一种具有双嗜性功能融合蛋白FN/CDH的制备及其促粘附、成骨生物活性鉴定

目的 构建一种具有同嗜性和异嗜性细胞粘附功能的重组融合蛋白FN/CDH,验证其对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cell,hMSCs)的促粘附、成骨效能.方法 以纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和钙粘附蛋白11(CDH11)作为前体分子,通过生物信息学分析了解其结构序列与功能基团.采用“同源模建”作为分子模拟策略确定FN和CDH11功能片段的接合方式.常规PCR扩增FNⅢ7-10和CDHll ECl-2基因片段后应用重叠延伸PCR(splice-over-extension PCR,SOE-PCR)进行基因拼接.将融合基因插入原核表达载体pET-22b构建重组载体,重组载体转化表达菌株Rsoetta-gami(DE3),实现rFN/CDH的诱导表达,蛋白纯化.免疫印迹确定融合蛋白种属,离心促粘附实验和成骨诱导验证rFN/CDH体外生物活性.结果 成功构建了pET22b-FNⅢ7-10/CDH1l ECl-2融合基因原核表达载体,获得了rFN/CDH的可溶性表达,纯化后rFN/CDH的纯度达到96％.初步验证了各个融合蛋白表达属性的准确性,证实rFN/CDH具有良好的促进成骨细胞粘附的生物活性.将有成骨分化潜能的hMSCs在rFN/CDH涂层的TCPS表面进行成骨诱导培养,以早期成骨标志物Alkaline phosphatase (ALP)和晚期标志物Osteocalcin (OCN)作为评价指标,提示rFN/CDH具有良好的促进细胞成骨分化的生物活性.结论 成功进行了rFN/CDH融合蛋白的原核表达、纯化和鉴定,嵌合蛋白的粘附活性在一定程度上实现了对FN和CDH11功能的叠加,rFN/CDH具有“促粘”和“促成骨”的双重生物活性,可作为一种理想的仿生修饰分子进行生物界面的构建.

HPLC法测定盐酸贝那替秦原料药及其注射剂的含量和有关物质

目的 建立HPLC测定盐酸贝那替秦原料药及其注射剂的含量和有关物质的方法.方法 以乙腈-磷酸二氢钾溶液(每1 000毫升含6.80 g磷酸二氢钾、0.556 g庚烷磺酸钠)35:65为流动相;采用反相C18色谱柱,以1.0 mL/min流速,210 nm检测波长,30℃柱温,20 μL进样量为色谱条件进行测定.结果 盐酸贝那替秦原料药及注射液中各杂质峰峰面积之和不超过对照溶液主峰面积的1％;盐酸贝那替秦在浓度1～ 200 μg/mL范围内具有良好线性关系(r=0.999 5),高、中、低浓度的平均回收率分别为98.99％(RSD=0.67％)、99.96％(RSD=0.10％)、101.21％(RSD =0.11％);日内(n=3)及日间精密度(n =5) RSD均小于2％,定量限1.7 ng,检测限0.4 ng.结论 本实验方法专属性强、准确度高,可用于盐酸贝那替秦原料药和注射液的质量控制.

胸部撞击伤对声门紧闭和开放状态大鼠肺微血管VE-cadherin表达的影响

目的 观察撞伤Wistar大鼠肺微血管内皮细胞间连接成分血管内皮-钙粘附蛋白(VE-cadherin)的表达,了解撞击伤后肺微血管通透性的改变.方法 利用荧光素钠法检测撞击伤后声门紧闭和开放状态Wistar大鼠肺组织的微血管通透性,动态观察撞击伤对细胞间连接的特有成分VE-cadherin表达的影响.结果 撞击侧(右肺)肺微血管通透性均较伤前显著增高,各组在伤后同一时相点的值与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),声门紧闭组荧光素钠的含量高于声门开放组,差异有统计学意义(P＜0.01).胸部撞击伤后大鼠肺微血管内皮细胞VE-cadherin的表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 声门紧闭状态下撞击伤后肺微血管通透性高于声门开放状态,VE-cadherin在撞击伤后肺微血管内皮细胞中的表达下调,使得内皮细胞之间的连接疏松,通透性增加.

