重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位： 重庆市教育委员会
- 主办单位： 重庆医科大学
- 影响因子： 0.72
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-3626
- 国内刊号： 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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组织结构声学定量技术无创评估TIPS联合PTVE疗效
目的:探讨组织结构声学定量分析(acoustic structure quantification,ASQ)技术在无创评价经颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,Tips)联合经皮肝穿胃冠状静脉栓塞术(percutaneous transhepatic varices embolization,PTVE)疗效的临床应用价值.方法:应用ASQ技术对30例正常人及30例肝硬化门静脉高压预行TIPS联合PTVE患者手术前后肝、脾分别定量分析,比较手术前后肝、脾的ASQ卡方值直方图和ASQ定量相关参数:众数、均值、标准差以及蓝红2色直方图曲线下面积比;并在手术过程中测量门静脉压(portosystemic pressure gradient,PPG);比较手术前后肝、脾ASQ定量参数值的变化及与PPG的相关性.结果:PPG术前组(28.71±4.81) mmHg与术后组(18.30±4.73) mmHg比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);脾脏Red Mode、Red Ave、Red SD、FD ratio、Blue Mode、Blue Ave、Blue SD各参数值正常对照组分别为(99.60±2.15)、(102.25±2.22)、(13.62±1.70)、(0.13±0.11)、(120.90±6.29)、(132.57±15.98)、(27.94±13.65),术前组上述参数值分别为(103.21±1.98)、(107.52±2.51)、(18.48±1.41)、(0.18±0.07)、(125.25±2.86)、(146.57±9.03)、(37.64±10.21),术前组脾ASQ各定量参数均大于正常对照组(P＜0.05);术后组脾ASQ各定量参数分别为(101.66±1.97)、(105.24±2.04)、(16.56±1.49)、(0.15±0.09)、(122.96±5.56)、(137.96±14.46)、(31.45±12.49),术后各参数值均小于术前,各组之间具有统计学差异(P＜0.05);肝ASQ各定量参数值在术前组分别为(117.81±3.23)、(120.70±3.27)、(19.70±1.07)、(0.67±0.28)、(136.05±4.62)、(148.68±7.03)、(33.68±7.36),术后组各参数值分别为(118.01±3.35)、(120.9±3.58)、(19.54±1.40)、(0.66±0.30)、(135.26±4.38)、(148.42±7.65)、(33.73±6.30),术前组与术后组比较差异无统计学意义(P＞0.05).脾ASQ各定量参数值与PPG呈高度正相关(r值分别为0.299、0.331、0.451、0.848、0.961、0.318、0.881,P均＜0.05);然而肝ASQ各定量参数值与PPG无相关性(r值分别为0.194、0.174、0.045、0.169、0.128、0.105、0.136,P均＞0.05);正常对照组、术前组、术后组脾脏指数(spleen index,SI)分别为(18.21±1.42) cm2、(45.23±12.32) cm2、(35.66±11.70) cm2,正常对照组与术前、术前组与术后组脾指数比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:ASQ技术测量的脾ASQ各定量参数值可用于无创定量监测TIPS联合PTVE术前、术后门静脉压的变化情况、评价手术疗效,具有良好的临床应用前景.
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改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA
目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果.方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和GodeneyeTM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析.结果:改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个.结论:改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测.
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简易版疾病认知问卷中文版在躯体化障碍患者中的应用
目的:引进简易版疾病认知问卷(brief illness perception questionnaire,B-IPQ)并探讨其在躯体化障碍患者中的效度和信度.方法:对方便取样法选取的237例躯体化障碍患者实施B-IPQ测评并进行项目分析、探索性因素分析、验证性因素分析和内部一致性检验;同时施测抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)和焦虑自评量表(self-rating anxiety scale,SAS)以检验效标关联效度;2周后对其中95例再测B-IPQ以检验重测信度.结果:项目分析显示各条目得分与总分的相关系数介于0.556～0.842;探索性因素分析与验证性因素分析表明B-IPQ具有单一维度特性;B-IPQ总分与SAS、SDS得分均呈正相关(r=0.640、0.616).内部一致性Cronbaeh's α系数为0.831,重测信度为0.931.结论:B-IPQ中文版具有较好的鉴别力和信效度,符合心理测量学的要求,可用于躯体化障碍患者疾病认知的测评.
