神经解剖学杂志
Chinese Journal of Neuroanatomy 신경해부학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国解剖学会，第四军医大学
- 影响因子： 0.53
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-7547
- 国内刊号： 61-1061/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠空间学习记忆和海马NMDAR1表达的影响
目的:观察银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆(VaD)大鼠空间学习记忆和海马N-甲基-D-天冬氨酸型离子型谷氨酸受体1型亚单位(NMDARl)表达的影响.方法:采用四血管阻断法制备VaD大鼠模型,设立假手术组、模型组、尼莫地平组(10 mg/kg/d,灌胃30 d)和银杏叶提取物组(50 mg/kg/d,灌胃30 d).利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆的改变,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠海马神经元NMDAR1蛋白水平的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NMDAR1的mRNA表达变化.结果:与假手术组相比,模型组大鼠水迷宫逃避潜伏期延长,撤后台靶象限平均探索次数减少(P＜0.05),银杏叶提取物明显改善了VaD大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆成绩(P＜0.05)；假手术组、尼莫地平组与银杏叶提取物组之间比较无统计学差异(P＞0.05).模型组大鼠的NMDAR1蛋白及其mRNA在海马CA1区的表达水平较假手术组明显降低(P＜0.05)；银杏叶提取物组大鼠海马的NMDAR1蛋白及mRNA表达水平较模型组明显升高(P＜0.05).结论:银杏叶提取物可以减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤,这可能与上调海马组织内NMDAR1蛋白及mRNA的表达密切相关.
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Nnat基因在大鼠脑发育过程中表达的初步研究
目的:观察Nnat基因在大鼠脑发育过程中基因表达的变化规律,藉以探讨Nnat在神经系统发育过程中的作用.方法:采用半定量RT-PCR法分析出生前后大鼠脑内Nnat表达水平的变化,Western blot检测Nnat 蛋白的表达.结果:在大鼠胚胎第9 d(E9)脑内Nnat mRNA开始表达,但表达量较低,以后其表达量逐渐升高,出生前有轻微下调.出生后大鼠的不同脑区Nnat mRNA的表达量都呈现下降趋势,60 d时达到较低的水平.Nnat蛋白在不同脑区都具有表达,但不同亚型蛋白量的相对比例不同.结论:Nnat基因在胚胎期及出生后大鼠脑内的表达量与中枢神经系统发育及分化过程的时间上有一定的同步性,提示Nnat的作用可能与神经元分化的调节有关.
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新生大鼠离体海马神经元原代培养方法及鉴定
目的:建立一种稳定的生后大鼠离体海马神经元的培养方法.方法:无菌环境下将出生24 h内SD大鼠断头取脑分离海马,经消化后差速贴壁,采用无血清培养基进行培养,倒置显微镜下观察不同时间段细胞生长形态变化:采用Hoechst33258与NeuN抗体双染方法鉴定神经元.结果:采用差速贴壁后,使用无血清培养基培养的神经元生长良好,纯度较高,12 d时经鉴定神经元纯度可以达到92％以上.结论:差速离心法后可以采用无血清培养神经元,培养的神经元具有纯度高,结果稳定的优点,该方法为以后进行相关的研究奠定了基础.
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移植BDNF修饰骨髓间充质干细胞对帕金森病模型大鼠TH表达的影响
目的:观察移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)对帕金森病模型大鼠TH表达的影响.方法:采用电穿孔法将pIRESneo-EGFP-BDNF转染至骨髓MSCs；通过脑内注射6-OHDA制备PD大鼠模型,随机分为Sham组,PD组,MSCs组,BDNF组,经侧脑室移植MSCs或pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs,术后2、4、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为,移植BDNF修饰骨髓MSCs在大鼠脑组织内的迁移,采用免疫组化及Western blot方法测定各组大鼠中脑黑质TH蛋白表达的变化.结果:移植术后2、4、8周MSCs组和BDNF组大鼠与PD组比较旋转次数明显减少(P＜0.05),以BDNF组较MSCs组比较改善更为明显(P＜0.05),移植细胞干预PD模型大鼠8周后中脑黑质TH表达,BDNF组较MSCs组、PD组明显增高(P＜0.05),移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs可以在PD大鼠脑内存活,并迁移至远处.结论:经侧脑室移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰的骨髓MSCs通过提高中脑黑质TH的活性,能够明显改善PD模型大鼠的行为能力.
