临床检验杂志
Chinese Journal of Clinical Laboratory Science 림상검험잡지
- 主管单位： 江苏省卫生厅
- 主办单位： 江苏省医学会
- 影响因子： 0.74
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-764X
- 国内刊号： 32-1204/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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2型糖尿病患者检测血清载脂蛋白A5的价值
目的 检测2型糖尿病(T2DM)患者血清载脂蛋白A5(apoA5)水平,探讨apoA5与血脂及T2DM的相关性.方法 收集T2DM 233例,健康体检者200例,留取血标本用于血脂和血清apoA5的检测.apoA5检测用双单克隆抗体夹心ELISA法.结果 T2DM组与对照组比较,血清TC、TG、LDL-C及apoB明显增高,而apoA5、HDL-C、apoA Ⅰ及apoA Ⅰ/apoB低于对照组,组间差别有统计学意义(P<0.05).对照组与T2DM组女性血清apoA5水平均高于男性(P<0.05).apoA5与Glu、Lp(a)呈负相关,r分别为:-0.40(P<0.05)、-0.24(P<0.05);与TG、TC仅存在负相关趋势,r分别为-0.14(P>0.05)、-0.07(P>0.05),但其中女性apoA5与TG呈显著负相关(r=-0.41,P<0.05).T2DM患者apoA5与HDL-C呈正相关,r为0.36(P<0.05).结论 apoA5可能是T2DM的危险因素,监测血清apoA5水平对T2DM的早期干预有积极的意义.
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血清LDH检测对急性白血病的临床意义
乳酸脱氰酶(LDH)是临床常用的酶学指标之一,对心、肝疾病及恶性肿瘤的诊断有一定意义.为探讨血清LDH与急性白血病(AL)的相关性及临床意义,我们观察了25例急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者和49例急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)患者化疗前、后血清LDH的活性.
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1,5-脱水葡萄糖醇测定在糖耐量减低及2型糖尿病患者中的应用价值
目的 评价1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)在糖耐量减低及2型糖尿病患者中的应用价值及临床意义.方法 分别测定30例糖耐量正常(NGT)、100例糖耐量减低(IGT)及50例2型糖尿病(T2DM)的空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2 hPBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)及1,5-AG.结果 血清1,5-AG健康人对照组为26.76±5.28 mg/L;IGT组为21.43±2.52mg/L;T2DM组为10.69±2.72 mg/L.T2DM组1,5-AG水平显著低于健康人对照和IGT组(P<0.01),IGT组1,5-AG低于健康人对照(P<0.05).血清1,5-AG与FBG、2 h PBG、HbA1c均呈显著负相关.1,5-AG、FBG和HbA1c分别以14 mg/L、6.2mmol/L和6.4%作为诊断参考值,其敏感性分别为90.0%、88.0%、82.0%;特异性分别为93.3%、90.0%、76.7%.结论 血清1,5-AG含量测定可作为糖尿病诊断、筛查和血糖控制监测的指标.
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SLE患者外周血细胞CD146的表达及意义
CD146是一种高度糖基化的膜糖蛋白,分子量113 000,由胞外区、跨膜区以及胞浆尾段组成.CD146在内皮细胞及白细胞的表达与免疫炎症的关系为密切[1].目前对CD146配体的研究仍未取得突破,其病理和生理意义的研究也受到限制.我们对SLE患者外周血细胞CD146的表达进行检测,并探讨其与疾病的关系.
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麻疹患者血小板参数变化的临床意义
近年来,由于人口流动增加,部分儿童麻疹疫苗漏种或免疫失败,加之初次免疫后随着年龄增长而免疫力逐渐降低等原因,致使麻疹散发病例时有发生,且发病年龄呈小年龄化和大年龄化的双向发展,部分患者的血小板参数也出现新的变化.本文就我院2007年收治的麻疹患者血小板参数的变化情况进行分析,探讨其变化的原因及临床意义.
