中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位: 中华医学检验杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 1.40
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-4452/R
- 国内刊号: 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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滴金免疫法快速检测肾综合征出血热血清特异性IgM的研究
目的建立一种快速、敏感、适于基层应用的检测肾综合征出血热患者血清特异性IgM的方法.方法将汉坦病毒核蛋白点于硝酸纤维薄膜上,用来捕获血清标本中的肾综合征出血热病毒特异性IgM,通过胶体金标记的抗人μ链单克隆抗体直接显色,阳性者出现红色斑点.结果整个试验过程仅需2~4分钟,操作简单.用该法与酶联免疫吸附试验对比检测45份肾综合征出血热患者血清标本,两法均阳性为41份,两法均阴性为2份,总符合率为96%.结论滴金免疫法简便、快速,适于基层应用,可用于肾综合征出血热的早期诊断及流行病学研究.
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人β3-肾上腺素能受体基因第64位密码子突变频率的检测
目的建立一种简便、准确、实用的人β3-肾上腺素能受体基因第64位密码子突变频率的检测方法.方法应用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增β3-肾上腺素能受体基因含编码64位氨基酸的基因序列,扩增产物用限制性内切酶Bst OI酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性(RFLP)图谱.结果运用PCR-RFLP法检测了174名汉族人β3-肾上腺素能受体基因第64位密码子点突变,其中野生型纯合子频率为69.5%,杂合子频率为27.6%,突变型纯合子频率为2.9%.突变等位基因频率为0.17.结论该方法简便、快速、准确,适合于一般实验室检测及大规模的人群调查.
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肠球菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究
目的研究临床分离的肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系.方法应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的311株肠球菌的耐药性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对细菌分型;病例回顾性分析.结果肠球菌对临床常用的15种抗生素的耐药率以万古霉素低;其次为氨苄西林/舒巴坦耐药率为17.4%;亚胺硫霉素耐药率为18.3%.粪肠球菌与屎肠球菌对抗生素的耐药率有明显差异.应用PFGE法将粪肠球菌分为A型及亚型、B型、C型及亚型、D型,屎肠球菌分为A、B、C型.结论肠球菌对临床常用的15种抗生素的敏感性以万古霉素敏感.肠球菌引起的不同系统感染,以泌尿系统常见.PFGE对肠球菌感染流行监测是一个有力的工具.
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影印培养法测定低杀菌浓度的评价
目的评价影印培养法,为体外测定低杀菌浓度(MBC)提供准确简便的方法.方法以肉汤稀释法为参考方法及影印培养法分别测定MBC.采用世界卫生组织耐药监测计算机软件绘制两种方法MBC菌株分布散点图.用质控菌确定影印培养法的准确度.结果两种方法所测MBC菌株分布呈直线正相关,r=0.725,P<0.001.影印培养法的日内和日间准确度为90%和90.6%.通过秩和检验配对比较,两种方法差异无显著性,P>0.1.经100对次平行试验,两种方法间MBC完全符合率为36%,±1稀释度符合率为78%,±2稀释度符合率为96%.结论影印培养法测定MBC,简便实用、结果易判定,重复性好、准确度高,具有能同时测定大量细菌等优点.
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酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因
目的建立血清内源性哇巴因(EO)浓度测定的酶联免疫吸附试验,促进对这一新的皮质类固醇激素的研究.方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清,用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度;进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验.结果以抗血清稀释度为1:10 000、包被抗原浓度为1 μg/ml时标准曲线理想,灵敏度为0.23 μg/L,血清EO高(2.4 μg/L)、中(1.2 μg/L)、低(0.6 μg/L)浓度的平均批内变异系数为4.7%,批间变异系数为12.3%;高、低浓度的回收率分别为96.3%和91.4%;与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应,与地高辛存在1.8%的交叉反应.用该法测定正常人(10例)、孕妇(23例)及原发性高血压患者(10例)血清EO含量分别为0.51±0.17、0.81±0.26、0.74±0.20 μg/L.结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点,可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究.