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抑郁模型大鼠海马神经元再生变化及加味温胆汤的干预研究
目的:探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠海马神经元再生变化的影响.方法:以孤养结合慢性不可预见性应激抑郁模型大鼠为研究对象,在实验第7、14、21、28 d,采用免疫荧光双标技术检测各组大鼠海马神经元增殖与分化的再生变化情况.结果:在抑郁形成过程中,大鼠海马神经元NeuN/BrdU、β-tubulinⅢ/BrdU双标细胞数逐渐降低,至21、28 d时模型组NeuN/BrdU、β-tubulinⅢ/BrdU双标阳性细胞数明显减少,经中、西药治疗后,大鼠海马神经元NeuN/BrdU、β-tubulinⅢ/BrdU双标阳性细胞数下降趋势得到抑制,与模型组比较增加明显(P＜0.05或P＜0.01).结论:抑郁形成过程中海马神经元增殖与分化减少的再生障碍渐次加重,加味温胆汤可逆转此现象.
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膀胱二聚体Cajal间质细胞的超微结构及其对ATP的电反应
目的:为证明膀胱二聚体Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)发挥起搏作用提供超微结构和功能学证据.方法:电子显微镜下鉴定组织和培养的豚鼠膀胱二聚体ICC并观察ICC之间的超微联系；体外分离、培养豚鼠膀胱ICC,运用细胞膜片钳技术观察ATP(100 μmol/L)刺激下二聚体ICC和单体ICC的兴奋性差别.结果:二聚体ICC中两个ICC细胞胞体紧密相连,细胞之间的间隙小于20 nm,存在大量缝隙连接,局部细胞膜融合,形成联胞体.在ATP(100 μmoL/L)的刺激下体外培养的二聚体ICC的内向电流幅度为286.9±26.4 pA,显著大于单体ICC的内向电流幅度163.8 ±18.6pA (P＜0.01).结论:二聚体ICC具有形成高兴奋起搏电流的超微结构基础,高兴奋性的二聚体ICC可能才是逼尿肌的起搏细胞.
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异丙酚预处理对心肺复苏后大鼠学习记忆能力及海马神经元的保护作用
目的:观察异丙酚(propofol,PPF)预处理对心肺复苏后大鼠学习记忆能力的影响以及海马神经元的保护作用.方法:将80只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、复苏+英脱利匹特对照组(R+intralipid)、复苏+异丙酚低剂量预处理组(R+ PPF 10 mg/kg)、复苏+异丙酚高剂量预处理组(R+PPF 50 mg/kg).实验组窒息前10 min腹腔注射10％异丙酚10 mg/kg或50 mg/kg.建立大鼠心肺复苏模型,并在复苏后3d进行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,海马Nissl染色观察神经元损伤情况,Western blot检测caspase-3的表达变化.结果:与正常对照组大鼠相比,复苏后大鼠出现明显的学习记忆能力的降低(P＜0.05),异丙酚预处理则能显著改善复苏导致的行为学改变(P＜0.05).Nissl染色结果表明,心肺复苏后大鼠海马CA1区神经元排列稀疏、紊乱,细胞间隙增大.异丙酚预处理(10 mg/kg或50 mg/kg)后,神经元的数量和排列模式均有显著改善.Western blot结果显示心肺复苏后,海马caspase-3的表达显著升高.而异丙酚预处理(10 mg/kg或50 mg/kg)组caspase-3的表达与英脱利匹特对照组相比显著降低(P＜0.05).结论:异丙酚预处理可能通过改善心肺复苏后的神经元损伤而发挥脑保护作用.