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超脉冲CO2激光治疗儿童化脓性肉芽肿的临床疗效观察
目的:观察超脉冲CO2激光治疗儿童化脓性肉芽肿的临床疗效及安全性.方法:重庆医科大学附属儿童医院皮肤科门诊2011年收治化脓性肉芽肿患儿120例,采用普通CO2激光治疗,作为对照组;2012年收治化脓性肉芽肿患儿103例,采用超脉冲CO2激光治疗,作为治疗组.2组均遵循患者本人或家长自愿原则,激光术后1个月、3个月、6个月、1年复诊,评估治疗效果及不良反应.结果:治疗组有效率为97.1％,对照组有效率为96.7％,对照组与治疗组治疗有效率比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组120例共计26例(22.0％)有不良反应,其中轻微疤痕14例,色素沉着5例,色素减退4例,红斑3例.治疗组103例共计10例(9.7％)有不良反应,其中轻微疤痕3例,色素沉着3例,色素减退2例,红斑2例.对照组出现不良反应概率明显大于治疗组.2组治疗不良反应发生率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:超脉冲CO2激光治疗化脓性肉芽肿具有较好的临床疗效,不良反应发生低.
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StarLuxG强脉冲光与Q-开关倍频Nd∶YAG激光治疗雀斑的疗效对比研究
目的:StarLuxG强脉冲光与Q-开关倍频Nd∶ YAG激光治疗雀斑的疗效对比研究.方法:50例雀斑患者,随机分为2组,每组25例,StarLuxG组采用StarLuxG强脉冲光,激光组采用Q-开关倍频Nd∶ YAG激光(波长532 rim),根据患者皮损深浅选择适当的参数.针对2组间治疗雀斑的总有效率和不良反应采用卡方检验进行比较,P＜0.05,差异有统计学意义.结果:StarLuxG组总有效率88％;激光组总有效率92％,差异无统计学意义(x2=-2.569,P＞0.05);StarLuxG组0例(0％)患者出现暂时性色素沉着;激光组6例(24％)患者出现暂时性色素沉着,差异有统计学意义(x2=-6.818,P＜0.05).随访6～12个月,术后无感染及瘢痕发生.结论:StarLuxG强脉冲光是一种有效、安全、无创便捷的治疗面部雀斑的方法,无停工期,不影响患者的正常生活及工作.
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癌症疼痛规范化治疗与睡眠-觉醒节律的相关性研究
目的:观察癌痛规范化治疗(good pain management,G.P.M)的临床疗效与治疗前后患者睡眠-觉醒节律变化.方法:收集2012年6月至2014年5月期间,在郑州市第九人民医院、河南省人民医院就诊的癌症疼痛病人264例,随机分组,分别接受癌痛规范化治疗和对症治疗;在接受癌痛规范化治疗或对症治疗前及治疗1周后,分别采用数字分级法(numeric rating scale,NRS)对其疼痛程度进行评分,并进行统计学分析.查找随机数列表,从2组中各随机抽取30人,治疗前后进行24 h睡眠监测,并根据脑电图(electroencephalogram,EEG)、肌电图(electromyogram,EMG)及眼动图(electronystagmogram,EOG)进行睡眠-觉醒节律分析,分析患者睡眠总时间、浅睡眠时间、深睡眠时间和快动眼睡眠时间(rapid eye move sleep,REM),进行统计学分析.结果:癌痛规范化治疗可明显缓解患者疼痛,降低NRS评分,延长睡眠总时间和快动眼睡眠时间;增加总睡眠时间中浅睡眠及快动眼睡眠比重,对症治疗对睡眠影响意义不大.结论:癌痛规范化治疗可有效缓解癌痛,延长睡眠时间,改善睡眠-觉醒节律,提高睡眠质量.
