第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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青蒿琥酯通过活性氧自噬途径增加小鼠巨噬细胞杀菌活性
目的 研究青蒿琥酯(artesunate,AS)通过增加小鼠巨噬细胞的自噬水平进而上调其杀菌活性的药理作用及机制.方法 分离及体外分化培养获得原代小鼠骨髓巨噬细胞.细菌计数实验分为大肠埃希菌(E.coli,EC)组、EC+ AS组和EC+AS+抑制剂组(3-MA和Ly294002),建立EC感染细胞模型,给予AS和抑制剂处理,采用平板培养法检测胞内活菌数量.自噬和活性氧检测实验分为medium组、AS组、AS+自噬抑制剂组和AS+活性氧清除剂组[还原型谷胱甘肽(GSH)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)],RT-PCR和Western blot法检测自噬体标志物的表达,荧光探针法检测胞内活性氧水平.结果 经定向分化后,获得形态良好的原代巨噬细胞.细菌计数实验结果显示,与EC组比较,EC+ AS组细胞胞内EC数量显著减少(P＜0.01),且具有剂量和时间效应关系.EC+ AS+自噬抑制剂组和EC+AS+活性氧清除剂组细胞胞内细菌较EC+ AS组显著升高(P＜0.01).自噬和活性氧检测结果显示,sAS组较medium组自噬基因LC3B和Atg5的mRNA和蛋白表达均明显升高,且具有剂量效应关系(P＜0.01).AS+自噬抑制剂组或AS+活性氧清除剂组自噬蛋白的表达较AS组明显降低,AS+活性氧清除剂组ROS水平较AS组也显著降低(P＜0.05).结论 青蒿琥酯能够增加巨噬细胞的杀菌活性,且该作用与其上调细胞活性氧水平,进而激活细胞自噬效应有关.
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成年鼠被毛毛乳头细胞分离方法的建立与评价
目的 寻求一种简单高效的分离培养小鼠被毛毛乳头细胞的方法.方法 取5周龄C57小鼠背部皮肤,刮去毛发后予0.2％Ⅰ型胶原酶37℃消化2h,刮下毛球部,经过2次Ficoll密度梯度离心后,得到纯净的毛乳头进行培养.检测毛乳头贴壁率、毛乳头细胞特异性标记表达及其体内毛囊重建能力.结果 该分离方法能显著降低工作强度,减少污染机会,获得的毛乳头贴壁快、细胞迁出快.qRT-PCR、细胞免疫荧光实验结果均证实体外培养的小鼠被毛毛乳头细胞可表达与毛囊诱导能力相关的特异性标记物ALP、β-catenin及Versican,且与触须毛乳头细胞相比差异无统计学意义(P＞0.05).体外培养的小鼠被毛毛乳头细胞具有诱导毛囊再生的能力.结论 胶原酶消化结合Ficoll梯度离心是一种简单、有效地分离获取小鼠背部毛乳头的方法.
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半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1活化在胆红素神经毒性中的作用研究
目的 明确半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)活化是否参与胆红素神经毒性的发生机制;VX-765抑制caspase1活化是否能抑制胆红素神经毒性,发挥神经保护作用.方法 建立胆红素脑病动物模型,Western blot检测脑组织caspase-1蛋白的表达,ELISA法检测炎症因子IL-1β的水平,免疫荧光染色检测脑组织中GFAP蛋白的表达;VX-765干预后动态观察各组新生鼠的神经系统临床表现,记录新生鼠体质量变化,评估生活能力.原代培养大鼠皮层星型胶质细胞分为胆红素组、VX-765组、对照组:改良MTT法检测细胞存活率,Western blot检测细胞caspase-1蛋白的表达,ELISA法检测培养液上清IL-1β的水平.结果 胆红素脑病动物模型,建模后12 h,胆红素组较对照组,脑组织中活化型caspase-1表达增加(P＜0.05),IL-1β水平增高(P＜0.01),脑组织切片皮层区星型胶质细胞活化(P＜0.05).与胆红素组相比,VX-765组新生鼠建模后异常神经系统表现减少(P＜0.01),生活能力改善(P＜0.05).原代培养大鼠皮层星型胶质细胞,胆红素干预6h后,活化型caspase-1表达显著高于对照组(P＜0.05);与胆红素组相比,VX-765干预可抑制caspase-1活化(P＜0.05),提高细胞存活率(P＜0.05),减少培养液上清IL-1β的释放(P＜0.01).结论 胆红素可诱导活化型caspase-1表达增加;VX-765抑制caspase-1活化可减轻胆红素神经毒性,提高原代培养星型胶质细胞存活率,减少炎症因子释放.