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微量法检测念珠菌对三唑类药物敏感性与交叉耐药性
目的应用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐微量法测定酵母菌低抑菌浓度(MIC),并检验其重复性和准确性,观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性.方法参照NCCLS推荐的药敏试验方案微量稀释法(1995年版),检测25株氟康唑耐药性白念珠菌及48株临床分离株对氟康唑及伊曲康唑的敏感性.结果 25株氟康唑耐药白念珠菌中只有3株菌对伊曲康唑耐药(MIC值≥4 μg/ml),占13.04%,只有少数菌对伊曲康唑存在交叉耐药.48株临床分离白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的MIC值呈正态分布,有46株对伊曲康唑的MIC值介于0.007 5~4 μg/ml,其半数抑菌浓度(IC50)为0.125 μg/ml,有43株对氟康唑的 MIC值介于0.25~16 μg/ml ,其IC50为2 μg/ml.结论 NCCLS微量稀释法有较好的可重复性和稳定性,少数氟康唑耐药株对伊曲康唑有交叉耐药性.
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酶免疫法检测丙型肝炎病毒RNA的聚合酶链反应产物
目的建立一灵敏、快速的检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA逆转录-套式聚合酶链反应(PCR)产物的酶免疫法.方法对第2次PCR所用的引物进行双标记,使扩增产物同时被修饰有生物素和荧光素(fluorescein)成分,再经过固相的链亲合素进行捕获、辣根过氧化物酶标记的抗-fluorescein反应后显色测定.结果所建立的方法与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比灵敏、快速、准确,结果判断客观,重复性也较好;所测结果可反映PCR产物量的多少,但不能准确表示模板量的大小.结论建立的方法可取代电泳法而成为HCV RNA常规PCR反应产物的检测技术.
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浓度梯度法用于耐甲氧苯西林葡萄球菌的检测
目的尝试用浓度梯度法(如Etest法)对耐甲氧苯西林葡萄球菌(MRS)进行检测,并验证其精确性、连续性、稳定性.方法应用Etest法苯唑西林和甲氧苯西林试条检测58株临床分离葡萄球菌的耐药率,并对其中29株菌采用Etest法和Microscan法对青霉素、苯唑西林、万古霉素等6种抗生素进行低抑菌浓度(MIC)结果的比较.结果 58株葡萄球菌中,Etest法对MRS的总检出率为83%.如果Etest法作为参考方法,则29株菌的MIC对比中Microscan法的判别误差为苯唑西林13.0%,庆大霉素3.4%,氯林可霉素27.6%;两种方法对青霉素和环丙氟哌酸无明显误差.尽管两法对万古霉素无判别误差,但Microscan法有较明显的低MIC值趋势.结论 Etest法的精确性、连续性和稳定性使其可作为临床实验室检测MRS的常规药敏方法的重要补充.
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尿脱氧吡啶啉排泄率是糖尿病骨量减少的敏感指标
目的探讨尿脱氧吡啶啉(DPD)排泄率对骨量减少的诊断意义.方法对47例(男27例,女20例)糖尿病患者和40例(男20例,女20例)正常健康人用ELISA双抗体夹心法测定尿脱氧吡啶啉排泄率.结果糖尿病患者DPD排泄率(男5.89±1.93,女6.01±2.22 nmol.L-1DPD/mmol.L-1Cr)较正常对照组(男3.87±1.57,女3.63±1.68 nmol.L-1DPD/mmol.L-1Cr)明显增高(P<0.01).而部分糖尿病患者骨密度降低尚达不到骨质疏松或骨量减少的诊断标准.结论 DPD排泄率是反映糖尿病骨量减少的敏感指标.
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混合样品中微量SRY基因的毛细管电泳检测
目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法.方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增混合样品中微量男性DNA的SRY序列,分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测PCR扩增产物,比较二者的检测灵敏度. 结果毛细管电泳可检测到20 pg男性模板DNA(相当于3~4个细胞中的DNA含量)PCR扩增产物总量的1/600,琼脂糖凝胶电泳可检测到74 pg男性模板DNA(相当于13个细胞中的DNA含量)PCR扩增产物总量的1/3.毛细管电泳检测微量目的基因扩增产物的综合灵敏度是琼脂糖凝胶电泳的750倍. 结论毛细管电泳灵敏度高、重现性好,与PCR技术结合可广泛用于各种混合样品中微量核酸分子的检测.