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突发性耳聋的分型治疗及预后分析
目的:探讨突发性耳聋分型治疗的必要性以及影响突发性耳聋治疗效果的预后因素.方法:回顾性分析2011年2月至2013年5月间我科收治的498例(526耳)突发性耳聋的病例资料.按照患者的听力曲线将其分为低中频下降型、中高频下降型、平坦型和全聋型4种类型.每种类型采用不同治疗方案,分析不同类型患者的治疗效果,并探讨其预后的影响因素.结果:共收集病例498例(526耳),男女比例为0.95∶1;年龄13～86岁,平均年龄(45.39±15.78)岁.根据听力曲线分型:低中频下降型91耳(17.30％),中高频下降型74耳(14.07％),平坦型191耳(36.31％),全聋型170耳(32.32％).各种类型的总有效率:低中频型总有效率高,为70.33％;中高频型总有效率低,为35.14％;平坦型50.26％,全聋型51.76％,差异有统计学意义x2=20.918,P=0.000).多因素logistic回归分析结果显示:年龄(OR=0.977,95％C1=0.965～0.989,P=0.000)、突发性耳聋分型(OR=0.977,95％CI=0.180～0.748,0.372～1.199,0.300～0.963,P=0.035)、患耳(OR=0.977,95％CI=0.450～0.989,0.161 ～0.628,P=0.002)、发病至于预时间(OR=0.977,95％CI=0.925～0.967,P=0.000)与突发性耳聋治疗效果相关.结论:突发性耳聋患者的预后与年龄、突发性耳聋分型、患耳、发病至于预时间、高血压有关.不同类型的突发性聋患者疗效差异大,低中频下降型疗效好,全聋型、平坦型次之,中高频下降型疗效不佳.根据突发性耳聋患者的听力曲线进行分型,进而选择不同的治疗方案具有重要意义.
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成人腭部微种植体植入区域骨皮质密度的锥形束CT测量分析
目的:利用锥形束CT(cone beam computed tomography,CBCT)测量腭部骨皮质密度,分析腭部骨皮质密度的分布规律.方法:选取107例20～40岁成人(男51例、女56例)的CBCT影像数据,测量腭部28个点位的骨皮质密度,以亨斯菲尔德单位(Hounsfield units,HU)表示,重复测量方差分析比较不同部位间骨密度差异,￡检验比较骨密度的性别差异.结果:腭部各测量点位中骨皮质密度大值为(976.24±138.66) HU,小值为(460.45±183.33) HU.除Y0X0、Y8X0、Y8X6、Y12X6、Y20X6、Y20X9、Y24X6和Y24X9外,其余20个测量点位的骨皮质密度值性别差异有统计学意义(P＜0.05).腭部骨皮质密度有由前向后递减的趋势(P=0.000).腭前部中缝旁3 mm区域的骨皮质密度高于腭前部中缝区(P＜0.05).结论:经CBCT获取了成人腭部骨皮质密度的分布规律,为腭部微种植体植入部位的选择提供了参考.
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关节镜辅助下自体肌腱重建内侧髌股韧带治疗复发性髌骨脱位的疗效
目的:探讨胫骨结节内移垫高截骨联合内侧髌股韧带重建和关节镜下外侧支持带松解治疗复发性髌骨脱位的疗效.方法:对28例复发性髌骨脱位患者(男3例,女25例),行胫骨结节内移垫高截骨联合内侧髌股韧带重建和关节镜下外侧支持带松解治疗,术中先在镜下检查髌骨轨迹,手术前后髌骨CT扫描测量髌股合适角、髌骨倾斜角及髌骨外移率以及Kujala、Lysholm和Tegner运动功能评分评估膝关节功能.结果:所有患者均获得随访,随访时间12～33月,平均18.5个月,后随访时膝关节症状得到改善,CT检查髌骨适合角、髌骨倾斜角及髌骨外移率分别由术前的(33.85±4.30)°、(12.23±1.78)°、(47.7±2.61)％降低到(11.58±1.86)°、(8.35±1.52)°、(8.80±1.63)％,均有统计学差异(P=0.000);Kujala、Lysholm和Tegner运动功能评分分别由7术前的(57.70±2.93)、(56.3±2.53)、(3.40±0.94)分提高到(89.90±2.87)、(91.40±2.06)、(5.20±1.07)分,均有统计学差异(P=0.000).结论:胫骨结节内移垫高截骨联合内侧髌股韧带重建和关节镜下外侧支持带松解能有效治疗复发性髌骨脱位,改善膝关节的稳定性并避免脱位复发,利于患者膝关节功能恢复.