不同全瓷材料对两种树脂粘接剂固化效率的影响

目的 研究不同全瓷材料对树脂粘接剂固化效率的影响,为临床全瓷粘结提供一定的指导.方法 选用临床常用的5种全瓷材料(Cerec Blocs、IPS e.max Press、In-Ceram Alumina、IPS e.max ZirCAD、Ineoris Alumina)分别制备成直径为6.00 mm,厚度为0.70 mm的核瓷瓷片,并在不同的核瓷表面上堆塑相应的饰面瓷,使全瓷试件终厚度控制在1.20 mm,共计5个.二极管(LED)光固化灯作为固化光源,VariolinkⅡ、PanaviaTM F作为实验中的树脂粘接剂,根据光照过程中作为中介的全瓷材料分为Ceree Blocs组、IPS e.max Press组、In-Ceram Alumina组、IPS e.max ZirCAD组、IncorisAlumina组及空白组.利用傅里叶红外光谱仪分别记录这两种树脂粘接剂固化前后的红外光谱图,并计算聚合转化率(DC).应用SPSS 10.0统计软件对实验数据进行统计学分析.结果 VariolinkⅡ、PanaviaTM F树脂粘接剂的聚合转化率在不同全瓷组之间均有显著性差异(P＜0.05),Cerec Blocs组的聚合转化率(37.30±1.44)大,Incoris Alumina组(16.66±1.74)的小,其他组从大到小依次为IPS e.max Press组(33.76±1.61)、In-CeramAlumina组(26.44±1.29)、IPS e.maxZirCAD组(21.86±2.11),实验组的聚合转化率均低于空白组(42.46士1.32,P＜0.05);同一实验组中两种树脂粘接剂之间的聚合转化率也存在显著性差异(P＜0.05),且VariolinkⅡ高于PanaviaTM F.结论 不同全瓷材料会影响树脂粘接剂VariolinkⅡ、PanaviaTMF的聚合转换率,Ceree Blocs、IPS e.max Press玻璃全瓷材料对树脂粘接剂的固化效率影响较小,而In-Ceram Alumina、Incoris Alumina、IPS e.max ZirCAD氧化铝或氧化锆全瓷材料对树脂粘接剂的固化效率影响较大.同一全瓷材料下VariolinkⅡ的固化效率要高于PanaviaTM F.

EIF3h在结直肠癌组织中的表达及临床病理意义

目的 探讨真核翻译起始因子3h(eukaryotic translation initiation factor 3 subunit h,EIF3h)在结直肠癌组织中的表达及其临床病理学意义,并分析在结直肠癌组织中EIF3h和Ki-67表达的关系.方法 应用免疫组化EnVision法检测76例结直肠癌组织、35例结直肠腺瘤组织、20例距癌10 cm的肠黏膜组织中EIF3h的表达水平.结果 EIF3h在结直肠癌组织、腺瘤组织、距癌10 cm的肠黏膜组织中表达的阳性率分别为86.84％(66/76)、31.43％ (11/35)、10.00％(2/20),3组间差异有统计学意义(P＜0.01).EIF3h的表达与肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移相关(P＜0.01);与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P＞0.05).结直肠癌组织中EIF3h与Ki-67的表达呈正相关(r=0.42,P＜0.01).结论 EIF3h在结直肠癌组织中呈高表达,提示其可能与结直肠癌的发生、发展密切相关.联合检测EIF3h和Ki-67在结直肠癌中的表达,有助于结直肠癌的诊断和预后的评估.

宫颈癌二弧旋转容积调强与固定7野动态调强的剂量学比较

目的 比较二弧旋转容积调强(volumetric modulated arc therapy,VMAT)与固定7野动态调强(dynamicintensity modulated radiotherapy,dIMRT)在宫颈癌放疗计划中的剂量学差异,寻找宫颈癌放疗的佳计划方案.方法 10例宫颈癌患者利用VARIAN计划系统(Eclipse 8.6)分别制定二弧VMAT和7野dIMRT放疗计划.比较两种计划中靶区、射野内正常组织以及危及器官的剂量学差异和执行两种计划所需的机器条数(MU)、照射时间及计划制定优化时间的差别.结果 与7野dIMRT相比,二弧VMAT靶区适合度指数(CI)更接近l(P＜0.05)、靶区剂量均匀性指数(HI)无显著差异;D100％显著大于7野dIMRT放疗计划,且Dmin更接近处方剂量,差异均有统计学意义(P＜0.05).在二弧VMAT计划中股骨头的Dean显著低于7野dIMRT计划(P＜0.05),而D5％两者接近.在小肠、膀胱、直肠和马尾的保护上二弧VMAT较7野dIMRT无明显优势,但仍能很好地达到临床要求.二弧VMAT总MU为7野dIMRT的1/4,治疗时间减少2/3.结论 二弧VMAT计划可以达到或优于7野dIMRT计划的靶区剂量分布,能更好地降低部分危及器官的受照剂量,使正常组织内高剂量区(20～30 Gy)体积明显减少,并且具有相对减少总MU、总治疗时间的优势,是宫颈癌放射治疗计划的较好选择之一.