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增菌法分离嗜肺军团菌的研究及应用
嗜肺军团菌(Legionella pneumophila, LP)常引起人类军团菌肺炎散发和暴发.在临床诊断和流行病学调查中,病原体LP的分离较重要. 国内外常用分离方法[1,2]操作过程复杂、酸预处理抑制LP生长、标本中含菌量少、杂菌抑制等诸因素导致阳性检出率低.本实验建立的增菌法分离LP和研制的选择性增菌培养基(ABYE),可提高阳性分离率和减少常规分离方法实验步骤.
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高血压病患者血小板、红细胞蛋白激酶C活性变化
蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)可通过调控细胞外信号的跨膜信息传递影响多种细胞的功能.因此,PKC活性异常与高血压病(EH)发病的关系引起人们的普遍关注.鉴于血小板、红细胞具有与血管平滑肌相似的信息传递系统,故在临床研究中常被作为了解血管平滑肌功能状态的模式.本研究测定了EH患者血小板、红细胞PKC活性,旨在探讨PKC活性变化在EH发病中的病理作用.
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2 135例正常儿童静脉血血细胞参数正常参考范围调查
近年来,血液分析仪的使用,提高了国内血细胞的检测水平,同时,也给临床提供了许多不能用手工检测的诊断指标.以静脉血作为检测标本是搞好自动化仪器检验质量控制的重要条件.正常成人静脉血血细胞正常参考范围目前国内已有部分报道,但对正常儿童的静脉血血细胞各参数迄今未见大样本正常参考范围调查的报道.为此,我们对2 135例正常儿童进行了调查,现报告如下.
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3 236株细菌对头孢美唑和其他10种β-内酰胺药敏感性分析
头孢美唑(cefmetazole)系半合成头霉菌素类,其抗菌谱广,对多种革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌及厌氧菌如脆弱拟杆菌具有很好的活性[1~3],我们采用纸片扩散法测定头孢美唑对1993~1996年来本院住院的病人中分离的3 236株菌体外活性,并与其他10种β-内酰胺抗生素作了比较.
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鲍曼不动杆菌鉴定及临床分布特征
我们采用API-20NE系统(Bio′ Merieux,法国)对96株不动杆菌进行了鉴定.报告如下.
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两种方法检测抗可提取性核抗原抗体的比较
抗可提取性核抗原(ENA)抗体的检测是诊断自身免疫性结缔组织疾病重要的血清学依据,我院风湿免疫科实验室用免疫双扩散法(ID)和免疫印迹法(IB)进行常规检测.现将随机抽取997例各种疾病患者及20名健康人血清标本的检测结果比较分析如下.
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流式细胞术测定人外周血淋巴细胞亚型
利用流式细胞仪检测淋巴细胞亚型,具有简便、快速、计数的细胞量大等优点.但目前各家报道的正常参考值相差较大,为此我们测定了110名正常成人外周血淋巴细胞亚型的百分含量,报告如下.
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一种从脑脊髓液中提取病毒RNA和DNA的新方法
从真核细胞中提取总RNA和DNA的方法很多[1],均需从大量细胞和大量临床样本中分离、纯化核酸.从标本中提取靶DNA或RNA的多少是聚合酶链反应(PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)方法敏感性的关键,尤其是某些感染性疾病早期标本中只有微量病毒分子时更是如此.因此,许多新方法和传统方法经修改后[2~5]都致力于病毒滴度很低的临床小样本的检测.本实验应用单一异硫氰酸胍裂解缓冲液分离脑脊髓液(CSF)中的RNA和DNA,旨在建立一种适于临床小样本的有效、快速、简单的核酸提取方法.
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尿液γ-谷氨酰转移酶测定及其临床应用
血清γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)增高,通常对于肝、胆、胰的恶性疾患的诊断有一定意义.目前国内应用连续监测法直接测定正常人尿液γ-GT和在肾脏疾病及其他有关疾病时尿液γ-GT变化的报道还很少,我们报告尿液γ-GT的正常含量和与肾脏有关的疾患尿液γ-GT的变化,对肾脏疾病的诊断方面有一定的参考价值.