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人参皂甙-Rd对SNI大鼠痛敏异常及孤束核内P物质和NK-1受体表达的影响
目的:通过观察人参皂甙-Rd(G-Rd)对坐骨神经分支选择损伤(spared nerve injure,SNI)大鼠痛敏异常及延髓内脏带孤束核内P物质(substance P,SP)和NK-1受体表达的影响,探讨G-Rd的镇痛机制.方法:成年雄性SD大鼠30只,随机分为五组:空白对照组(blank control)、假手术组(sham operation)、SNI组、SNI+saline组(腹腔注射,i.p.)、SNI+ G-Rd组(i.p.).行为学检测应用von Frey纤维测定上述各组大鼠手术侧后肢机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical thresholds,PWMT)；用免疫荧光组织化学染色法,在激光扫描共聚焦显微镜下,对比检测上述各组间孤束核(NTS)内SP样免疫阳性产物和NK-1样免疫阳性产物的平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI).结果:SNI模型组术后10 d,于术侧后肢的PWMT值(4.63 g)明显低于正常对照组和假手术组(18.20～20.30 g),术后20d达到低阈值(2.38 g)；而SNI+ G-Rd组的PWMT值(4.67 g)则明显高于SNI组和SNI+ saline组(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示:术后20 d时,SNI组NTS内SP样和NK-1样免疫荧光的平均强度明显高于空白对照组和假手术组(P＜0.05)；但SNI+ G-Rd组的SP样和NK-1样免疫荧光的平均强度则明显低于SNI组和SNI+ saline组(P＜0.05).结论:人参皂甙-Rd可以明显改善SNI引起的痛敏异常,其机制之一可能与其有效减少NTS内SP和NK-1受体的表达有密切关系.
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电针对内脏痛模型大鼠结肠壁、背根节和脊髓内AchE和CGRP表达的影响
目的:观察电针治疗内脏痛对结肠壁、背根节和脊髓内胆碱酯酶(AchE)和降钙素基因相关肽(CGRP)免疫阳性物质表达的影响,以探讨AchE和CGRP免疫阳性物质在痛觉传递中的作用及电针镇痛的机制.方法:26只SD大鼠随机分为正常对照组(6只)、内脏痛组(VP组,10只)和电针+内脏痛组(EA+ VP组,10只).电针取双侧“足三里”穴刺激60 min,运用酶组织化学技术和免疫组织化学技术,观察电针刺激对福尔马林所诱发的大鼠盆腔内脏痛时,结肠壁、背根节和脊髓内AchE和CGRP免疫阳性物质表达的影响.结果:内脏痛组大鼠在注射福尔马林后,结肠壁、背根节和脊髓内AchE免疫阳性物质的表达显著高于正常组(P＜0.01),CGRP免疫阳性物质的表达显著低于正常组(P＜0.01)；而电针+内脏痛组,结肠壁、背根节和脊髓内AchE免疫阳性物质的表达显著低于内脏痛组(P＜0.01),CGRP免疫阳性物质的表达又显著高于内脏痛组(P＜0.01).结论:电针对大鼠急性盆腔内脏痛具有预防性治疗作用,Ach和CGRP可能参与了电针对内脏痛的调节作用.
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大鼠ZnT1基因siRNA慢病毒载体构建及筛选
目的:构建并筛选针对SD大鼠锌离子转运体1(ZnT1)的siRNA慢病毒载体.并检测其在大鼠神经元中的作用.方法:设计并合成针对ZnT1基因的3条(A,B,C)siRNA序列与1条阴性对照序列,将以上序列退火与pFU-GW-iRNA质粒相连接,通过测序鉴定后,分别与慢病毒包装质粒共感染293T细胞,检测收获病毒滴度后感染体外培养的SD大鼠脑皮层神经细胞,设置感染复数(MOI)分别为1,3,6,8,于转染后72 h计算转染效率.在佳MOI值下,设置未经病毒感染组(CON组)、阴性对照病毒感染组(NC组)和慢病毒阳性干扰组(ZnT1-siR-NA-A组,ZnT1-siRNA-B组,ZnT1-siRNA-C组),72 h后利用Western blot技术检测ZnT1的表达情况,确定对ZnT1蛋白的有效的干扰序列与抑制效率.结果:测序证实目的干扰序列已被准确克隆到pFU-GW-iRNA质粒,收获的慢病毒颗粒滴度为8×108 TU/ml,其在MOI=6时对神经细胞的转染效率高(93％),并保持神经细胞良好的生存状态.转染后ZnT1的表达被不同程度的抑制,A,B,C三种干扰序列对ZnT1的抑制率分别为47.74％±1.40％,81.19％±1.36％,94.10％ ±2.41％.结论:成功构建了ZnT1-siRNA慢病毒载体,其在MOI=6时对神经细胞具有佳的转染效率,并有效沉默神经细胞中ZnT1蛋白的表达.