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肝功能正常的慢性乙型肝炎患者肝组织病变分析
目的 观察肝功能正常的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝组织病理改变状况,肝组织炎症活动度(G)分级及纤维化程度(S)分期及其与HBV DNA、HBeAg的关系,研究其临床意义.方法 对117例慢性HBV感染者进行乙肝血清学标志物、肝功能、血清HBV DNA检测,肝组织行病理检查.结果 117例慢性HBV感染者炎症活动度G_2以上者占39.32%,纤维化分期S_0者3例,占2.56%,其余均有不同程度纤维化;慢性HBV感染者肝组织的炎症活动度及纤维化状况与HBV-DNA定量水平无关(P>0.05);HBeAg阴性者的炎症及纤维化程度较HBeAg阳性者高.结论 慢性HBV感染者虽血生化或B超表现正常或基本正常,但大部分存在一定程度的肝组织炎症活动度及一定程度的纤维化,病变谱广泛,不等同于健康者.
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广州地区2型糖尿病肥胖人群抵抗素、胰岛素抵抗的水平
抵抗素(resistin)具有升高血糖、对抗胰岛素的作用.我们测定广州地区2型糖尿病(T2DM)的肥胖人群和体质指数(BMI)正常者的抵抗素、胰岛素抵抗和咀脂的水平,探讨BMI、体脂分布百分比(BF,%)和胰岛素抵抗指数(IRI)与抵抗素的关系,现总结报道如下.
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肿瘤化疗患者中心静脉置管感染病原菌耐药性调查
目的 监测静脉置管细菌的临床分布和耐药现状,为临床医生正确选用抗菌药物提供参考依据.方法 细菌培养与鉴定按<全国临床检验操作规程>进行,药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)的检测、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测和D试验按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定进行.结果 446例患者共检出17株细菌,其中葡萄球菌12株[金黄色葡萄球菌4株、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)3株、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRC-NS)5株],革兰阴性杆菌5株.检出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌均为ESBLs菌;MRSA对克林霉素、红霉素、环丙沙星等常用抗菌药物的耐药率均明显高于MSSA;亚胺培南对革兰阴性杆菌保持了较高的抗菌活性.结论 应重视中心静脉置管感染的检测并及时有效地加以控制.
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238株肠致病性大肠埃希菌的血清型与耐药性分析
为了解本地区小儿感染肠致病性大肠埃希菌(EPEC)的发病情况,我们对我院近期分离到的238株EPEC进行了血清学分型和耐药性分析,现报告如下.1材料与方法1.1标本来源收集2007年10月～2009年4月本院收治的6岁以内的腹泻患儿2 118例的粪便,分离到EPEC 238株(同一患儿的重复分离株按1株计算).
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儿童复发性慢性扁桃体炎细菌学特点分析
我们对儿童慢性扁桃体炎患者咽拭子和切除的扁桃体组织进行细菌学培养,希望能为临床诊疗提供帮助.1 对象与方法1.1标本来源浙江大学医学院附属第二医院和附属儿童医院的耳鼻喉科手术摘除扁桃体的复发性慢性扁桃体炎患儿为复发组(急性发病≥3次/年,病程≥3年),共44例,其中男28例,女16例(年龄5～18岁,平均12岁),分别于诊断复发性慢性扁桃体炎后取咽拭子标本,行扁桃体切除术后取扁桃体组织进行细菌培养.
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葡萄球菌与β-溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的分析
本研究对我院2007～2008年临床分离到的葡萄球菌属和β-溶血链球菌中红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的菌株,用双纸片琼脂扩散法做D试验,了解诱导型克林霉素耐药在葡萄球菌和β-溶血链球菌中的分布情况,以指导临床医生正确合理使用抗生素.
