乳腺原发性伴印戒细胞分化的癌临床病理分析

目的 乳腺原发性伴印戒细胞分化的癌是一类罕见乳腺癌,具有典型的形态特征且侵袭性强,预后差,需与黏液癌等进行鉴别.因此,本研究探讨乳腺原发性伴印戒细胞分化的癌的临床病理特征、免疫表型特点和鉴别诊断.方法 收集山东大学附属省立医院2010-05-17-2017-07-13诊治的乳腺原发性伴印戒细胞分化的癌8例,应用HE和免疫组化染色对其进行病理形态学观察和免疫表型分析.结果 8例患者均因乳房肿块就诊,其中3例为单纯型印戒细胞癌,1例为印戒细胞性原位癌,4例合并其他类型浸润性乳腺癌.镜下均可见显著的胞质内黏液,将细胞核推挤于一侧,呈印戒细胞状.免疫组化结果显示,8例CK7和GCDFP-15均呈强阳性表达;CK20、CDX2和HepPar-1均阴性;ER、PR和HER2表达无明显差异;MUC-1均阳性,并表现为腔缘加细胞质阳性和细胞质着色伴细胞膜加强着色2种模式,其中后者2例中有1例术后发生骨转移及肝转移去世,其余生存7例中除1例印戒细胞型原位癌复发外均无进展.结论 肿瘤细胞具有印戒细胞样特点是诊断乳腺原发性伴印戒细胞分化的癌的主要依据,其免疫组化特点有助于其与转移性印戒细胞癌鉴别,此种类型乳腺癌可以发生复发和远处转移,需要引起临床及病理医师的注意.

磁共振扩散成像在鼻咽癌靶区勾画临床应用价值

目的 鼻咽癌发生位置深在,解剖结构复杂,毗邻颅底,故鼻咽癌颅底斜坡侵犯发生率较高.本研究探讨磁共振弥散成像(diffusion weighted imaging,DWI))表观扩散系数值(apparent diffusion coefficient,ADC)值在鼻咽癌靶区勾画,尤其在斜坡侵犯识别中的临床价值.方法 回顾性分析2013-01-01-2016-01-01贵州省人民医院收治的76例鼻咽癌初诊患者临床资料.所有病例分别在放疗前、放疗结束后1和4个月行常规MRI平扫和增强及轴位DWI扫描,并进行对比分析.根据治疗前增强MRI、DWI及定位CT勾画靶区和正常器官.观察治疗前后鼻咽腔内病灶、肿瘤侵犯斜坡在弥散加权图像上的表现,并测量其表观弥散系数ADC值.结果 76例患者中斜坡侵犯患者40例,斜坡侵犯患者在放化疗前磁共振显示T1WI呈等低信号,T2WI呈等高信号,增强后可见强化;DWI呈高信号,ADC图呈低信号;受侵斜坡ADC值为(0.618±0.269)×10-3 mm2/s,正常斜坡ADC值为(0.197±0.197)×10-3 mm2/s.放化疗前,肿瘤侵犯腭帆张肌和(或)腭帆提肌ADC值为(0.516±0.183)×10-3 mm2/s,受侵犯斜坡ADC值为(0.618±0.269)×10-3 mm2/s;放化疗后1个月,ADC值分别为(1.235±0.356)×10-3 mm2/s和(1.237±0.298)×10-3 mm2/s;放化疗后4个月,ADC值分别为(1.371±0.347)×10-3 mm2/s和(1.218±0.296)×10-3 mm2/s.鼻咽腔内病灶及受侵斜坡ADC值在放化疗前与放化疗后1和4个月比较,差异均有统计学意义,P<0.05.结论 DWI的ADC值可在鼻咽癌靶区勾画中斜坡侵犯识别提供帮助,对鼻咽癌治疗方案的制定、疗效评价均有一定参考价值.