不同拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK系统辅助伽玛刀杀伤C6胶质瘤的初步研究

目的 研究不同拷贝数CArG/5HRE+ HSV-TK系统辅助伽玛刀杀伤C6胶质瘤效果,寻求伽玛刀条件下对胶质瘤杀伤更有效的适宜拷贝数CArG/5HRE+ HSV-TK系统.方法 在Wistar大鼠颅内C6胶质瘤模型的基础上,构建不同拷贝数CArG/5HRE+ HSV-TK质粒(空质粒转染+伽玛刀照射组、HSV-TK+伽玛刀照射组、4CAG/5HRE启动子+伽玛刀照射组、9CArG/5HRE启动子+伽玛刀照射组、12 CArG/5 HRE启动子+伽玛刀照射组),通过脂质体转染到大鼠颅内胶质瘤组织中,对瘤组织伽玛刀放射外科治疗后取大鼠肿瘤组织.通过对瘤组织常规病理、瘤体细胞凋亡、HSV-TKmRNA及蛋白表达的观察,确定不同拷贝数CArG/5HRE+ HSV-TK系统辅助伽玛刀诱导HSV-TK表达及对C6胶质瘤杀伤效果.结果 各组肿瘤细胞均可见凋亡、破坏,CArG/HRE双启动子+伽马刀照射组更为明显(P＜0.05),尤以9CArG/5HRE启动子+伽马刀照射组为突出,凋亡率为(0.71±0.12)％ (P＜0.05);CArG/HRE双启动子+伽马刀照射组中HSV-TK mRNA及蛋白表达较无启动子组明显增加(P＜0.05),9CArG/5HRE启动子+伽马刀照射组为明显,HSV-TK mRNA的相对表达量为(0.84±0.09,P＜0.05).结论 在SRS治疗条件下,CArG/HRE双启动子能促进目的基因HSV-TK的表达,增加对C6胶质瘤细胞的杀伤,其中,9CArG/5HRE双启动子的作用明显.

脑卒中后抑郁患者前扣带回、海马灰质体积磁共振成像研究

目的 探讨脑卒中后抑郁(post-stroke dpression,PSD)患者前扣带回、双侧海马灰质体积的改变及其与抑郁严重程度的相关性.方法 13例脑卒中后抑郁患者(PSD组)和18例脑卒中后无抑郁患者(non-PSD组)接受3D高分辨率T1WI磁共振扫描,采用VBM-DARTEL方法对扫描获得的结构图像进行预处理,并将双侧海马及前扣带回作为感兴趣区(region of interest,ROI),后用双样本t检验比较PSD组与non-PSD组组间灰质体积差异.结果 与non-PSD组相比,PSD组患者双侧前扣带回(体素＞200)及双侧海马(左侧体素＞200,右侧体素＞200)体积下降差异具有统计学意义(P＜0.001,未校正),未发现灰质体积显著增加的区域.在PSD组中,显著下降的灰质体积与汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)评分及抑郁持续时间无显著相关关系(与HAMD评分:r双侧前扣带回=0.343,r左侧海马=0.356,r右侧海马=0.240;与抑郁持续时间:r双侧前扣带回=0.379,r左侧海马=0.452,r右侧海马=0.413;P＞ 0.05).结论 与原发性抑郁相似,卒中后抑郁患者也存在前扣带回和海马灰质体积下降,但海马和前扣带回灰质体积下降与抑郁严重程度无显著相关关系.