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198株鲍曼不动杆菌的临床分布特点和耐药性分析
目的 调查鲍曼不动杆菌的临床分布和耐药状况.方法 采集临床标本,进行鲍曼不动杆菌分离培养、鉴定,以CLSI推荐的纸片扩散法进行药敏试验.结果 鲍曼不动杆菌86.9%分离自痰标本,39.9%来自SICU.菌株耐药性较强,对亚胺培南耐药9株,占4.5%,泛耐药株5株,占2.5%.结论 鲍曼不动杆菌主要侵犯SICU患者、慢性呼吸系统疾病患者、免疫力低下者,多引发呼吸道、泌尿系感染及术后感染,对抗菌药物的敏感性有一定规律.
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ELISA定量检测乙型脑炎病毒抗原
目的 建立双抗体夹心ELISA定量检测乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)抗原方法,用于乙脑疫苗工序产品抗原含量检测.方法 以抗JEV多克隆抗体作为包被物,辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色,建立双抗体夹心ELISA法.根据已知浓度抗原,确定定量标准曲线,检测样品中JEV抗原含量;并对该方法各项指标进行验证.结果 该方法佳线性范围为12.5～200 U/ml;r=0.9989;定量限度为12.5 u/ml;回收率为85.0%～103.3%;变异系数为4.3%～5.5%;与甲肝疫苗原液、流感疽苗原液、Vero细胞裂解液蛋白、小牛血清、人血清清蛋白均无交叉反应.结论 该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于乙脑疫苗各工序产品的抗原定量检测.
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BMP7基因检测在结直肠癌和胃癌诊断中的意义
目的 建立检测骨形态发生蛋白7(BMP7)基因的实时荧光定量RT-PCR法,探讨BMP7对结直肠癌、胃癌的诊断意义.方法 构建BMP7基因的标准质粒,建立RT-PCR,real-time RT-PCR等方法检测并比较BMP7基因在2l例胃癌组织、19例结直肠癌组织与对应癌旁组织中的表达水平,用免疫组织化学验证BMP7的蛋白水平差异.结果 建立的BMP7检测法稳定和准确;19例结直肠癌中16例(84.2%)癌组织表达的BMP7基因显著高于时应的癌旁组织(P<0.05).21例胃癌组织中11例(52.4%)癌组织表达高于对应癌旁组织,但无显著差异(P>0.05).免疫组织化学在蛋白水平上证实了肿瘤组织和癌旁组织中BMP7的表达水平差异.结论 成功建立了检测BMP7的实时荧光定量PCR方法,BMP7基因可作为结直肠癌检测的新靶点.
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低密度脂蛋白胆固醇测定匀相法试剂评价
目的 评价国内市场7种LDL-C匀相法试剂的分析质量.方法 用超速离心-HPLC法作为比对方法,7种LDL-C试剂与Hitachi 7170A组合构成的7种分析系统为待评常规方法.用比对方法和常规方法同时测定40份新鲜人血清,考察常规方法的精密度、偏差和总误差等.结果 7种匀相法试剂均具有良好的精密度(CV<4%).与超速离心-HPLC法相比,旁法B、D、E和F测定的平均偏差和医学决定水平上的偏差均<4%,符合美国国家胆固醇教育计划(NCEP)的要求.方法 C和G存在明显的特异性问题和校准偏差.所有7种方法测定的总误差均未能达到NCEP的要求,方法A、B、D和E测定的总误差达到美国临床实验室改进修正案(CLIA'88)的要求.结论 目前有些LDL-C匀相法试剂的准确性和特异性尚不能满足要求,临床实验室应重视LDL-C试剂的选择和评价.
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用CLSI和EUCAST两种标准判定产ESBLs菌株药敏结果的差异
目的 分析美国CLSI标准和欧洲EUCAST标准判读产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)对4种常用广谱头孢菌素药敏结果的差异.方法 收集按CLSI标准因产ESBLs而将广谱头孢菌素药敏结果由敏感或中介改为耐药的E.coli和K.pneumoniae,用琼脂稀释法检测低抑菌浓度(MIC),用CLSI标准和EUCAST标准进行敏感性界定.同时用PCR及Hodge-test检测4种ESBLs基因和高活性β-内酰胺酶.结果 55株菌中53株扩增出介导ESBLB的相关基因,Hodge-test显示55株菌均产高活性β-内酰胺酶;用EUCAST标准界定,55株菌株对头孢三嗪和头孢噻肟均耐药,对头孢他啶和头孢吡肟敏感的菌株分别有5和7株.结论 在目前的耐药现状中,用CLSI规则和用EUCAST折点判读E.coli和K.pneumoniae对4种常用第三代和第四代头孢菌素敏感性,对临床治疗结果进行预测的差异主要出现在产ESBLs且头孢他啶和头孢吡肟MICs值≤1μg/ml的菌株中.