榄香烯联合奈达铂治疗恶性胸腹水临床观察

目的 恶性胸腹水是肿瘤晚期出现的临床并发症,其压迫胸腹部脏器产生胸闷、呼吸困难和疼痛等症状,影响患者的生活质量.本研究以胸腹腔灌注药物的方式,进行榄香烯联合奈达铂对恶性胸腹水的疗效比较.方法 选取2015-09-01-2016-09-30唐山市人民医院治疗的96例恶性胸腹水患者,根据治疗方法分为对照组48例和观察组48例,对照组单纯给予奈达铂治疗,观察组给予榄香烯联合奈达铂治疗,观察两组患者治疗后的疗效、免疫功能及不良反应状况,分析榄香烯联合奈达铂治疗恶性胸腹水的临床效果.结果治疗后观察组胸腹水缓解率为81.25％,优于对照组的62.5％,差异有统计学意义,P=0.04.治疗前后两组患者CD4以及CD4/CD8明显升高(P<0.001),CD8差异无统计学意义,P=0.769.治疗后两组患者均有发热、胸痛、胃肠道反应、血白细胞计数下降等药物不良反应,发热(P=0.69)、胸痛(P=0.24)及胃肠道反应(P=0.63)不良反应的发生率差异均无统计学意义.血白细胞下降不良反应中,对照组出现的人数比观察组明显偏高,差异有统计学意义,P<0.05.结论榄香烯联合奈达铂治疗恶性胸腹水能够有效提高治疗效果,提高患者免疫力并减少不良反应的发生,值得临床推广使用.

中晚期原发性肝癌TACE介入微创治疗疗效和对肝功能影响观察

目的 目前,晚期原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)患者临床疗效还存在明显局限性,仍需加强对该病更有效治疗方式的研究.本研究旨在探讨肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)介入微创治疗晚期PLC的效果及对患者肝功能的影响.方法 选择2016-04-01-2017-04-01安阳市肿瘤医院治疗的中晚期PLC患者44例作为研究对象,给予TACE介入微创治疗,分析治疗效果.结果 患者接受1、2次治疗后,完全缓解率分别为31.82％、59.09％;两次治疗不良反应发生率分别为11.35％、15.91％.治疗后患者血清白蛋白(ALB)、总胆汁酸(TBA)、总蛋白(TP)和碱性磷酸酶(ALP)水平均降低,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)水平均升高,与治疗前比较差异有统计学意义,P<0.05;患者治疗1年后总生存率为81.81％,患者躯体、角色、情绪、认知和社会等功能以及总生活质量均比治疗前改善,P<0.05.结论 给予PLC中晚期患者TACE介入微创治疗可取得理想疗效,但会对患者肝功能产生一定影响,术后须加强保肝治疗.

IMRT计划剂量验证924例结果分析

目的 调强放射治疗(intensity-modulated radiation therapy,IMRT)在临床应用中起到越来越重要的作用,对每例患者的剂量验证也尤为重要.本研究回顾924例实际治疗患者的IMRT计划剂量验证结果,分析Gamma通过率与病变部位、所有射野MU(Monitor Unit)数之和,采集剂量大面积之间的关系.方法 分析山东省肿瘤医院Varian Tril-ogy加速器在2014-01-01-2016-03-31实际执行的924例患者调强计划,所有实际治疗计划及验证计划均使用Varian E-clipse计划系统完成,将实际执行的计划移植到水模体中,导出计划通量并与Mapcheck(Sun Nuclear公司)实际测量通量进行比较,使用3％/3 mm标准进行Gamma分析.结果 924例患者计划分为脑、头颈、胸部、腹部、盆腔和乳腺6个部位,其中22例一次未通过,其余Gamma通过率平均在98％以上,其中治疗部位与Gamma通过率有相关性,P=0.017;总MU数与通过率有相关性(P<0.001),且为负相关;剂量采集大面积与通过率具有相关性,P<0.001;100-CL(confidence limit)值为95.19,Varian Trilogy加速器IMRT QA通过率稳定.结论 通过率与治疗部位、总MU数、剂量采集大面积具有相关性.利用Mapcheck进行患者计划剂量验证时,Gamma通过率很高,只有少数结果较低的需要分析原因.