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人肝再生增强因子真核表达及其对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响
目的:构建人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR) 15kD亚型的真核表达系统,并探索ALR对顺铂(Cisplatin,DDP)诱导的人肝癌细胞株QGY凋亡的影响.方法:用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法和基因重组技术,从重组质粒pPIC9K-rhALR中扩增出编码rhALR基因片段,将其克隆入pPICZαA质粒中构建重组质粒pPICZα-A-rhALR.重组质粒SacⅠ酶切线性化后电转入酵母GS115中,并在1％的甲醇诱导下表达.表达上清蛋白经Western blot(ALR多克隆抗体和His-tag标签抗体)鉴定和镍柱亲和层析纯化.MTS试剂检测rhALR体外对人肝癌细胞(HepG2、QGY)的促增殖活性,及流式细胞仪检测rhALR在顺铂诱导QGY细胞凋亡中的抗凋亡作用.结果:PCR、双酶切、DNA测序均鉴定重组质粒构建与预期一致.分泌表达的rhALR约占上清总蛋白的70％,目的分子量约17 kD,Western blot均可见单一条带.纯化后的rhALR对HepG2和QGY的体外促增殖作用呈浓度依赖性增强(HepG2组:F=246.729,P=0.000;QGY组:F=246.004,P=0.000),且在QGY细胞顺铂诱导凋亡时也发挥着浓度梯度式抗凋亡作用(F=101.061,P=0.000).结论:成功构建高效分泌表达rhALR的pPICZα-A-rhALR GS115真核表达系统;体外实验证实rhALR对顺铂诱导人肝癌细胞有呈浓度依赖性的抗凋亡作用.
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胞浆转导肽介导抑癌基因NPRL2对肾癌细胞凋亡及Bax-Caspase3凋亡通路的影响
目的:证实胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)介导抑癌基因NPRL2以CTP-NPRL2融合蛋白形式对人肾癌细胞株786-O的作用,检测其诱导的肾癌细胞凋亡及其对Bax-Caspase3凋亡通路的影响.方法:构建重组质粒pET28a-CTP-NPRL2和pET28a-NPRL2并转染大肠杆菌DH5α,从而得到原核表达体系用于CTP-NPRL2融合蛋白及NPRL2蛋白的表达和提取;Western blot验证CTP-NPRL2蛋白和NPRL2蛋白的表达;将肾癌786-O细胞分为2组,分别与等量的NPRL2蛋白和CTP-NPRL2蛋白共培养,采用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测2种蛋白在肾癌细胞786-O的亚细胞定位情况;将在96孔板培养的786-O细胞分为5组,其中4组分别用1.0 μmol/L CTP-NPRL2蛋白、2.0 μmol/L CTP-NPRL2蛋白、4.0 μmol/LCTP-NPRL2蛋白、4.0 μmol/L NRPL2蛋白处理,剩余1组为对照组;MTT法检测各组786-O细胞增殖的情况;流式细胞仪分析各组细胞周期和细胞凋亡情况;real-time PCR、Western blot检测各组786-O细胞中Bax和Caspase-3在mRNA及蛋白水平的表达情况.结果:质粒测序结果显示成功构建所需的原核表达载体;Western blot结果显示CTP-NPRL2融合蛋白在原核表达载体中有表达.激光共聚焦显微镜结果提示CTP-NPRL2蛋白导入786-O细胞后定位于胞浆;MTI发现CTP-NPRL2组细胞增殖较NPRL2组及空白对照组受到明显的抑制(P＜0.05);流式细胞分析显示,相对于空白对照组和NPRL2组,CTP-NPRL2组的凋亡率显著增高且处于G0/G1期细胞明显增多(P＜0.05).real-time PCR和Western blot结果提示,与空白对照组和NPRL2组比较,CTP-NPRL2组Bax和Caspase-3在mRNA和蛋白质水平的表达均明显上调(P＜0.05).结论:CTP介导抑癌基因NRPL2以CTP-NPRL2融合蛋白形式导入肾癌786-O细胞中并对其有明显的抑制作用,可能通过影响Bax-Caspase3凋亡通路的活性,抑制786-O细胞的增殖,并诱导其凋亡将细胞周期阻滞于G0/G1期,从而发挥抑癌作用.