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检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用
目的 研制快速检测囊虫循环抗原(CA)的胶体金试纸法.方法 以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条.结果 以1A5和1B6配对的试条对人体囊虫CA、囊虫CA标准抗原以及63份囊虫病患者血清、9份脑囊虫痛患者脑脊液的检测结果均为阳性,时弓形虫病感染者、包虫病患者及非疫区献血员血清的检测结果均为阴性;与酶联免疫吸附试验(ELISA)的平行对比试验表明,试条检测敏感性与ELISA的敏感符合率为97.03%.结论 研制的免疫胶体金诊断试条可用于人体囊虫病CA的特异性诊断和流行病学调查.
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肝癌组织中HLA Ⅰ类抗原及相关分子的表达
目的 研究在抗原提呈过程中HLA Ⅰ类抗原各相关分子的表达水平及临床意义.方法 利用免疫组织化学法(ABC法)对165例肝癌的石蜡组织标本中HLA Ⅰ类分子的重链、轻链及抗原提呈相关分子calnexin、LMP2等的表达情况进行研究,并分析各表达分子的相关性.结果 HLA Ⅰ类分子(A和B/C位点)的表达为膜型,β_2M的表达为膜浆型,以膜为主,而LMP2和calnexin的表达为浆型.肝癌组织除LMP2分子外,HLA Ⅰ类各分子均有明显的上调(上调率≥40%),其中以HLAⅠ类分子A位点上调明显(54%).肝癌组织中HLA Ⅰ类各分子之闻表达趋势一致.结论 肝癌表面HLA Ⅰ类分子表达增加与抗原提呈过程中多分子的表达增加和协同作用有关,而并非由其中某种单一分子的改变来决定.
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产AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型研究
目的 了解安徽地区产AmpC酶肺炎克雷伯菌的基因型特征及耐药性.方法 对180株肺炎克雷伯菌进行头孢西丁纸片法初筛,三维实验筛选高产AmpC酶茼,PCR扩增、测序和BLAST比对分析以确定AmpC基因型,琼脂稀释法检测耐药性.结果 产AmpC酶菌株有21株(11.67%),其中DHA型17株,EBC型4株.3株EBC型为新基因(gene bank登录号为FJ237366,FJ237367,FJ237368);药敏显示产酶株除对亚胺培南与美罗培南敏感外,对其他抗菌药物均有不同程度的耐药.结论 安徽地区产AmpC酶的肺炎克雷伯菌以DHA型为主,同时存在EBC型突变株.高产AmpC酶菌的感染推荐使用碳青霉烯类抗生素治疗.
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抗dsDNA-NcX抗体测定对SLE的诊断意义
目的 评价抗dsDNA-NcX抗体对SLE诊断的敏感性和特异性,并了解其与SLE活动性的关系.方法 分别检测SLE患者、疾病对照组(包括干燥综合征、类风湿关节炎和系统性硬化症)和健康人对照组血清抗dsDNA-NcX抗体,并与抗dsDNA抗体和抗核小体抗体比较.结果 抗dsDNA-NcX抗体对SLE的敏感性(69.2%,63/91)显著高于抗dsDNA抗体(52.7%,48/91),P<0.05,与抗核小体抗体(60.4%,55/91)相当,P>0.05.三种抗体特异性分别为95.8%(114/119)、96.6%(115/119)和98.3%(117/119),P>0.05.抗dsDNA-NcX抗体滴度与SLE患者的SLEDAI评分呈正相关(r=0.260,P<0.05).结论 抗dsDNA-NcX抗体对SLE诊断的敏感性高,特异性强,与SLE活动性相关,有助于提高SLE的诊断率.