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费氏枸橼酸杆菌复合群的鉴定及耐药性分析
枸橼酸杆菌属(citrobacter)机会性致病菌,可引起人的原发和继发性感染症,如呼吸道、泌尿系感染及败血症等,占医院感染的1.5%[1,2].文献报道不同的枸橼酸杆菌对抗生素的敏感性不同,这对治疗由该菌引起的感染症有重要意义.我们对临床分离的89株费氏枸橼酸杆菌复合群按Brenner等[3]提出的生化方法进行了鉴定,并对药敏试验结果进行了分析.
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上海瑞金医院1 887株临床分离菌的耐药性分析
细菌耐药性问题已成为医药界共同关注的问题,当前监测和研究的焦点集中在耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐万古霉素的肠球菌(VRE)和产β-内酰胺酶的革兰阴性菌等重要耐药菌株.我们将1997年上半年度我院1 887株临床分离菌株对16种抗生素的耐药性分析如下,供临床医师、临床微生物实验研究人员和抗生素工作者参考.
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嗜麦芽窄食单胞菌简易鉴定方法探讨
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomo-nas maltophilia),即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名[1].该菌由于对多种抗菌药物耐药,常成为严重的院内感染菌,且在非发酵菌中已占到第3位[2].国内分离情况也是如此.对嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定目前尚无十分理想的方法,按一般非发酵菌鉴定,操作繁琐、费时.为此我们利用该菌对亚胺培南(imipenem)天然耐药这一特性[3],结合菌落形态、动力、氧化酶试验对该菌进行鉴定,经常规应用效果满意,现报告如下.
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免疫层析分析进展
免疫层析是出现于80年代初期的一种独特的免疫分析方式[1,2],它往往以条状纤维层析材料为固相,通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带),通过酶反应或直接运用可目测的标记物(如胶体金)而得到直观的实验现象(如显色).而游离标记物则越过检测带,达到与结合标记物自动分离之目的.这种分析技术操作简单快速,分析结果清楚,易于判断,且无须仪器(或只需简单仪器),因此,非常适用于各级医院、家庭或个人在诊断、保健、体检等方面的运用.
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为什么葡萄球菌不应做头孢菌素药敏试验?
问:为什么葡萄球菌不应做头孢菌素药敏试验?答:头孢菌素与青霉素同属于β-内酰胺类抗生素.葡萄球菌对这类药物的抗药性系产生β-内酰胺酶.青霉素是治疗的首选药,葡萄球菌药敏试验,青霉素为主要测定药物.敏感的菌株,一般不必用头孢菌素治疗.如果耐药,头孢菌素也耐药.如果是耐甲氧西林葡萄球菌,各种青霉素和头孢菌素都耐药.头孢菌素的体外药敏试验,对葡萄球菌有一个问题,即常出现假敏感的结果(试验为敏感,治疗无效),报告临床会误导用药.为此,不应做葡萄球菌对头孢菌素类药物的敏感试验.
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对当前我国细菌抗菌药敏试验的建议
我国与世界各国一样面临着感染菌的耐药性明显增多的威胁.尽管新型抗菌药物不断出现,但常见感染菌的耐药性也随之增加.国内耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)及血浆凝固酶阴性的葡萄球菌的检出率在20%~80%之间,耐万古霉素的肠球菌(VRE),具有超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科,耐青霉素的肺炎链球菌的检出率也在增多.因此,有效而合理的抗生素治疗更加依赖准确而及时的抗菌药敏试验.当前,我国微生物检验手段虽有明显进步,但仍是检验各学科中的薄弱环节,很有必要加强,以适应临床诊断和治疗的需要.
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提高抗酸杆菌检出率的一种方法
为减少综合性医院的结核病漏诊,近两年来,我科对门诊与住院患者送检的脓性标本,凡未注明查抗酸杆菌,普通培养或革兰染色阴性时,再取标本涂厚片进行抗酸染色.如标本已丢弃,用二甲苯除去染片上的香柏油,重新抗酸染色.共收集到上述标本48份.包括痰液25份,胸水8份,腹水6份,尿液5份,脑脊液4份.
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血培养分离出11株雏沙门菌
我们近年从住院的95例患者血培养中分离出11株雏沙门菌.现报告如下.