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肝癌组织中FN和PTEN的表达及其临床意义
目的:探讨抑癌基因纤黏连蛋白(fibronectin,FN)、张力蛋白同源基因蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义.方法:收集215例HCC、癌旁组织和19例正常肝组织,用RT-PCR、Western blot、免疫组化SP法检测FN、PTEN mRNA和蛋白表达,分析FN和PTEN表达与HCC临床病理特征的关系.结果:肝癌组织中FN mRNA和蛋白表达均明显高于癌旁组织及正常肝组织(F=142.334,P=0.000);而PTEN低于癌旁组织及正常肝组织,且在癌旁组织中的表达亦明显低于正常肝组织(F--80.861,P=0.000).FN表达阳性患者组较阴性患者组生存时间短;而PTEN表达阳性患者较阴性患者生存时间长,且在1年以后两者生存期有统计学意义(P＜0.05).结论:HCC癌组织中FN、PTEN在肝癌组织中存在异常表达,两者异常表达可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用.
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茶多酚联合表柔比星对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及机制
目的:研究茶多酚(polyphenols,TP)对表柔比星(epirubicin,EPI)诱导人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,探讨两者联合对T24细胞生长影响的机制.方法:不同浓度TP和EPI作用膀胱癌T24细胞24h,MTT试验选择药物作用浓度TP(88.8μmol/L)和EPI (4.6 μmol/L).试验分空白对照组、TP组(88.8 μmol/L)、EPI组(4.6 μmol/L)、联合组(TP 88.8 μmol/L +EPI 4.6μmol/L)共4组,处理T24细胞24 h后,Annexin V-PI双流式细胞术检测各组细胞凋亡率;处理T24细胞8h后,透射电镜观察各组细胞内自噬体的变化;处理稳定表达GFP-LC3的T24细胞8h后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白LC3荧光斑的形成与变化;处理T24细胞不同时间,Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ(8 h)、底物蛋白P62(8 h)、凋亡相关蛋白CASP3、PARP(16 h)表达变化.结果:TP(88.8 μmol/L)联合EPI(4.6 μmol/L)处理组较单药组引起的细胞增殖抑制率(F=730.411,P=0.000)和细胞凋亡率(F=161.945,P=0.000)明显提高.EPI(4.6 μmol/L)单药处理T24细胞后引起明显自噬,透射电镜下细胞质内自噬体双层膜结构形成;荧光显微镜下胞质内有明显点状荧光斑聚集形成,且含荧光斑的细胞数量也明显增加,差异有统计学意义(F=41.944P=0.000);westem blot结果显示EPI组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达增多,P62表达降低.联合TP作用后自噬明显减弱,自噬相关蛋白表达降低,而凋亡相关蛋白活性显著增高.结论:TP可以增强EPI对膀胱癌T24细胞的致凋亡敏感性,其机制与TP抑制EPI化疗过程中诱导的保护性自噬有关.
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鼻咽上皮细胞中过表达PIN1激活JNK信号通路上调CyclinD1的研究
目的:研究肽脯氨酰异构酶PIN1 (prolylisomerase,PIN1)可能影响的肿瘤信号通路和相关基因,探讨鼻咽癌早期发生发展的机制.方法:运用慢病毒表达系统在鼻咽上皮细胞系NP69中建立PIN1过表达细胞克隆株,real-time PCR、Western blot检测PIN1表达情况;肿瘤信号通路阵列荧光素酶实验筛选PIN1可能影响的细胞信号通路,Western blot加以验证.结果:稳定表达PIN1的NP69细胞可激活一系列肿瘤信号通路其中激活丝裂原活化蛋白激酶MAPK/c-Jun氨基末端激酶JNK(MAPK/JNK)信号通路,差异具有统计学意义(P＜0.01),核转录因子-κB(P=0.036)、癌基因Myc (P=0.048)信号通路变化具有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示与对照组相比,稳定表达PIN1的NP69实验组可明显上调JNK信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1 (t=-7.295,P=-0.002)的表达.结论:稳定表达PIN1的NP69细胞可激活MAPK/JNK信号通路,明显上调JNK信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1的表达,PIN1与鼻咽癌早期的发生发展密切相关.