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组氨酸三聚体蛋白在2型猪链球菌的定位
目的 研究组氨酸三聚体蛋白(histidine triad protein,Htp)在2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,S.suis 2)05ZYH33中的定位,以及sortase A(srtA)基因缺失对该蛋白表达的影响.方法 通过生物软件分析Htp氨基酸序列的分子特征;以纯化的Htp重组蛋白为免疫原,免疫新西兰兔,获得兔抗Htp抗血清;利用western blotting和ELISA检测该抗体的特异性和效价;以抗Htp抗体为工具通过流式细胞术验证Htp在菌体表面的定位,并比较05zYH33和srtA基因敲除突变株△srtA菌体表面Htp的表达量.结果 生物软件预测发现Htp存在信号肽和跨膜序列,具备表面蛋白的特征;流式细胞分析发现Htp定位于s.suis2表面;△srtA菌体表面Htp的量明显少于野生型菌株.结论 本研究明确了Htp在S.sui2菌体表面的定位并发现srtA基因敲除后细菌表面的Htp有所减少,为进一步研究Htp在猪链球菌致病过程中发挥的功能及其调控机制奠定了基础.
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一中国遗传性血色病家系的HFE基因突变分析
目的 以一个有2例遗传性血色病(HH)患者的中国家系为研究对象,初步探讨HH的发病原因.方法 记录患者临床资料,采集患者家系成员的外周血,提取全血基因组DNA,针对已报道的血色病基因(HFE)C282Y,H63D和S65C 3个突变住点部位设计引物、PCR扩增并测序以筛检突变.结果 14位家系成员中仅1位无症状的成员有H63D杂合突变,占7.14%,其他13位成员(包括已故的先证者和重病患者)均束发现C282Y,H63D和S65C突变.结论 C282Y,H63D和S65C基因突变不是该家系的患病原因.HH的发病机制有待进一步研究.
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PinX1基因真核表达载体的构建及其在Hek293细胞中的表达
目的 确定PinX1在转染该基因的真核细胞Hek293内的表达定位.方法 采用RT-PCR技术从HepG2中扩增Pinx1,克隆入真核表达栽体pcDNA3-vsv,重组质粒转染Hek293细胞,免疫细胞化学法检测蛋白质的表达.结果 从HepG2细胞中获得Pinx1基因,成功构建真核表达载体pcDNA3-Pinx1-vsv,将其转染Hek293细胞后,免疫细胞化学法检测结果表明PinX1在细胞核内表达.结论 成功获得PinX1基因,转染后在Hek293细胞核内表达,为探索Pinx1在端粒、端粒酶调控中的作用机制奠定基础.
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急性心肌梗死患者血清蛋白质质谱分析的价值
目的 分析急性心肌梗死(AMI)患者血清蛋白质质谱,发现AMI的标志蛋白.方法 以阴离子WCX磁珠纯化试剂盒富集20例AMI惠者的血清标本及20例健康人对照血清标本的蛋白质,用解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测血清蛋白质质谱,以Bruker ClinPrOtools软件统计分析.结果 AMI患者与健康人血清蛋白质指纹图谱比较,在Mr 1 000～12 000区段,AMI患者血清Mr为1 771、1 683、1 858、1 869、2 203、2 947、3 055、3 235、5 902的9个蛋白峰与健康人有显著差异.其中1 771、1 683、1 869、220为明显高表达,1 858、2 947、3 055、3 235、5 902为明显低表达.结论 蛋白质质谱分析技术对AMI的诊断有较好的指示作用.