三阴性乳腺癌组织PD-L1和HIF-1α表达临床意义

目的 研究三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中程序性死亡配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)和缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白的表达及其与临床病理参数、生存预后的相关性.探讨二者共表达在TNBC中的预后价值.方法 选取2010-01-01-2013-12-31中国人民解放军福州总医院术后病理确诊为TNBC的女性患者103例,采用免疫组化法检测乳腺癌组织中PD-L1和HIF-1α表达,分析二者表达与临床病理参数及预后的相关性.结果 TNBC组织中PD-L1和HIF-1α 的阳性表达率分别为30.1％(31/103)和54.4％(56/103),二者表达呈正相关,r=0.559,P<0.001.PD-L1表达与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期显著相关,P<0.05;HIF-1α表达与年龄、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤分期显著相关,P<0.05.Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank分析显示,肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移情况及肿瘤PD-L1、HIF-1α表达可影响TNBC患者的3年无病生存期(disease free survival,DFS),P<0.05;多因素分析显示,PD-L1表达与TNM分期可能为TNBC患者的独立预后危险因素,P<0.05.TNBC组织中PD-L1和HIF-1α不同的表达组合可影响患者的生存预后,共表达组3年DFS率显著低于PD-L1/HIF-1α单独表达阳性或PD-L1和HIF-1α均为阴性组,P<0.001.结论 PD-L1 和 HIF-1α在 TNBC 组织中共同高表达提示预后不良,可能为 TNBC 治疗提供新选择.

腋下透明细胞汗腺癌一例报告并文献复习

汗腺癌是一种罕见的恶性皮肤肿瘤.其发病率约为 0.05％,多见于 50～70 岁的人群,无性别和种族差异[1-2].其确诊主要依靠组织病理学.临床表现多为单发或多发的无痛性结节或肿块,常因局部刺激而出现瘙痒、破溃和出血的症状.复发率及转移率非常高,预后很差.目前为止,尚无规范的治疗手段,局部广泛切除依然是其首选治疗方案.化疗、放疗、内分泌治疗及电化学治疗等是否能使患者获益尚无统一结论.

《中华肿瘤防治杂志》稿约

血清4-羟基壬烯醛与食管癌前病变患者易感性相关性分析

目的 表达谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)的GSTM1合并GSTT1变异是食管癌的危险因素,携带乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase-2,ALDH2)*2基因(G671A)导致ALDH2活性降低的人群长期饮酒更易罹患食管鳞状细胞癌.本研究旨在探讨食管癌血清4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)浓度与ALDH2和GSTM1基因多态性的关系.方法 筛选2016-05-02-2017-01-22肥城市人民医院97例食管癌前病变患者(实验组)和100名健康体检者(对照组),采用酶联免疫分析(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定血清4-NE水平,提取DNA后PCR和Sanger测序确定ALDH2基因型和GSTM1基因型,记录性别、年龄以及吸烟和酗酒状况,用病例对照研究方法分析食管癌前病变和4-HNE改变的独立危险因素.结果 食管癌前病变人群4-HNE[(14.03±4.11)μg/mL]升高,与对照组(9.17±2.62)μg/mL比较差异有统计学意义,P=0.041.多元线性回归结果表明,4-HNE升高与吸烟、酗酒和携带ALDH2*2等位基因(G671A)合并GSTM1基因缺失(ALDH2*2+GSTM1null)有关,拟合得到的方程是4-HNE浓度=9.04+3.306(酗酒)+2.560(吸烟)+1.014(ALDH2*2+GSTM1null)(R=0.726,R2=0.527).多因素Logistic分析结果表明,酗酒(OR=3.324)、高龄(OR=2.267)、ALDH2*2+GSTM1null(OR=1.602)和4-HNE浓度(OR=1.516)是食管癌前病变的独立危险因素.结论 食管癌前病变的易感性与酗酒和ALDH2*2+GSTM1null表达低活性酶引起的4-HNE在体内堆积有关.