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环巴胺阻断Hedgehog信号通路对食管癌EC109细胞上皮间质化逆转的影响及机制
目的:探讨环巴胺阻断Hedgehog通路对食管癌EC109细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其可能机制.方法:实验分为实验组和对照组,实验组应用Hedgehog通路特异性阻断剂环巴胺作用食管癌EC109细胞48 h.通过real-time PCR检测Gli1的表达变化,观察细胞形态变化,通过血管拟态实验检测血管形成能力变化,Transwell小室侵袭和迁移实验、黏附实验分别检测细胞侵袭、迁移和黏附能力变化,real-time PCR及Western印迹方法检测EMT相关标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)、β连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)及EMT调控因子Snail、Twist1等的表达变化.结果:环巴胺阻断EC109细胞Hedgehog信号通路Gli1的mRMA表达明显减少为(41.819±20.150)％,形态发生明显变化,血管拟态个数较对照组[(2.780±0.424) vs.(5.080±0.634)]明显减少(t=-16.919,P =0.000),侵袭实验较对照组[(24.800±2.588) vs.(55.400±4.879)]和迁移实验较对照组[(23.200±1.924) vs.(65.400±4.775)]均明显减少(t=-12.390,P=0.000;t=-18.331,P=0.000),同种细胞间黏附增强(F=9.327,P=0.009),上皮表型标志物E-cadherin表达较对照组[(0.388±0.565) vs.(0.228±0.582)]明显上调(t=3.421,P=0.027),而间质表型Vimentin、β-catenin的表达水平较对照组[(0.588±0.109) vs.(0.507±0.051);(0.998±0.128) vs.(0.756±0.038)]明显下调(t=4.221,P=0.013;t=6.781,P=0.002);与对照组相比,实验组细胞中转录因子Snail的表达较对照组[(0.401±0.021)vs.(0.756±0.038)]下调(t=6.774,P=0.002),Twist1的mRNA表达量相对于对照组也明显下调为(74.987±9.031)％.结论:环巴胺阻断Hh信号通路能明显逆转EC109细胞EMT过程,其机制可能与下调转录因子Snail及Twist1表达有关.
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低氧诱导乳腺癌癌相关成纤维细胞能量代谢重塑细胞模型的构建
目的:构建低氧诱导的乳腺癌癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)能量代谢重塑(energy metabolism reprogramming,EMR)细胞模型,为其后续分子机制和生物学功能研究奠定基础.方法:以成对的永生化的乳腺癌癌旁组织来源正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NF)和CAF为处理对象,根据[O2]不同,NF和CAF细胞各分为常氧处理组和低氧处理组.不同氧浓度分别处理NF和CAF细胞0、1、3、6、12h和24 h.葡萄糖消耗实验和乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平;线粒体活性检测实验评估细胞氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OP)活性;Western blot实验检测细胞能量代谢相关蛋白包括单羧酸转运子4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)、细胞色素氧化酶Ⅳ亚基(cytochrome oxidaseⅣsubunit,COXⅣ)和低氧诱导因子1α亚基(hypoxia inducible factor 1α subunit,HIF1α)的蛋白表达量.结果:低氧与CAF细胞EMR呈剂量效应和时间效应关系,1％[O2]作用24h为佳低氧处理条件.与NF常氧组相比,低氧处理(1％[O2]作用24 h)使CAF葡萄糖吸收和乳酸产生能力分别增强2倍和3.1倍,明显抑制其氧化磷酸化活性,使CAF细胞中MCT4和HIF1α蛋白表达量分别上升3.1倍和3.9倍及COXⅣ下调90％.结论:低氧(1％[O2]作用24 h)使CAF具有典型的EMR表型.本研究成功构建低氧诱导的乳腺癌CAF细胞EMR模型.