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新化学法检测血清K~+,Na~+的评价
目的 对新化学法测定血清钾、钠进行对比评价.方法 在Olympus AU2700全自动生化分析仪(带ISE模块)上,用新化学法钾、钠检测试剂盒进行重复性试验、线性试验、回收试验和抗干扰试验,同时与酶法、电极法对30份血清样本进行比较试验.结果 新化学法测定血清钾、钠的CV分别为0.90%、0.47%;线性范围分别为:K试剂在1.4～7.0 mmol/L范围内的线性相关系数r=0.9996:Na试剂在90～170 mmol/L范围内的线性相关系数r=0.9996;回收率分别为:99.2%、100.5%.在胆红素600μmol/L、TG 20 mmoL/L浓度范围内无干扰.3种方法对30份血清样本的测定结果无显著差异(P<0.05),均具有良好线性相关性,新化学法与酶法的回归方程(n=30),钾为Y=0.972X + 0.421,相关系数r=0.985,钠为Y=0.961X - 0.019,相关系数r=0.987;新化学法与电极法的回归方程(n=30),钾为Y=0.990X + 0.110,相关系数r=0.991,钠为Y=0.989X +0.9,相关系数r=0.997.结论 新化学法测定血清钾、钠有较好的重复性和准确度,线性良好,抗干扰能力较强,能满足临床使用要求.
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不同稀释方式对生化测定结果的影响
日常工作中,遇到超过检测线性范围的标本时,习惯用生理盐水稀释标本后再行测定.我们在工作中发现,许多项目因此会使测定结果偏高.仅以载脂蛋白和糖化血红蛋白为例,报道不同稀释方式测定结果的差别.
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抗HCV抗体双抗原夹心ELISA法试剂的应用
目前常用的第三代抗HCV抗体试剂为间接ELISA试剂,存在一定的假阳性,且检测抗HCV抗体的"窗口期"较长[1].抗HCV抗体双抗原夹心法ELISA试剂是检测抗HCV总抗体,缩短了"窗口期".因对抗体进行两次特异性反应,可降低间接EUSA法引起的假阳性[2].
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微波法烘烤阴道分泌物涂片镜检的评价
在阴道分泌物涂片检查时,我们采用微波炉成批烘烤的方法替代传统的单片酒精灯烘烤,缩短了操作时间.1 材料与方法1.1仪器美的公司PJ21C-AN型微波炉700W.1.2试剂自配革兰染液、美蓝染液、增菌肉汤平皿.
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一种新的尿沉渣活体染色方法
尿沉渣染色检查目前常用S染液及S-M染液[1],染色过程中常出现非特异性沉淀,干扰了部分尿有形成分计数,使结果误差较大,同时尿红细胞染色不理想[2].我们选用多种染料与尿沉渣染色,从中选出吡哕红、美蓝、甲基绿组合成新染液,该染液染色时间短,无非特异性沉淀出现,对尿中各有形成分染色效果好,现报告如下.
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血液分析仪与手工法嗜酸性粒细胞分类结果的比较
国际血液学标准化委员会(ICSH)规定嗜酸性粒细胞计数以手工法为参比方法,但操作较费时费力,且易受主观因素影响.本研究同时用全自动血液分析仪及手工法对嗜酸性粒细胞进行检测,为临床实验室选用检测方法与仪器提供依据.
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如何要求患者空腹抽血
当患者需要作肝功能、血糖和血脂等检查时,医生总会嘱咐其在第二天清晨要空腹来抽血.许多患者没有领会"空腹"的含义,误认为吃饭会影响检测结果,以致在抽血的前一天晚上就不吃任何东西.
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A_2B型伴有抗A_1抗体误定为B型1例
由于ABO亚型或其他原因使得A、B抗原减弱或缺失,而造成血型鉴定错误的例子时有发生,给临床输血带来很大隐患.我们对1例A_2B型误定为B型的病例做如下分析.
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高密度脂蛋白亚类的检测方法
高密度脂蛋白(high density iipoprotein,HDL,)是一种由脂质和蛋白构成的在形状、密度、颗粒大小、电荷和理化特性等方面具有较大异质性的一类脂蛋白.HDL具有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)作用已无争议[1].