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Nutlin-3a-PLGA微球促大鼠脊髓损伤后的运动功能恢复
目的 探讨Nutlin-3a-PLGA微球对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的影响.方法 采用单乳化法制备Nutlin-3a-PLGA微球.健康成年SD大鼠采用随机数字表法分为单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组,每组12只;另取3只大鼠进行正常脊髓铬化青染色.对T1o脊髓进行右半横断损伤.单纯损伤组仅行脊髓右半横断损伤而不给予干预,生理盐水微球治疗组术后予以生理盐水微球治疗,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组术后予以Nutlin-3 a-PLGA微球治疗.术后2、4周行铬化青染色观察脊髓脱髓鞘情况,术前1d,伤后2、3、4周行Catwalk步态分析正常步序比、站立时间、足印平均强度、两后爪脚间距离以及相对足印距离5个时间-空间参数评价大鼠运动功能变化.结果 伤后4周与单纯损伤组(1 461.44±123.46)和生理盐水微球治疗组(1 347.33±114.42)比较,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组(1 879.46±115.41)铬花青染色显示脱髓鞘病变较轻(P＜0.05),髓鞘排列较为紧密.与术前比较,术后2周单纯损伤组和生理盐水微球治疗组Catwalk步态分析各项行为学参数差异有统计学意义(P＜0.05);Nutlin-3 a-PLGA微球治疗组正常步序比、两后爪脚间距离以及相对足印距离差异有统计学意义(P＜0.05),左后肢站立时间和前肢足印平均强度差异无统计学意义(P＞0.05).与单纯损伤组和生理盐水微球治疗组比较,Nutlin-3 a-PLGA微球治疗组伤后2周左后肢站立时间、左右前肢足印平均强度降低,正常步序比增加;伤后4周单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组两后爪脚间距离分别为3.20±0.89 cm,3.23±0.90 cm,2.29±0.36 cm,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组与其余两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组左侧相对足印距离分别为10.17±6.40 cm、9.75±6.92 cm和2.85±1.72cm,右侧分别为7.63±4.78 cm、8.21±4.82 cm和3.00±2.07 cm;Nutlin-3a-PLGA微球治疗组与其余两组比较左右两侧相对足印距离差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 Nutlin-3a-PLGA微球局部作用能促进脊髓后半损伤大鼠传导功能及运动功能的恢复,对损伤节段轴突的再生可能有促进作用.
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时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究
目的 研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ (pepsinogens Ⅰ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能.方法 以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PG Ⅰ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符合率.结果 试纸定量检测的线性良好,方程为Y=0.027 9+0.004 8X,r=0.997 8;灵敏度为0.27 μg/L;批内CV小于10％,批间CV11.03％;与市售PG Ⅰ试剂平行检测489份血清样本,有良好的相关性(YTRFIA =0.856 6Xstrip+7.545 6,R2 =0.989 1,P＜0.01).结论 PG Ⅰ时间分辨荧光纳米微球免疫层析试纸操作简单、快速、经济、可定量,满足临床检测血清PG Ⅰ的需求.
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膜粘连蛋白Ⅱ通过保护血脑屏障促进小鼠颅脑创伤后早期神经功能的恢复
目的 评估外源性重组膜粘连蛋白Ⅱ(annexin 2,A2)对创伤性颅脑损伤后血脑屏障以及早期神经功能预后的影响,探讨A2蛋白作为脑创伤治疗靶点的可能性.方法 在成年雄性小鼠上建立控制性皮质损伤模型(controlled cortical impact,CCI),检测伤前与伤后不同时间点伤侧半球脑组织中内源性A2蛋白的表达.随后,小鼠CCI伤后通过尾静脉注射重组人源性A2蛋白,并检测血脑屏障通透性、大脑半球组织含水量、紧密连接蛋白表达量、海马区神经元数量、伤灶体积及早期行为学改变.结果 从CCI后3d起,A2蛋白表达明显增高,并在7d时达到高峰(P＜0.05),此后蛋白表达逐渐下降,21 d恢复到基值;伤前内皮细胞几乎不表达A2蛋白,伤后在伤侧部分内皮细胞表达A2蛋白.在伤后2h给予重组A2蛋白能显著降低血脑屏障通透性从而降低脑组织中Evans蓝(Evans blue,EB)渗出量(P＜0.05),增加ZO-1蛋白表达(P＜0.05),减少伤后CA1和CA3区神经元丢失,CA1区和CA3区平均神经元存活数量分别为159.5和131,6,均显著高于对照组(P＜0.05),并促进伤后7d内运动功能康复(P＜0.05).能够减少致伤后脑组织含水量,但不具有统计学差异(P＞0.05),两组间伤灶体积也无统计学差异(P＞0.05).结论 在创伤性颅脑损伤早期,给予重组人A2蛋白能提高内皮细胞ZO-1合成,保护血脑屏障,减轻神经组织继发性损伤,促进伤后神经功能恢复.