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应用siRNA敲低TPM3基因表达后对大鼠胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响
目的:探究原肌球蛋白3(tropomyosin alpha-3 chain,TPM3)在大鼠胰腺癌细胞中对其侵袭转移能力的影响并初步阐述其可能的分子机制.方法:(1)将70只大鼠随机分为手术组40只[将7,12-二甲基苯并蒽(7,12-dimethyl-1,2-benzanthracene,DMBA]植入大鼠胰腺被膜下后荷包缝合被膜),假手术组15只(只对胰腺进行荷包缝合而后关腹,不置入DMBA),阴性对照组15只(不做任何处理),建立大鼠胰腺癌模型.(2)通过组织免疫组化染色的方法对差异蛋白TPM3进行验证.(3)通过机械分离和酶阶段消化法分离胰腺癌组织的方法获取大鼠胰腺癌细胞,体外传代培养获得纯度较高的细胞后,应用siRNA敲低大鼠胰腺癌细胞中TPM3基因的表达;通过RT-PCR技术检测其沉默效果.(4)通过Transwell实验和平板克隆实验分别对细胞的侵袭、迁移能力及生长增殖能力进行观察.结果:(1)经病理验证模型组有37.83％(14/37)形成胰腺癌,证明大鼠胰腺癌模型建立成功.(2)免疫组化验证胰腺癌组织中TPM3阳性率(92.8％)明显高于正常胰腺组织(6.7％).(3)RT-PCR结果显示,转染TPM3-siRNA的细胞中TPM3的表达量(0.31±0.02)明显低于其余各组,脂质体组(0.45±0.02),阴性对照组(0.45±0.02),空白对照组(0.43±0.02)(P＜0.05),其余各组之间TPM3表达量差异无统计学意义(P＞0.05).(4)转染TPM3-siRNA的细胞其侵袭[(161.63±4.94)个]、迁移能力[(206.87±4.21)个]及生长增殖能力[(51.5±2.327)个]较对照组明显降低[分别为(39.7±1.40)个,(67.27±1.76)个,(5.900±0.767)个](P＜0.05).结论:体外化学合成的TPM3-siRNA可有效的抑制大鼠胰腺细胞TPM3的表达,TPM3表达降低后其侵袭能力、迁移能力及生长增殖能力下降.
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PI3K/AKT信号通路在SK-N-SH细胞中对增殖和分化的影响
目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路在人神经母细胞瘤SK-N-SH (human neuroblastoma,SK-N-SH)细胞增殖和分化中的作用.方法:体外培养SK-N-SH细胞,取对数生长期细胞接种于96孔培养板,将培养板中的细胞分为A组抑制剂LY294002组、B组激动剂类胰岛素生长因子-1 (insulin-like growth factors-1,IGF-1)组、C组二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组(LY294002阴性对照组)、D组ddH2O组(IGF-1阴性对照组)和空白组E、F组(培养基组),24 h后A组加入不同浓度的抑制剂LY294002,终浓度为20、40、50、60、100 μmol/L,B组换用无血清DMEM继续培养12h后加入不同浓度激动剂IGF-1,终浓度为25、50、100、150、200 ng/ml,阴性对照组分别加入与LY294002和IGF-1相同浓度的DMSO和ddH2O,空白组为100 μl/孔培养基,置于37℃,5％CO2的孵箱中培养,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法检测PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002和激动剂IGF-1对SK-N-SH细胞增殖影响,倒置相差显微镜下观察细胞形态学分化改变,荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测SK-N-SH细胞TrkA mRNA的表达与变化.结果:①MTT检测结果显示,LY294002明显抑制SK-N-SH细胞生长,LY294002组(0.39±0.17)细胞增值能力较阴性对照DMSO组(0.78±0.21)减弱,差异有统计学意义(P=0.018).IGF-1促进SK-N-SH生长,IGF-1组(0.72±0.14)细胞增值能力较阴性对照组(ddH2O组,0.43±0.08)增值能力更强,差异有统计学意义(P=0.004).②显微镜下观察LY294002组和IGF-l组细胞无明显分化形态学改变.③FQ-PCR结果显示,LY294002组(0.78±0.05)酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine kinase receptor A,TrkA)信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)的表达与阴性对照组(1.56±0.02)、空白组(1.66±0.15)比较,组间差异有统计学意义(F=81.89,P=-0.000).IGF-1组、ddH2O阴性对照组和空白组3组间的TrkA mRNA的表达水平无统计学差异(F=0.27,P=0.770).结论:PI3K/AKT信号通路可能参与了SK-N-SH增殖和分化过程,该通路关键基因有望成为临床治疗神经母细胞瘤的分子靶点.