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2个血液检测系统间方法比对及偏差评估
目的 通过对同一实验室不同血液检测系统进行方法比对和预期偏差评估,探讨不同血液检测系统间同种项目测定结果的可比性.方法 按照EP9-A文件的要求,以Sysmex XT-1800i为比较方法,Sysmex KX-21N为实验方法,用患者新鲜抗凝全血分别在2台仪器上检测白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、红细胞压积,计算相关系数和直线回归方程,对两个系统之间的预期偏差进行评估,以CLIA'88对室间质评的总允许误差为判断依据,判断其临床可接受性.结果 WBC、RBC、Hb、PLT和HCT检测结果的绝对偏差和相对偏差均在1/3 CLIA'88范围内.结论 方法学比对和偏差评估结果表明,2台仪器结果具有可比性.
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4台血液分析仪结果比对的实用方法
目的 通过2种比对方法在4台血液分析仪比对试验中的应用和偏差评估,及时发现血液分析仪间的结果偏差,俸证血细胞分析报告准确一致.方法 每日或每周一挑选经校准、有溯源性和完善室内质控的参比血液分析仪检测的一定数量各参数高、中、低值的新鲜抗凝全血,在其他血液分析仪上检测,用Excel计算与比对参考值的偏倚百分比,绘制折线图,作线性回归分析,评估检测数据偏倚是否在可接受范围.结果 每日比对、每周比对两种方法满足EP9-A2的比对条件,可用于血液分析仪比对试验.结论 两种比对方法简便实用,适用多台血液分析仪间的比对,有利于及时发现仪器间的结果偏差.
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分子诊断学的一些研究进展
分子诊断学是以分子生物学理论和技术为基础,利用分子生物学技术研究人体生物大分子的存在、结构及其表达调控,从而为疾病的预测、诊断、治疗和预防提供信息和决策依据.
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用SELDI-TOF-MS技术筛查肺腺癌血清蛋白质标志物
目的 筛查并分析肺腺癌和健康人对照者血清差异蛋白质,寻找诊断肺腺癌的血清肿瘤标志物.方法 采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,使用强阴离子芯片(SAX-2)分析31对肺腺癌和健康人的血清蛋白质表达谱,结合决策树软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～20 000范围内,与健康对照者相比,在肺腺癌血清中共筛选到102个差异峰,选择差异显著质荷比(m/z)分别为14022.9和3 735.99的2个蛋白峰建立决策树模型.刺用该模型对肺腺癌进行盲测,结果诊断敏感性和特异性均为100%.结论 SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法,能筛选出敏感性和特异性较好的血清差异蛋白,为肺腺癌早期诊断提供了新的实验方法.
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适配体芯片技术及其应用
适配体(aptamers)是通过指数级富集配体的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选而获得的某种单链DNA或RNA分子[1],这些分子能够折叠成特定的三维空间结构与其所针对的各种靶物质特异地结合,而不是依赖特异性的碱基排列.适配体芯片又称适配体微阵列,是继基因芯片、蛋白质芯片之后发展起来的一种新芯片.
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用SELEX技术筛选葡萄球菌肠毒素B特异性适配体
目的 通过指数级富集配体的系统进化技术(SELEX)筛选能与葡萄球菌肠毒素B(SEB)特异、高素和力结合的单链DNA(ssDNA)适配体(aptamer).方法 体外构建一个长度为96个碱基的随机ssDNA文库,与靶物质SEB混合,以磁殊作为固相介质,利用热洗脱方法分离与靶标结合的核苷酸片段,通过PCR反复扩增、富集数个循环.利用荧光素标记适配体,测定筛选过程中各轮结合率;通过地高辛标记适配体,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体进行酶促显色反应,检测适配体的特异性.结果 经过13轮筛选,ssDNA文库与SEB的结合百分率从1.1%提高到39.8%.制备的适配体针对SEB的特异性强,与葡萄球菌A蛋白(SPA)及牛血清清蛋白(BSA)无非特异性结合.结论 成功利用SELEX技术筛选获得了特异结合SEB的高亲和力的ssDNA适配体,为金黄色葡萄球菌感染的诊断与治疗奠定了基础.