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体外模拟海马神经再生微环境下的NSCs增殖和向神经元分化
目的:探讨用切割穹窿海马伞海马提取液在体外模拟体内海马神经再生微环境下,对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和向神经元分化的影响.方法:分别制备正常侧和切割穹窿海马伞侧海马提取液.实验分为对照组、正常组和切割组,分别在海马NSCs中加入DMEM/F12培养基、含正常侧海马提取液及切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基.用WST-8和Ki67/Sox2免疫荧光检测NSCs的增殖,用DCX免疫荧光检测NSCs向神经元的分化情况.结果:切割组与正常组及对照组相比,WST-8检测OD450比值明显增高(P＜0.05);Ki67阳性细胞和Sox2阳性细胞的比例均明显增高(P ＜0.001).结论:用切割穹窿海马伞侧海马提取液在体外模拟海马神经再生微环境,可以促进海马NSCs的增殖和向神经元的分化.
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EGb761对血管性痴呆大鼠海马齿状回神经干细胞增殖分化的影响
目的:探讨中药银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马齿状回(DG)NSCs增殖分化的影响及机制.方法:采用双侧颈总动脉夹闭再灌注同时腹腔注射硝普纳建立VD模型,在15d,1,2,4个月等时间点,采用Morris水迷宫检测和BrdU和/或神经颗粒素(Ng)标记的免疫荧光单标和双标技术分别观察大鼠的学习记忆能力变化和NSCs的增殖与功能分化情况.结果:(1)模型组大鼠的逃逸潜伏期(EL)均明显长于假手术组(P＜0.01),药物组大鼠的EL较模型组明显缩短(P＜0.05),但仍长于假手术组(P＜0.01).(2)免疫荧光标记显示,各个时间点,药物组DG区NSCs在增殖分化的数量、强度和持续时间上,都明显优于假手术组和模型组.结论:EGb761能促进VD模型大鼠神经干细胞的增殖分化,显著改善VD大鼠的学习记忆能力.
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人参皂甙Rd对大鼠大脑中动脉栓塞模型NMDA受体磷酸化的影响
目的:研究人参皂甙Rd(Ginsenoside Rd,GSRd)对大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型损伤后,NMDA受体NR2B亚基的表达及其磷酸化的影响.方法:建立大鼠MCAO模型,并在术前及术后给予人参皂甙Rd,之后进行神经行为学评分,通过TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色观察脑梗死体积变化,采用Western blot方法检测脑缺血区不同时间点NR2B及其磷酸化的Ser1303及Tyr1472的表达情况.结果:GSRd能够改善大鼠神经行为学评分,减小模型大鼠脑梗死体积；MCAO模型大鼠脑缺血损伤处的NR2B亚基、磷酸化Ser1303及Tyr1472的表达量均较假手术组升高；在MCAO术前及术后给予GSRd,能够有效降低损伤侧NR2B亚基、磷酸化Ser1303及Tyr1472的表达量,并且GSRd对于上述各项表达量的影响呈剂量依赖性.结论:人参皂甙Rd能够有效降低MCAO模型中NR2B及磷酸化Ser1303及Tyr1472的水平,提示人参皂甙Rd可能是通过调节脑缺血再灌注损伤后NMDAR中NR2B亚基及该亚基磷酸化Ser1303、Tyr1472位点的水平,从而发挥其对脑缺血再灌注损伤的保护作用.