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MUC1与肿瘤:信号通路和临床研究
MUC1是一种异源二聚体跨膜糖蛋白,由氮端亚单位(MUC1-N)和碳端亚单位(MUC1-C)组成.MUC1在多种上皮来源的肿瘤组织中异常表达,其与肿瘤的发生发展密切相关.MUC1-N可与细胞间黏附分子-1、E-选择素和半乳凝素-3相互作用并且通过MUC1-C调节信号传导,MUC 1-C可与表皮生长因子受体家族和其他酪氨酸激酶受体相互作用并且参与PI3K→AKT、MAP、NF-κB、Wnt、STAT、P53和Erα信号通路,因此MUC1与肿瘤的增殖、侵袭转移和化疗耐药密切相关.本研究阐述了MUC1-N和MUC1-C与其他分子相互作用以及在激活肿瘤相关信号通路中的作用,后回顾了MUC1-N单抗、MUC1-C小分子肽和MUC1疫苗在临床试验阶段的研究情况.
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放疗联合热疗治疗直肠癌有效性及安全性的系统评价
目的:系统评价放疗联合热疗治疗直肠癌的有效性及安全性,为临床实践与研究提供参考.方法:计算机检索Cochrane Library、PubMed、EMBASE、Web of Science和中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数字化期刊数据库(WanFang),同时辅以其他检索.收集有关热放联合疗法治疗直肠癌的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs).评价员按照研究计划书进行文献筛选和资料提取,并对纳入文献进行质量评价后,使用RevMan 5.3软件进行Meta分析.结果:共纳入8篇RCT(573例患者).Meta分析结果显示:联合组的2、3、4年生存率、完全缓解率、总有效率及症状缓解率均明显好于单独放疗组,2组差异均有统计学意义(P＜0.05),其RR值和95％CI分别为(RR=1.50,95％CI=1.10～2.06)、(RR=1.77,95％CI=1.06～2.98)、(RR=1.82,95％CI=1.04～3.17)、(RR=2.55,95％CI=1.55～4.19)、(RR=1.62,95％CI=1.34～1.96)、(RR=1.18,95％CI=1.03～1.34);热放联合组急性毒性反应的发生率低于单放组,但其差异无统计学意义(P=0.05),其RR值与95％CI为(RR=0.72,95％CI=0.51～1.00).结论:相较于单独放疗,放疗联合热疗治疗直肠癌能提高患者远期生存率和近期疗效,而且并不增加毒副反应的发生率.但受纳入研究数量和质量的限制,上述结论仍有待更多大样本高质量的研究予以验证.
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肝癌细胞对人未成熟树突状细胞基因表达谱的影响
目的:检测肝癌细胞微环境对人未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)基因表达谱的影响.方法:采用免疫磁珠阴性选择从人外周血分离CD14+单核细胞,在体外经粒-巨噬细胞采落刺激因子和白介素4诱导培养分化为imDCs,与Bel 7402肝癌细胞在Transwell中共培养48 h后,抽提imDCs的总RNA,利用人树突状细胞基因芯片检测其基因表达谱的变化.结果:与肝癌细胞共培养后,共有1 531个基因的表达发生改变(与对照组相比,变化表达倍数≥2),其中上调598个,下调933个,这些基因主要涉及信号转导、免疫应答、细胞黏附等功能.结论:肝癌细胞微环境能够影响imDCs多个基因的表达,这些基因的功能与imDCs的分化、成熟和功能有关,为进一步深入研究肝癌细胞对DCs免疫功能影响的分子机制奠定了基础.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 z1 |