雷帕霉素对糖尿病肾病小鼠足细胞自噬的改善作用

目的 探讨雷帕霉素(Rapamycin)对糖尿病肾病小鼠肾小球足细胞自噬和损伤的影响,以及对糖尿病肾病的改善作用,阐明糖尿病肾病可能的发生机制.方法 健康雄性Balb/c小鼠48只,采用完全随机设计分组法分为柠檬酸对照组(n=12)、雷帕霉素对照组(n=12)、链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)组(STZ组,n=12)和STZ+雷帕霉素组(n=12).采用腹腔注射STZ制备糖尿病动物模型,成模后即给予小鼠腹腔注射雷帕霉素2 mg/(kg·48 h),雷帕霉素注射0、2、4、8、12周时分别测定各组小鼠血糖和体质量,12周时留取24 h尿标本,取肾脏称质量、检测24 h尿蛋白和肌酐,计算尿蛋白/肌酐值(UACR)和肾质量/体质量值(KW/BW).PAS染色观察肾组织病理改变,透射电镜观察肾小球足细胞自噬体大小和数量、细胞器损伤情况,Western blot检测足细胞自噬标志物LC3蛋白的表达变化,nephrin免疫荧光染色观察足细胞数量.结果 与对照组相比,STZ组小鼠血糖、UACR、KW/BW明显增高(P＜0.05),PAS染色发现肾小球基膜增厚,系膜基质增多,电镜提示足细胞足突增宽、融合,足细胞和自噬体数量减少,自噬活化标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显下降(P＜0.01).与STZ组比,雷帕霉素处理后STZ小鼠肾小球病理变化有所改善,足细胞和自噬体数量增多,细胞器损伤减轻,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值上调,UACR和KW/BW下降(P＜0.05),但血糖无统计学差异.结论 糖尿病小鼠腹腔注射雷帕霉素可以减轻肾小球病理改变和足细胞损伤,其作用可能与促进足细胞自噬有关,而维持足细胞自噬平衡可能是延缓糖尿病肾病进展的有效措施.

脂肪抑制质子加权成像和磁敏感加权成像诊断膝关节半月板撕裂对比研究

目的 比较脂肪抑制质子加权成像(fat-suppression proton density weighted imaging,FS-PDWI)和磁敏感加权成像(susceptibility weighted imaging,SWI)诊断膝关节半月板撕裂的诊断效果.方法 83例关节中心怀疑半月板损伤的患者,术前行3T MR FS-PDWI和SWI序列扫描,2名副高以上医师行影像诊断,以关节镜为金标准对照进行定性分析,并对图像质量进行半定量评分.对比FS-PDWI和SWI半月板撕裂处的信号噪声比(signal noise ratio,SNR)和与腓肠肌的对比噪声比(contrast to noise ratio,CNR)定量分析半月板撕裂处图像质量.结果 91处病变区2名医师的SWI诊断结果有极好的一致性(κ =0.839),综合其诊断结果得FS-PDWI诊断膝关节半月板撕裂的平均敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别是91.5％、83.3％、90.7％、98.0％和51.7％,SWI诊断的平均敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别是96.3％、83.3％、95.1％、98.1％和71.4％.两序列诊断半月板撕裂效果无显著性差异(P＞0.05).图像半定量评分FS-PDWI和SWI无显著性差异(P＞0.05).FS-PDWI和SWI的SNR分别为(26.25±6.47)和(33.94±6.41),有显著性差异(P＜0.05);CNR分别为(4.86±3.61)和(6.38±3.31),无显著性差异(P＞0.05).结论 磁敏感加权成像诊断膝关节半月板撕裂的敏感性、准确性和阴性检出率稍高于脂肪抑制质子加权成像,且有更好的信号噪声比.

靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂的制备及其体外寻靶研究

目的 制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂,鉴定其理化特性并观察其体外寻靶能力.方法 采用冷冻干燥超声法制备非靶向纳米超声微泡造影剂(N-N-Mb),通过生物素-亲和素桥连法,将生物素化的促黄体生成素释放激素(luteinzing hormone-releasing hormone,LHRH)与N-N-Mb连接,制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂(LHRH-N-Mb).观察微泡镜下形态以及室温下保存时间.zeta检测仪检测粒径范围、表面电位,流式细胞术检测二抗分别与LHRHN-Mb、N-N-Mb结合率,光镜下观察LHRH-N-Mb与LHRH受体过表达的人卵巢癌OVCAR-3细胞结合情况.结果 N-N-Mb、LHRH-N-Mb两种微泡成功制备,两者外观圆整,分布均匀,粒径大小分别为(372±45)、(511±64) nm,集中于360 nm与508 nm,两者粒径大小比较有统计学差异(P＜0.05).两种微泡电位分别为(-14.5±0.5)、(-14.6±0.8)mY.室温下保存16 d后,LHRH-N-Mb理化特性与刚制备时无统计学差异(P＞0.05).二抗与LHRH-N-Mb、N-N-Mb结合率分别为75.6％、0.83％,两者比较有统计学差异(P＜0.05).光镜下OVCAR-3细胞周围可见LHRH-N-Mb围绕或粘附,呈花环样结构,这种靶向结合能被生物素化的LHRH抗体预先阻断.结论 通过冷冻干燥超声法和生物素-亲和素桥连法,可成功制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂,此微泡粒径小、稳定性高,且能体外靶向高效结合人卵巢癌OVCAR-3细胞.