靶向抑制Survivin基因对子宫内膜癌细胞增殖与凋亡影响

目的 肿瘤形成与细胞凋亡异常密切相关,Survivin基因是凋亡抑制蛋白家族中强细胞凋亡抑制因子之一.本研究利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制人RL95-2子宫内膜癌细胞Survivin基因表达,探讨沉默Survivin基因对人子宫内膜癌细胞增殖和凋亡影响.方法 合成靶向Survivin基因siRNA特异性序列,脂质体转染人RL95-2子宫内膜癌细胞,转染6 h后,荧光显微镜和流式细胞仪评估细胞转染效率.转染48 h后,应用qPCR检测Survivin mRNA水平的变化,蛋白质印迹法检测Survivin蛋白的表达.细胞转染72 h后,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡变化.结果 脂质体介导siRNA转染效率达到61.3％(6130/10000).转染48 h后,qPCR检测结果显示,实验组Survivin mRNA表达量为0.240±0.023,对照组为0.998±0.030,空白组为1.006±0.022.转染48 h后,蛋白质印迹法检测结果显示,实验组Survivin蛋白相对表达量为0.371±0.089,对照组为0.639±0.127,空白组为0.619±0.094,各分组Survivin蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义,F=6.100,P=0.036.细胞转染72 h后,实验组吸光度值为0.558±0.088,对照组为1.047±0.128,空白组为1.116±0.159,各分组吸光度值比较,差异有统计学意义,F=17.075,P=0.003.转染72 h后,实验组细胞早期凋亡率为(18.9±3.44)％,对照组为(3.7±1.09)％,空白组为(3.1±1.22)％,各分组细胞早期凋亡率比较,差异有统计学意义,F=49.728,P=0.018.结论 应用 siRNA 技术沉默 Survivin 基因表达,可降低 RL95-2 子宫内膜癌细胞生长速度,抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡.Survivin 基因可作为抗子宫内膜癌治疗潜在靶点.

一种N取代4,6-二氯靛红的抗癌机制研究

目的 癌症已成为威胁人类健康的严重疾病之一,研发新型抗癌药,揭示其作用机制,具有重要医学意义.本研究报道了一种新型4,6-二氯靛红衍生物(FMDCIS)的抗癌活性及其作用机制.方法 利用酸性磷酸酶法检测FM-DCIS对癌细胞体外增殖的影响;观察在FMDCIS作用下人肝细胞癌HepG2细胞的形态变化;应用流式细胞术分析FMDCIS对细胞周期的影响;于25℃离心分离可溶性的微管蛋白二聚体与不溶的聚合微管蛋白,检测FMDCIS处理组和对照组HepG2细胞内微管组装水平的差异;蛋白质印迹法检测FMDCIS所致细胞周期和凋亡通路中关键调控蛋白的改变;荧光染料单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)检测自噬小体的变化.结果 FMDCIS对人肝癌HepG2和BEL-7402细胞,以及小鼠乳腺癌4T1细胞均有显著的杀伤效果,其中对HepG2细胞的杀伤效果强,其IC50为0.57μg/mL.而FMDCIS对人胎肝细胞L02的IC50为1.67μg/mL,明显高于HepG2细胞,表明FMDCIS对胎肝细胞的毒性相对较弱.光镜显示,FMDCIS作用后的HepG2细胞铺展能力丧失并变成圆形.流式细胞术检测结果显示,HepG2细胞在FMDCIS孵育6、12和24 h后,G2/M期占比分别为(10.2±0.5)％、(71.3±1.3)％、(82.3±1.2)％,与对照组相比差异有统计学意义,F=161.38,P<0.01,表明FMDCIS可将HepG2细胞阻断于G2/M期.此外,随着FM-DCIS作用时间的延长,G2/M峰左移,提示发生了染色体丢失和有丝分裂灾难.对照组HepG2细胞内可溶性微管蛋白与不溶性聚合微管蛋白之比值为1.01±0.02,而在FMDCIS给药组孵育24 h后,可溶性与聚合微管蛋白比值增加到2.01±0.23(F=10.38,P<0.01),表明FMDCIS具有秋水仙素样的抗微管药活性,可抑制细胞内微管组装.蛋白质印迹法检测结果显示,在FMDCIS作用下,HepG2细胞内周期蛋白Cyclin B1含量增高,F=13.16,P<0.01;Cyclin D1、Cyclin E、Cyclin A、c-Myc、E2F1和RB含量降低;Pro-Caspase-3和PARP均出现裂解带,促凋亡蛋白Bax上调(F=20.74,P<0.01),抑凋亡蛋白Bcl-2下调,F=18.38,P<0.01.MDC染色显示,在FMDCIS作用下HepG2细胞内自噬小体大量增加.结论 FMDCIS对人肝细胞癌HepG2细胞有很强的杀伤效果,其作用机制为抑制微管组装,干扰有丝分裂进程,导致细胞周期阻滞于有丝分裂前期,进而引发有丝分裂灾难,并以凋亡和自噬性细胞死亡同时活化的方式杀伤癌细胞.