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适度运动对人体肠道菌群结构的影响
目的 适度运动有益于身心健康.本研究从肠道菌群结构的角度来探讨运动对人体健康的影响.方法 招募运动组和少动组志愿者人群,利用16S rDNA高通量测序技术分析志愿者肠道菌群结构.结果 高通量测序共获得61 888个OTUs,其中已注释的OTUs有61 149个.PCoA分析显示,运动组和少动组之间肠道菌群结构存在显著差异.运动组中毛螺菌科(Lachnospiraceae)和拟杆菌科(Bacteroidaceae)的丰度显著高于少动组(P=2.5627×10-7,P =0.000 178 4),普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)和韦荣氏球菌科(Veillonellaceae)的丰度显著低于少动组(P=0.000 003 46,P=0.000017 41).有3株可培养的菌株在运动组中丰度显著增加,分别为瘤胃球菌属的Ruminococcus_sp.5_1_39BFAA,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及丁酸产盐菌属的Anaerostipes_hadrus.在运动组中显著增加的肠道菌,如拟杆菌科,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及Anaerostipes_hadrus,能够代谢产生丰富的SCFAs,对肠粘膜免疫系统动态平衡的维持具有重要意义.结论 运动可能通过肠道菌群结构的改变及其与肠黏膜系统的相互作用对人体产生积极影响.
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基于社区管理的原发性高血压患者血压控制效果的影响因素研究
目的 对重庆市双碑社区开展的社区居民高血压随访资料进行研究,了解随访效果和血压控制效果并对其影响因素进行分析,为更有效地开展高血压社区干预提供依据.方法 对双碑社区自2014年经二级以上医疗机构确诊的原发性高血压患者进行随访管理.采用问卷调查和体格检查,了解血压控制效果和影响因素.结果 纳入随访管理的高血压患者共3 362例,70％以上的高血压患者后1次血压和平均血压都控制在正常范围内.62.4％的高血压患者的血压管理效果为优良,不良的比例为15.4％.多因素Logistic回归发现随访方式为家庭访视或门诊随访、心理调整良好、摄盐量为轻、服药规律、吸烟控制较好、饮酒控制较好、运动时间长可促进高血压管理效果良好.结论 双碑社区2014年高血压患者的管理效果良好.加强健康教育,改善患者的不良生活行为,加强心理调适,能达到更好的管理效果.
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单操作孔胸腔镜联合腹腔镜在McKeown食管癌根治术中的应用评估
目的 评估单操作孔胸腔镜联合腹腔镜在McKeown食管癌根治术中的安全性及可行性.方法 分析广西壮族自治区人民医院心胸外科2015年1月至2016年1月40例接受McKeown食管癌根治术的中下段食管癌患者资料,其中11例行单操作孔胸腔镜联合腹腔镜McKeown食管癌根治术(single-utility incision total endoscopy McKeown esophagectomy,sTEME),29例行三孔胸腔镜腹部开放McKeown食管癌根治术(three-port thoracoscope combined with laparotomy McKeown esophagectomy,tTLME),比较两组的术中情况、手术结果及术后并发症的发生率.结果 两组在胸部手术时间、胸部术中出血量及胸部淋巴结清扫数量方面差异无统计学意义(P＞0.05);sTEME组的腹部手术时间较tTLME组长(P＜0.05),腹部术中出血量、术后24 h疼痛指数评分及术后住院时间优于tTLME组(P＜0.05).两组腹部淋巴结清扫数、术后重症监护时间、术后并发症发生率及术后6个月淋巴结复发转移情况差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单操作孔胸腔镜联合腹腔镜McKeown术治疗中下段食管癌可行,虽然会延长手术时间,但手术创伤小、住院时间短、近期效果满意.