候选抑癌基因OPCML在人乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨候选抑癌基因OPCML(opioid-binding protein/cell adhesion molecule-like)在人乳腺癌组织中的蛋白表达及临床意义.方法 应用免疫组化方法检测117例人乳腺癌组织、41例癌旁组织及24例乳腺腺病组织中的候选抑癌基因OPCML蛋白表达情况,结合临床病理资料进行统计学分析.结果 117例人乳腺癌组织、41例癌旁组织及24例乳腺腺病组织中OPCML蛋白的阳性表达率分别为19.66％ (23/117)、90.24％(37/41)、70.83％ (17/24),3种乳腺组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05);在117例人乳腺癌组织中OPCML蛋白表达与组织学分级、淋巴结是否转移、pTNM分期显著相关(P ＜0.05);OPCML蛋白表达与Ki-67(r=-0.261)、HER-2(r=-0.294)、EGFR(r=-0.242)呈负相关关系(P＜0.05).结论 候选抑癌基因OPCML在人乳腺癌组织中呈现低表达或表达缺失,且与Ki-67、HER-2及EGFR的表达呈负相关,可能在乳腺癌的发展中起抑癌作用.

甲状腺功能亢进伴精神神经症状患者脑功能区研究

目的 研究原发性甲状腺功能亢进(甲亢)患者基础状态下自发脑功能活动特征及其与甲状腺激素、精神神经症状的相关性.方法 51例未治疗的甲亢患者为病例组,51例健康志愿者为对照组,汉密尔顿抑郁量表(HamiltonDepression Scale,HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)评估患者抑郁焦虑程度,运用静息态功能磁共振(resting-state fMRI,rfMRI)和局部一致性(regional homogeneity,ReHo)法,分析其脑部局部一致性,并进行两组比较.结果 甲亢组额上回、眶额叶和颞极ReHo值减弱;小脑蚓部ReHo值增强.小脑蚓部ReHo值与HAMA焦虑评分显著相关;额上回ReHo值在不同严重程度焦虑中差异显著,与甲状腺激素(FT3、FT4)及HAMD睡眠障碍因子显著相关;颞极ReHo值也与睡眠障碍因子相关.结论 甲亢患者在静息状态下存在异常脑功能区,并与甲状腺激素、情绪障碍相关,可能是其发生精神神经症状的病理生理机制之一.

肾透明细胞癌颅骨转移1例

1 临床资料患者女性,66岁,因“左颞部包块进行性长大2个月余”入院.患者于10年前在我院行左肾透明细胞癌根除术,术后予以行重组人白介素2及TNF-α等生物治疗,未行放化疗.查体:神清语晰,左颞部见一大小约4 cm×2 cm包块,活动度差,质韧,无压痛,局部无红肿,与周围组织分界清楚,双侧瞳孔等大等圆,直径3 mm,光反射灵敏,颈软,脊柱四肢无畸形,肌张力及肌力正常.

系统性红斑狼疮误诊再生障碍性贫血1例

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种全身性自身免疫病.活动性SLE常有全血细胞减少,由于免疫功能紊乱及长期免疫抑制剂的应用,易继发感染,出现发热、腹泻等症状,严重时常危及生命[1].再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)是一种获得性骨髓造血功能衰竭症,主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少和贫血、出血、感染综合征[2].在临床症状不典型且合并多系统表现时很难鉴别,易误诊、漏诊,现将我科收治的1例SLE误诊AA报告如下.

不典型胚胎发育不良性神经上皮瘤2例

胚胎发育不良性神经上皮瘤(dysembryoplastic neuroepithelial tumors,DNET)是一种少见的良性混合性神经元-神经元胶质细胞肿瘤[1],通常具有典型的临床表现和影像学特点,手术切除预后良好.现报告2例不典型DNET.

食管T细胞淋巴瘤合并食管鳞癌1例

1 临床资料患者,男性,54岁.因进行性吞咽困难半年余,于2012年1月入我院诊治.既往无特殊病史.入院查体:KPS评90分;全身浅表淋巴结未扪及;心肺腹无阳性体征.实验室检查提示血清LDH升高(455.84 U/L),余均在正常范围;上消化道钡餐造影发现:食管下段见长约4.9 cm充盈缺损,局部食管管壁僵硬、蠕动消失,考虑食管癌可能.进一步行胃镜检查提示:距门齿33～37 cm食管段见一新生物凸向腔内,其表面不平,中央凹陷,质脆(图1A).