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发根聚合酶链反应诊断急性间歇性卟啉症
急性间歇性卟啉症(acute intermittent porphyria, AIP)是常染色体显性遗传病.患者肝和红细胞中胆色素原脱氨酶(PBG-DA)缺乏,尿中大量胆色素原(PBG)和δ氨基γ酮戊酸(ALA)排出.目前该病主要以生化方法检查.笔者采用发根聚合酶链反应(PCR)结合内切酶分析检测AIP基因,行基因诊断,效果理想.
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脑脊液中分离出腔隙莫拉菌一例
患者男,12岁.因患右小脑胶质瘤,于1996年3月行肿瘤切除术.术后曾做放疗.1997年1月患者出现头晕、头痛及呕吐,且逐渐加重,经检查,示肿瘤复发.第二次入我院,于1997年3月19日再行手术,术后患者一直持续低热(37.5℃~38.5℃).4月10日取脑脊液检查:蛋白阳性;细胞总数:350×106/L;白细胞数100×106/L;多核0.40;单核0.60;同时做细菌培养.结果为腔隙莫拉菌(moraxella lacunata).根据药敏结果,临床采用丁胺卡那霉素和头孢曲松联合治疗,病人体温恢复正常.4月21、22日两次送脑脊液培养均为阴性.病人痊愈出院.
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戴氏西地西菌致菌血症一例
1996年8月,我们从一例急性粒细胞性白血病患者的血液中两次分离到戴氏西地西(cedecea davisae)菌,报道如下.
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肺内感染患者痰中培养出非脱羧勒克菌
近年来由于临床诊断水平及检测技术的不断提高,分离出病原菌种类不断增加,我们应用全自动微生物分析仪VITEK-AMS30仪鉴定出少见的非脱羧勒克菌(L.adecarboxylata),现报告如下.
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从食物中毒患者粪便中检出韦太夫雷登沙门菌
1997年1月,我们从一家庭暴发食物中毒致腹泻患者粪便中同时分离到国内少见的韦太夫雷登沙门菌(S.Weltevreden),现介绍如下.
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简介美国NCCLS药敏试验纸片扩散法法规(1997年版)变动部分
1997年美国NCCLS对药敏试验纸片扩散法法规继1995年改动后再次进行修订.新版对苛养细菌部分除了1995年增补的流感嗜血杆菌、肺炎链球菌外,还增加了对淋病奈瑟菌药敏试验有关的补充内容.现将改动部分介绍如下:
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肠球菌的耐药特点及药敏试验方法
肠球菌是临床较常见的一类细菌.据近些年的报道,肠球菌已成为医院感染中重要的病原菌,危害性越来越大.肠球菌往往对抗生素耐药或高度耐药,实验室能否准确检出耐药菌株对抗感染治疗的成败十分重要.针对肠球菌的药敏试验方法,国外进行了相当多的研究,确定了一整套科学的方案.以下将有关问题作简要介绍.
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药敏试验的再认识
抗生素广泛使用,甚至滥用,造成耐药的细菌越来越多,药敏试验的作用显得愈加重要.由于各种细菌耐药的机理和程度互不相同,不同的药敏试验方法,检测结果会存在一定差异.对于药敏试验的理解和使用中应注意的问题,概括如下几点.
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抗生素使用的个体化与药敏监测
药敏试验给临床提供抗生素使用依据,尤其是疗效不满意时,对药物选择有指导意义.一般药敏报告如果使用纸片扩散法以S(敏感)和R(耐药)报告,可给临床提供基本选药信息.但目前临床感染较复杂,应综合考虑患者情况,选用合适合理的抗生素搭配,争取在短时间内取得较好疗效,即抗生素使用个体化.临床用药的个体化往往更多需要参考低抑菌浓度(MIC)的值.仅举2例说明.
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药敏试验中定性和定量都很重要
在临床治疗中,许多医生已学会了判读纸片扩散法的药敏试验报告结果:(1)先读哪几个药是属于敏感的;(2)然后在敏感的抗生素中,注意其中几类;(3)读哪一个离敏感判读值大、敏感,选同一类抗生素中如β-内酰胺类中抑菌环大的药.当然还要考虑药代动力学及毒副作用等,使用抗生素要多方面考虑,其中细菌对抗生素的敏感程度是重要的因素.
年 | 期数 |
2019 | 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 |