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老年患者结肠镜诊疗相关肠道准备质量的影响因素分析
目的 探讨老年患者结肠镜诊疗相关肠道准备质量的影响因素,为针对性干预提供依据.方法 前瞻性纳入我院拟行结肠镜诊疗的老年(≥65岁)患者120例,采用聚乙二醇(PEG)电解质散3L分次方案进行肠道准备,采用Holden步行功能分级标准(FAC)评估患者行走能力,采用波士顿评分标准(BBPS)评估患者肠道准备质量,单因素和多因素Logistic回归分析影响老年患者结肠镜检查肠道准备质量的因素.结果 本组肠道准备质量BBPS评分为(6.57±0.72)分,肠道准备充分率为68.3％ (82/120).单因素分析发现,合并糖尿病(P =0.002)、脑卒中(P=0.005)、服用三环类抗抑郁药(P =0.029)、行走困难(P =0.001)是老年患者肠道准备质量差的影响因素(P=0.05).多因素分析发现,合并糖尿病(OR=2.54,95％ CI:1.08 ～ 3.16,P=0.015)、行走困难(OR=4.36,95％ CI:2.37 ～13.41,P=0.003)是老年患者肠道准备质量差的独立危险因素(P=0.05).结论 糖尿病、行走困难是老年患者结肠镜诊疗相关肠道准备质量差的独立危险因素,临床上应重点加强对此类人群的干预.
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内镜下治疗结肠息肉在日间病房与住院病房中的回顾性病例对照研究
目的 对比结肠息肉患者在日间病房与住院病房中的治疗效果、患者满意度差别.方法 收集我科2013年10月至2014年9月日间病房结肠息肉(病灶≤1.0 cm)患者100例与住院病房同类患者100例,两组患者均行肠镜下治疗.采集两组患者临床基本信息,统计住院时间、住院费用、服务满意率、手术并发症发生率、院内感染发生率、局部复发率、完整切除率,并运用t检验及X2检验对比.结果 两组患者临床基本信息差异无统计学意义,日间病房组较普通病房组的住院时间、住院费用、院内感染率低,服务满意率高,差异有统计学意义(P＜0.01),两组患者病灶完整切除率、局部复发率、手术并发症发生率、院内感染率、术后局部复发率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 日间手术病房模式较住院病房模式治疗效果无差别,但可降低院内感染率、治疗费用,缩短治疗周期,提高患者治疗获益程度.
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轻中度血管狭窄重构模式与斑块易损性的高分辨磁共振研究
目的 应用高分辨磁共振成像技术评估轻中度狭窄的颈动脉血管重构模式,探讨血管重构模式与颈动脉斑块在缺血性脑卒中事件发生、发展中的关系.方法 纳入经超声诊断颈动脉粥样硬化,且斑块≥2 mm发生急性缺血性脑梗死或短暂性脑缺血的患者32例,进行高分辨磁共振斑块成像.根据斑块的信号、表面纤维帽的完整性判定斑块的稳定情况;同时测量斑块厚层面、远端及近端参考点的总管腔、管壁面积,计算出管壁标准化指数、重构指数(remodeling index,RI)、斑块负荷及斑块大小.RI≥1.05为正性重构(positive remodeling,PR),RI＜1.05为非正性重构(non-positive remodeling,non-PR).比较PR组与Non-PR组测量指标的差异,并对重构模式与斑块易损性进行相关性分析.结果 共检出55个颈动脉斑块,PR组与Non-PR组在总管腔、管壁面积、管壁标准化指数上差异无统计学意义(P＞0.05),两组斑块负荷及斑块大小差异有统计学意义(P ＜0.001).重构模式与斑块易损性的相关性分析差异无统计学意义(x2=0.532,P＞0.05).结论 轻中度血管狭窄早期以PR为主,重构模式与斑块的易损性无正性相关,斑块自身成分的变化是导致缺血性脑卒中事件发生至关重要因素.