EGFR靶向HBD-1强化融合蛋白构建及其抗肿瘤活性研究

目的 人β-防御素1(human defensin-β-1,HBD-1)由上皮细胞分泌,在肿瘤细胞中极少表达,新研究表明它可作为肿瘤的抑制基因.本研究制备以人表皮生长因子受体-1(human epidermal growth factor receptor-1,EGFR-1)为靶点、HBD-1(Db)的力达霉素(lidamycin,LDM)组成的强化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db,并探讨其抗肿瘤活性.方法 采用基因工程方法制备融合蛋白基因并将其表达纯化得到融合蛋白Ec-LDP-Db.ELISA和细胞免疫荧光法检测Ec-LDP-Db与肿瘤细胞表面EGFR亲和活性;采用CCK-8法测定Ec-LDP-Db对人肿瘤细胞A431、A549、H460和PG-BE1体外杀伤活性,纯化的Ec-LDP-Db蛋白与LDM发色团(AE)在体外进行组装,构建强化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db.采用MTT法检测Ec-LDP(AE)-Db对肿瘤细胞杀伤活性,A431细胞裸鼠移植瘤实验检测Ec-LDP(AE)-Db体内抗肿瘤活性.流式细胞仪检测Ec-LDP(AE)-Db作用后肿瘤细胞的细胞周期变化.结果 成功构建并表达融合蛋白Ec-LDP-Db,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,目的蛋白Ec-LDP-Db经纯化、复性后,每升发酵液可以获得30 mg,检测纯度达到88％.Ec-LDP-Db可与高表达EGFR的A431细胞表面结合.不同浓度的HBD-1和Ec-LDP-Db对A431和H460具有增殖抑制作用,其中10μmol/L Ec-LDP-Db组A431细胞抑制率为(67.3±6.9)％,高于HBD-1组抑制率(13.2±3.7)％,差异有统计学意义,t=1.585,P=0.023;Ec-LDP-Db组H460细胞抑制率为(65.3±2.0)％,高于HBD-1组抑制率(20.5±0.5)％,差异有统计学意义,t=1.895,P=0.045.Ec-LDP-Db蛋白与LDM发色团在体外组装成功后为强化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db.MTT法检测结果显示,Ec-LDP(AE)-Db对肿瘤细胞的杀伤作用比顺铂(cisplatin,DDP)强,DDP对A431的IC50值为(303.2±55.6)×10-10 mol/L,而Ec-LDP(AE)-Db对A431的IC50值为(1.9±2.2)×10-10 mol/L,P=0.043.A431裸鼠移植瘤实验同样证实Ec-LDP(AE)-Db在体内也具有更高的抗肿瘤活性,其抑瘤率为77.8％,P=0.008.流式细胞术检测发现,A431细胞Ec-LDP(AE)-Db给药组1 nM时G2期为(79.1±8.7)％,与对照组(2.9±0.8)％相比,差异有统计学意义(P=0.018),因此Ec-LDP(AE)-Db可以促使A431肿瘤细胞G2/M期阻滞.结论 本实验制备的EGFR靶向强化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db可以与高表达EGFR的A431癌细胞结合,对肿瘤细胞具有强烈的杀伤活性,具有发展为抗肿瘤靶向药物的潜能.