阴性组CD31+、CD31+ CD8+、CD31+ CD4 +/CD4+细胞百分比显著低于HBeAg阳性组,差异具有统计学意义(t=2.284、2.128、2.631,P值均<0.05).结论 CHB患者T淋巴细胞表面CD31表达频率下降;CHB患者T淋巴细胞表面CD31分子表达频率与血清ALT水平、HBVDNA的不同载量、HBeAg存在一定的关系;慢性HBV感染者的免疫状态可能与T淋巴细胞表面CD31分子表达频率有关.
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登革2型病毒E基因DⅢ区的原核表达及血清学诊断应用
目的 表达登革2型病毒E基因DⅢ区重组蛋白并应用于血清登革病毒IgM抗体检测.方法 构建包含登革2型病毒E基因DⅢ区片段的重组表达质粒,并在E.coli BL21(DE3)中表达,利用重组蛋白建立间接ELISA法用于血清登革病毒IgM抗体检测.结果 成功构建重组表达质粒并表达重组蛋白,纯化的重组蛋白用于血清登革病毒IgM抗体检测,以IFTA作为参照标准,灵敏度为93.75%,特异度为91.25%;与Panbio Dengue IgM Capture ELISA试剂盒检测结果相比,二者具有较高的一致性(x2=0.214,P>0.05;Kappa=0.825).结论 在大肠埃希菌中成功表达登革2型病毒E基因DⅢ区重组蛋白,并能够应用于血清登革病毒IgM抗体检测.
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人用狂犬病疫苗中糖蛋白抗原检测方法的建立及适用性研究
目的 建立可快速检测人用狂犬病疫苗中糖蛋白抗原含量的方法并进行适用性验证.方法 取2株抗狂犬病病毒糖蛋白的基因工程抗体,采用双抗体夹心ELISA技术,方阵滴定法确定包被单抗和酶标二抗的佳工作浓度.对该方法进行特异性、灵敏度、重复性和适用性验证.结果 包被抗体的使用浓度为200 ng/孔,HRP酶标二抗的佳稀释比例为1∶2 000.验证结果显示该方法具有良好的特异性和灵敏性,变异系数<15%;对于不同疫苗生产毒株CTN株、aG株PM1503株和PV株均可有效检测.结论 成功建立了适用于人用狂犬病疫苗糖蛋白ELISA检测方法,这对于人用狂犬病疫苗生产质控及效价测定方法替代奠定基础,具有重要意义.
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中东呼吸综合征冠状病毒的实验室检测以及疫苗和治疗研究进展
中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年首次发现的具有高病死率、可感染人的一种新型冠状病毒,给全球公共健康带来严重威胁.目前,针对MERS-CoV的病毒分离、免疫学及核酸检测方法已经建立,特异性的疫苗和治疗药物也正在研发之中,成为控制MERS-CoV感染蔓延的有力武器.本研究就MERS-CoV的实验室检测及疫苗和治疗研究进展作一综述,以期为MERS-CoV的防控提供参考.
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北京市EV-D68型肠道病毒引起的急性呼吸道感染
目的 了解北京地区呼吸道感染病例中EV-D68型肠道病毒感染情况,发现北京地区EV-D68型肠道病毒的流行规律,为呼吸道传染病预防控制策略的制定提供依据.方法 从监测哨点医院采集呼吸道感染病例的咽拭子、痰液、肺泡灌洗液等标本,利用实时荧光PCR方法,筛查肠道病毒,利用EV-D68型肠道病毒特异性引物对肠道病毒核酸检测阳性标本进行RT-PCR扩增和测序.测序结果在NCBI中进行BLAST,分析肠道病毒血清型,并进行进化分析.结果 从2015-2016年6月份的10 494例呼吸道感染病例病原学标本中,检测到330例肠道病毒核酸阳性标本,其中两例为EV-D68型特异性引物扩增阳性,经测序证实其为EV-D68血清型.对VP1区的序列进化分析结果表明,两株EV-D68肠道病毒均属于3个已知的进化分支中的亚系1.结论 北京地区存在EV-D68型肠道病毒的流行,并可引起呼吸道感染,流行的EV-D68均属于亚系1,与国际上主要流行的亚系一致.本研究结果为阐明EV-D68病毒的流行特点提供了数据参考.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 |
2006 | 01 02 03 04 |
2005 | 01 02 03 04 |
2004 | 01 02 03 04 |
2003 | 01 02 03 04 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |
1999 | 01 02 03 04 |
1998 | 01 02 03 |