宫内节育器异位致膀胱结石1例

1 临床资料患者,女性,49岁,因“安环10年,近半月取环失败2次”于2013年2月23日入院,患者因闭经6个月,半月前就诊本地医院,要求取环,“医生告知环可拉出一部分,但不能取出,考虑环嵌顿”,建议上级医院取环.3d前再次来我院门诊取环,B超检查提示:宫腔内未见节育环回声,宫颈管靠外口见长约0.9 cm条形强回声,后方伴彗尾征,行宫腔镜下取环,镜下见:宫腔内无环,于颈管内见一“V”型环(爱母环)一端,另一端嵌入子宫峡部下方颈管前壁肌层内,钳夹环一端,牵拉环不能取出,嵌顿紧密,反复尝试仍不能取出,遂放弃取环,收入院.

双相障碍患者家庭功能及亲密度适应性情况调查

目的 了解双相障碍患者与正常人群的家庭功能及亲密度和适应性的差异.方法 采用家庭功能量表(Family Assessment Device,FAD)及家庭亲密度与适应性量表中文版(Family Adaptability and Cohesion ScaleⅡ-Chinese Version,FACESⅡ-CV),对40例双相障碍患者(患者组)及40例健康志愿者(对照组)进行调查.结果 患者组家庭功能在问题解决(13.78 ±3.22)、角色(25.45 ±3.49)、行为控制(21.45 ±3.19)和总的功能(26.35 ±5.33)等方面的评分显著高于正常对照组(P＜0.05),患者组的家庭适应性评分显著低于正常对照组(44.33 ±7.74 vs 47.50 ±5.29,P＜0.05),家庭亲密度评分略低于正常对照组,但两者无显著性差异(66.08 ±9.57 vs 67.21 ±6.06,P＞0.05).实际家庭类型两组存在显著性差异(P＜0.05).结论 双相障碍患者的家庭功能状况较差,提示在疾病治疗及康复过程中,可以有针对性的加强家庭心理治疗干预.

溶栓前血糖与rt-PA治疗急性缺血性脑卒中患者预后的关系

目的 探讨溶栓前血糖与rt-PA治疗急性缺血性脑卒中患者预后的关系.方法 从2009年2月到2013年2月连续收集发病4.5h内rt-PA静脉溶栓治疗的急性缺血性脑卒中患者162例作为研究对象.采用改良的Rankin量表评价神经功能恢复状况.根据Rankin量表评分分为预后良好组(mRS评分0～1分)及预后不良组(mRS评分2～6分),并根据溶栓前血糖水平分为3组:血糖＜7.8 mmol/L组(血糖正常组),7.8 ～ 11.1 mmol/L组(血糖偏高组),血糖＞11.1 mmol/L组(高血糖组).结果 Logistic多因素回归分析显示溶栓前NIHSS评分、糖尿病、血糖,溶栓后2h及24 h收缩压是影响溶栓预后的因素.血糖偏高组和高血糖组颅内出血发生率、症状性颅内出血发生率、病死率、预后不良发生率与血糖正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 溶栓前血糖是影响溶栓预后的独立因素,溶栓前血糖≥7.8 mmol/L的急性缺血性脑卒中患者rt-PA静脉溶栓预后较差.

荞麦花叶黄酮对2型糖尿病大鼠血糖稳态的影响

目的 观察荞麦花叶黄酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL)对糖尿病大鼠血糖波动的影响.方法 以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,测定不同浓度FBFL对α-葡萄糖苷酶活性的影响;用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,用不同剂量FBFL干预6周,测定大鼠随机血糖、餐后血糖的动态变化,禁食24h内血糖波动及糖耐量情况.结果 FBFL对α-葡萄糖苷酶活性有明显的抑制作用,IC50为4.205 mg/L,与阿卡波糖(ACAR)的效价比约为15.24∶1;FBFL能降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值(P＜0.05),并改善糖耐量,有明显的剂量和时间依赖性.结论 FBFL可降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值,对血糖波动有稳定作用,其机制可能是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性实现的.

高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响

目的 观察高湿环境对肝脏异柠檬酸脱氢酶(IDH)与α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)含量的影响.方法 32只SD大鼠按随机数字表法分为常温常湿对照组及高湿环境20、30、40d组,每组8只大鼠.采用人工气候箱模拟高湿环境,条件设置为温度25℃、相对湿度90％ ～95％ RH.实验组大鼠每天置于箱中10 h,其余时间与常温常湿对照组饲养于清洁环境(温度22～26℃,相对湿度40％～60％ RH).动物模型制作完成后,取腹主动脉血及肝组织,酶联免疫法(ELISA)检测肝脏组织IDH及α-KGDHC,比色法检测血清乳酸含量,并行肝组织HE病理切片观察.结果 高湿环境20 d组,肝脏IDH、α-KGDHC及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化.高湿环境30、40d组,肝脏IDH含量分别降至常温常湿对照组的75.98％和79.90％ (P ＜0.05),α-KGDHC含量分别降至常温常湿对照组的80.00％和81.01％(P＜0.05).血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58％和23.33％ (P＜0.01).病理切片显示高湿环境40 d大鼠肝脏点状坏死灶增多.结论 高湿环境可致大鼠肝脏组织IDH、α-KGDHC含量降低,血乳酸升高,机体有氧代谢功能不足.