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用β-珠蛋白基因监测泌尿生殖道标本PCR检测质量
目的 探讨β-珠蛋白基因可否作为监测泌尿生殖道标本PCR检测质量的一个指标.方法 分别采集晨尿和宫颈拭子、尿道拭子标本,提取核酸,应用实时PCR扩增沙眼衣原体(CT)特异基因片段,同时扩增β-珠蛋白基因,对于后者扩增阴性标本,进行1:10稀释后重新检测上述两种基因.结果 晨尿、宫颈拭子和尿道拭子标本中β-珠蛋白基因的检出率分别为95.6%(255/264),91.7%(413/450)和77.8%(172/221),前两者与后者的检出率有显著差别(P<0.05),CT-DNA在3种标本中的检出率无显著差别,但以尿道拭子标本的检出率低.β-殊蛋白基因阴性标本经1:10稀释后有53.7%(51/95)可重新检出;CT-DNA重新检出4例.结论 泌尿生殖道标本中存在抑制PCR反应的物质,通过扩增β-珠蛋白基因监测标本质量,有助于减少假阴性结果.
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蛋白质芯片技术对脐血浆生物活性成分的分析
目的 通过高通量筛选、检测脐血中细胞因子的种类和含量,全面了解脐血浆生物活性成分及表达水平.方法 取10位健康足月分娩产妇脐静脉血2 ml和健康成年女性志愿者捐献的外周静脉血2 ml,应用抗体芯片RayBio~((R)) Biotin Label-besed Human Antibody Array Ⅰ一次性检测507种细胞因子表达水平,两样本中细胞因子比值大于或小于两倍以上者为有显著差异.结果 在蛋白质芯片检测所包括的507种细胞因子中,脐血浆中有94种成分显著高于对照组,28种成分显著低于对照组.结论 抗体芯片技术能高通量、平行性检测脐血浆生物活性成分及表达水平,为深入研究脐血细胞因子积累了数据.
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单细胞巢式聚合酶链反应诊断β地中海贫血
目的 探讨在单淋巴细胞水平准确诊断β地中海贫血(β地贫)的方法,为开展β地贫的植入前诊断(PGD)打下基础.方法 获取正常人及β地贫基因携带者的单个淋巴细胞,采用多重巢式聚合酶链反应(PCR)反向膜杂交(RDB)技术进行β地贫基因检测.结果 单个淋巴细胞的PCR扩增效率为90.4%,等位基因脱扣(ADO)发生率为8.5%.结论 用单细胞多重巢式PCR+RDB诊断β地贫是稳定可靠的,可望用于β地贫的临床植入前诊断.
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黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用
目的 建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化.方法 设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测.结果 建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化.结论 成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测.
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非对称PCR-FP技术同步检测HSV-1/-2、CMV和EBV
目的 应用非对称PCR-荧光偏振(FP)技术建立一种同步检测全血中4种主要疱疹病毒(单纯疱疹病毒1/2型,巨细胞病毒、EB病毒)的新方法.方法 以人疱疹病毒属通用引物行非对称PCR,扩增从179例样本中抽提的DNA.PCR扩增产物与特异性单纯疱疹病毒1/2型(HSV-1/2)、巨细胞病毒(CMV)和EB病毒(EBV)寡核苷酸探针混合物温育杂交,荧光偏振检测技术检测杂交液荧光偏振值,据荧光偏振值判断病毒感染类型,并以DNA序列测定结果为参照.结果 与DNA序列测定的阳性检测符合率为100%,但DNA序列测定检测均未检出多重混合感染.非对称PCR-FP方法对HSV-1/-2检测的灵敏度达到1.0×10~3拷贝/ml,时EBV和cMV检测的灵敏度达到2.0×10~3拷贝/ml.结论 本法对于4种主要疱疹病毒感染的筛查及预防、预后判断具重要价值.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 05 |