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非酒精性脂肪性肝病患者肝组织水通道蛋白表达差异与多烯磷脂酰胆碱疗效相关性分析
目的 分析非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者肝组织水通道蛋白(aquaporin,AQPs)3、7、9表达水平对多烯磷脂酰胆碱(plyene posphatidyl coline,PPC)疗效的影响.方法 分析2014-2016年本院收治的NAFLD患者87例,按病程分组:肝硬化组(n=30),肝纤维化组(n=24),肝炎组(n=33);超声疗效评估分组:有效组和无效组.随访不同病程的NAFLD患者PPC治疗前后的肝功能酶变化,按照PPC疗效进行分组,比较患者肝组织AQP3、7、9蛋白的表达差异,并进一步分析PPC疗效与AQPs表达水平的相关性.结果 PPC对NAFLD患者治疗整体有效率35.63％,PPC对NAFLD疗效与病程严重程度无关,但与超声的评分密切相关,表现为按照超声评分有效和无效分组的不同病程组患者的谷丙转氨酶(ALT)在PPC治疗后,在每种病程患者中差异有统计学意义,且ALT在PPC治疗后,其变化程度与超声的变化程度呈正相关,肝硬化组(R=0.780,P＜0.01),肝纤维化组(R =0.879,P＜0.01),肝炎组高(R=0.900,P＜0.01).PPC治疗NAFLD效果与患者初始的肝组织AQPs的表达存在相关性:NAFLD患者肝组织AQP7、9表达量与肝功能酶的变化量呈正相关(AQP9:R=0.972,AQP7:R=0.537),而AQP3的表达水平与肝功能酶的变化量呈负相关(R=-0.881);AQP7、9表达量与超声评分的变化量呈正相关(AQP9:R=0.763,AQP7:R=0.311),而AQP3的表达水平与肝功能酶的变化量呈负相关(R=-0.795).结论 多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪性肝病的疗效与水通道蛋白表达差异密切相关,提示AQPs表达水平可能影响PPC疗效.
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PI-RADS V2提高前列腺癌影像诊断效能的价值评估
目的 探讨前列腺影像报告和数据系统第2版(PI-RADS V2)提高前列腺癌影像诊断效能的应用价值.方法 初级、中级、高级职称医师各3名,根据各自经验分别对符合入组标准的76例前列腺MRI图像进行经验评分,然后根据PI-RADS V2的评分标准进行2次评分.分析2次PI-RADS V2评分及3个层次医师PI-RADS V2评分的一致性.计算并比较3个层次医师经验评分与PI-RADS V2评分的相关性、经验诊断与PI-RADS V2诊断结果的一致性,对比前列腺癌检出的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,并绘制ROC曲线.结果 2次PI-RADS V2评分结果高度一致,3个层次医师PI-RADS V2评分具有较好一致性,3个层次医师经验诊断评分与PI-RADS V2评分正相关(r值分别为0.672、0.805、0.890).3个层次医师及PI-RADS V2诊断正确率呈递增趋势,无效率呈递减趋势,错误率3个层次医师呈递减趋势,PI-RADS V2错误率略高于高级医师.ROC曲线结果显示高级医师的诊断准确性高,其次为PI-RADS V2.PI-RADS V2诊断敏感度高,其次为高级医师.高级医师特异度高,其次为PI-RADS V2.结论 PI-RADS V2具有良好的可重复性,对于中级、初级医师,PI-RADS V2可以显著提高其对前列腺癌影像诊断效能.
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横结肠袢式造口术在先天性肛门直肠畸形分期手术中应用的临床研究
目的 探讨并总结横结肠袢式造口术在先天性肛门直肠畸形患儿分期治疗中的优缺点.方法 回顾性分析62例先天性肛门直肠畸形患儿行预防性横结肠袢式造瘘术后的临床表现及相关重要辅助检查;综合分析该造口手术对先天性肛门直肠畸形患儿整个治疗过程的影响,并分析原因.结果 ①62例患儿二期和三期术前血常规结果显示分别有21例(33.9％) vs 22例(35.5％)发生轻度贫血;无重度及极重度贫血发生.②62例患儿二期和三期术前分别有5例(8.1％)vs1例(1.6％)出现轻度低蛋白血症.③62例患儿二期术前外周血电解质检查显示,7例(11.3％)出现轻度电解质紊乱,其中6例在三期术前完全恢复,无高氯血症发生.④62例患儿尿常规结果显示,二期和三期术前分别有19例(30.7％)vs4例(6.4％)尿液白细胞数目异常,数目为(124.42±106.33) vs (74.75±52.89)个/μL,仅有1例出现明显尿路感染症状.⑤57例患儿在二期术前经横结肠造口行远端造影均能明确异常瘘管位置,与术中发现完全一致(100％),并将造影测得直肠盲端与肛隐窝间距离(34.63±6.01)mm,与术中实际测得距离(37.33 ±6.17)mm比较,差异无统计学意义(t=0.066,P＞0.05).⑥62例患儿造口随访观察结果显示无严重肠管回缩及脱垂.结论 横结肠袢式造口术应用于先天性肛门直肠畸形患儿分期治疗,具有操作简单,并发症少,且对患儿营养状况及生长发育无严重不良影响.