人乳腺癌相关成纤维细胞对MDA-MB-231细胞的影响

目的 探讨人乳腺癌相关成纤维(cancer associated fibroblasts,CAFs)细胞对MDA-MB-231细胞生长、增殖和侵袭的影响.方法 实验分2组:MDA-MB-231细胞单独培养组(对照组)和MDA-MB-231与CAFs细胞共培养组(实验组).以细胞计数法观察人乳腺癌CAFs细胞对MDA-MB-231细胞生长的影响;运用流式细胞术检测人乳腺癌CAFs细胞对MDA-MB-231细胞周期的影响;采用条件培养基,通过Transwell小室侵袭实验观察人乳腺癌CAFs细胞对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响.结果 与对照组比较,实验组MDA-MB-231细胞的生长速度明显增强(P＜0.05),细胞周期S期细胞百分比[(32.35±4.50)％]和细胞增殖指数PI[(42.91 ±2.44)％]明显增高(P＜0.05);在CAFs细胞的条件培养基下,MDA-MB-231细胞的侵袭能力明显增强(P＜0.01).结论 人乳腺癌CAFs细胞能够显著促进MDA-MB-231细胞的生长、增殖和侵袭.

抗菌药合理应用及管理:我们做了什么?离我们还有多远?

值得期待的新β内酰胺酶抑制剂阿维巴坦及其复合制剂

AI-2群体感应系统抑制剂:细菌生物膜感染的潜在新药

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的万古霉素低抑菌浓度漂移研究

目的 逐年分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值变化,评估是否存在万古霉素MIC漂移.方法 收集6家三甲医院2007-2011年临床分离的MRSA菌株,头孢西丁纸片法确认MRSA,微量肉汤稀释法测定菌株对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺及头孢西丁的MIC,计算MIC50、MIC90、MIC值几何均数、敏感率及耐药率.结果 2007-2011年,共收集非重复MRSA l 219株,所有菌株对万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺均敏感.各年MRSA对万古霉素MIC几何均值分别为0.952、0.956、0.947、1.013、1.040 μg/mL,呈渐进性上升趋势(P＜0.05),MIC＞1μg/mL菌株比例分别为23.5％、21.6％、27.8％、30.6％和42.8％,有逐年上升趋势(P＜0.05).替考拉宁对MRSA菌株几何均值分别为0.739、0.749、0.743、0.768、0.973,也呈渐进性上升趋势(P＜0.05).利奈唑胺对MRSA菌株几何均值分别为1.414、1.422、1.386、1.410、1.221,无渐进性上升趋势(P＞0.05).结论 我国临床分离株MRSA对万古霉素存在MIC漂移现象,呈逐年上升趋势.

2012年广东地区细菌耐药监测分析

目的 了解2012年广东地区细菌耐药性监测网所属44所医院临床分离株的耐药情况,通过和2010年本地资料比较,明确广东地区的耐药特点.方法 采用纸片扩散法(KB法)和自动化仪器对66 470株临床分离株作药敏实验.以2012年CLSI标准判断药敏结果.结果 66 470株细菌中革兰阳性菌占27.9％(18 515/66470),革兰阴性菌占72.1％(47 955/66 470).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.6％和73.0％.未发现万古霉素中介株(VISA)或耐药株(VRSA).肺炎链球菌(非脑膜炎分离株)对青霉素耐药率为2.6％.在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBLs株的检出率分别为54.7％、36.8％和18.9％.肠杆菌科细菌产ESBLs株对监测药物的耐药率比非产ESBLs株高.对不动杆菌属(鲍曼不动杆菌占92％)耐药率低的依次是米诺环素(21.1％)、头孢哌酮/舒巴坦(25.9％)和阿米卡星(32.5％).与2010年本地资料相比,鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率已由29.7％增加至46.1％,美洛培南耐药率由31.6％增加到44.2％,但仍然比2010年全国范围内的鲍曼不动杆菌碳氢酶烯类耐药率(亚胺培南53.5％和美洛培南51.9％)低.结论 总体耐药形势虽有所改善但仍然相当严峻,其中不动杆菌属对碳青霉烯类耐药问题表现为突出.耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)检出率的逐年增加给临床治疗带来了巨大的挑战,急需加强耐药性的监测以指导临床抗生素的合理运用.

质子泵抑制剂对危重监护病房医院获得性肺炎发展及预后的影响

目的 探讨质子泵抑制剂(proton pump inhibitors,PPI)对危重监护病房(ICU)内医院获得性肺炎(hospitalacquired pneumonia,HAP)患者感染发展和预后的影响.方法 回顾性调查某教学医院2011年入住ICU,并存在误吸危险因素的HAP患者临床资料,根据是否使用PPI分组,对照分析2组肺炎进展和预后情况,并分析PPI剂量对肺炎的影响.结果 符合入选条件者共65例,PPI组患者45例,对照组为20例.基线调查2组基础疾病和各项感染指标,均无统计学差异.经过1周综合治疗后,PPI组与对照组患者相比,体温(40％)、白细胞计数(62.2％)、氧合指数(75.6％)、动脉血气pH值(51.1％)及A-aDO2异常者(77.8％)较多;影像学上可观察到PPI组更易出现感染灶增多情况(51.1％),更易合并血流感染(40.0％);评估抗感染治疗效果PPI组较差,28 d死亡率较高(37.8％),差异具有统计学意义(P＜0.05).PPI剂量对HAP感染加重与否无明显影响(P＞0.05).结论 使用PPI的HAP患者抗感染治疗效果较未使用者差,且预后欠佳.在HAP的治疗中,需慎重应用PPI.不同的PH剂量,对肺炎发展影响不明显.

碳青霉烯类耐药雷氏普罗威登斯菌的出现及其耐药机制研究

目的 报告1株临床分离产NDM-1酶雷氏普罗威登斯菌FR90,研究其耐药机制.方法 对菌株进行药物敏感实验,改良Hodge实验检测金属β内酰胺酶,PCR扩增碳青霉烯水解酶基因.采用质粒接合实验、质粒不相容群检测、S1酶切脉冲场电泳和blaNDM-1杂交、基因测序等分析携blaNDM-1质粒特征和基因环境.结果 菌株FR90对氟喹诺酮类、多粘菌素B、β内酰胺类(包括碳青霉烯类)抗生素耐药,对氨曲南敏感.改良Hodge实验阳性,PCR检测几种常见碳青霉烯水解酶基因,结果仅blaNDM-1基因阳性.接合实验显示blaNDM-1基因位于一可接合性质粒上,质粒不相容群分型属于A/C型,Southern杂交结果显示质粒大小约为50 kb.对质粒上大小约为17 kb基因片段的测序结果示,ISAba125位于blaNDM-1基因两侧,下游依次为trpF、groS、groL基因和insE基因的一部分.结论 中国大陆出现临床分离产NDM-1酶雷氏普罗威登斯菌,警示我国需对产NDM-1细菌进行严密监测,并采取感染控制措施以阻断耐药基因在细菌之间传播.

中国健康受试者左氧氟沙星片单剂及多剂药代动力学研究

目的 研究中国健康志愿者口服左氧氟沙星片单剂及多剂给药的药代动力学特征.方法 ①单剂给药组:单剂空腹口服200、500 mg或700 mg左氧氟沙星片,每剂量组9例受试者;②多剂给药组:9例受试者接受左氧氟沙星500 mg,每天1次,连续7d多剂给药.采用高效液相色谱法测定血、尿样本中左氧氟沙星浓度.结果 ①受试者单剂空腹口服左氧氟沙星片200、500、700 mg后血药峰浓度(Cmax)分别为(2.43±0.63)、(7.03±2.47)、(8.96±1.95) mg/L,药时曲线下面积(AUC0～∞)分别为(17.07±1.52)、(54.76±8.74)、(85.54 ±9.12)mg·h/L,消除半衰期(T1/2)均大于7h,给药后72 h内累积尿排出率大于80％.②多次给药第7天与初次给药第1天的Cmax、C24h、AUC0 ～24h的比分别为1.041 5、1.031 4、1.126 3、经过7d的反复给药,与吸收分布有关的参数并不增大,显示体内无蓄积性.给药第7天给药后24 h为止的累积尿中排泄率为86.56％.③左氧氟沙星500 mg每天1次给药方案对肺炎链球菌等能达到药动学/药效学(PK/PD)靶值.结论 受试者口服左氧氟沙星片后吸收迅速,主要经肾脏消除.多剂给药后无蓄积.不良反应轻微、受试者均能耐受.PK/PD结果提示左氧氟沙星片500 mg每天1次给药方案用于由肺炎链球菌等引起的下呼吸道感染,预期可获得良好的临床和微生物疗效.