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大鼠VGLUT2基因shRNA慢病毒载体转染原代培养脊髓神经元对VGLUT2表达的影响
目的:探讨新构建的可以表达针对2型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporter 2,VGLUT2)短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体能否有效地感染大鼠脊髓原代培养神经元,并鉴定其对培养神经元内VGLUT2基冈的特异性干扰效果,从而为进一步在整体动物脊髓水平研究VGLUT2的功能提供有力的工具.方法:首先分别将已筛选到的两对互补并靶向作用于编码大鼠VGLUT2序列两个位点的特异性shRNA序列和一个阴性对照的寡核苷酸,克隆到pGCSIL-GFP质粒(经Age(Ⅰ)和EcoRI双酶切)载体内,经酶切、测序鉴定及转染293T细胞,包装得到病毒颗粒.然后将筛选出的慢病毒感染体外分离、培养的胚胎大鼠脊髓神经元,将培养的原代神经元分为正常组、阴性对照组、VGLUT2-shRNA-1组和VGLUT2-shRNA-2组,在荧光显微镜下分别观察GFP的表达情况；同时运用Westernt blot检测各组VGLUT2蛋白的表达水平.结果:免疫荧光检测显示,阴性对照组、VGLUT2-shRNA-1组和VGLUT2-shRNA-2组脊髓原代培养神经元均能观察到明显的GFP荧光,表明这些神经元已被慢病毒载体高效转染；但VGLUT2 shRNA-1组和VGLUT2 shRNA-2组神经元VGLUT2的表达量明显低于正常组和阴性对照组.Western blot结果显示,VGLUT2-shRNA-1组和VGLUT2-shRNA-2组的VGLUT2蛋白的表达量与正常组和阴性对照组相比明显有所下降,分别占正常组的62.42±1.12％和66.07±1.33％ (P ＜0.05),但VGLUT2-shRNA-1组和VGLUT2-shRNA-2组之间无显著性差异(P＞0.05)；阴性对照组与正常组相比亦无明显差异(P＞ 0.05).结论:VGLUT2-shRNA-1组和VGLUT2-shRNA-2组重组慢病毒载体均能有效地感染原代培养脊髓神经元,并高效下调其神经元内目的基因VGLUT2的表达.
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不同时程吗啡依赖对大鼠中脑腹侧被盖区多巴胺能神经元的影响
目的:观察不同时程吗啡依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)多巴胺能神经元的影响.方法:建立吗啡慢性依赖大鼠模型,石蜡包埋组织连续切片,免疫组织化学染色观察多巴胺能神经元特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达变化.结果:TH免疫组化结果显示随着吗啡依赖时间的延长VTA区内TH阳性细胞逐渐减少,吗啡依赖6周组阳性细胞减少明显.结论:较长时程吗啡依赖大鼠VTA多巴胺能神经元损伤明显.
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三叉神经根慢性压迫损伤对大鼠三叉神经尾侧亚核内WDR神经元电活动的影响
目的:观察三叉神经根慢性压迫损伤对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核(caudal subnucleus of the spinal trigeminal nucleus,Vc)内广动力范围(wide dynamic range neurons,WDR)神经元自发放电和诱发放电活动的影响.方法:通过慢性压迫损伤三叉神经根的方法建立三叉神经痛(TN)动物模型,采用在体细胞外记录技术观察空白对照组和TN模型组大鼠Vc内WDR神经元的自发放电和诱发的放电活动.结果:对照组和TN模型组大鼠Vc内WDR神经元自发放电频率分别为0.84 ±0.15 Hz和3.18 ±0.59 Hz；口面部感受野分别给予刷、压、夹机械刺激后,对照组大鼠Vc内WDR神经元的诱发放电频率分别为3.27±1.28 Hz、5.62±0.74 Hz和6.76±1.22 Hz,而TN组大鼠诱发放电频率则分别为7.85 ±1.57 Hz、10.04 ±0.72 Hz和12.04±1.77 Hz.结论:TN模型组大鼠Vc内WDR神经元的自发放电频率和诱发放电频率均显著高于对照组大鼠,提示三叉神经根慢性压迫损伤可诱导Vc内WDR神经元兴奋性增强.
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中介素在各系统的研究进展
在20世纪60年代人们就发现了降钙素基因相关肽超家族,它初包括5个成员:降钙素(CT),胰岛淀粉样多肽(IAPP),两种降钙素基因相关肽(CGRP)和肾上腺髓质素(ADM)[1],这些肽类激素在不同的器官和组织调节人体的动态平衡,发挥重要作用.2004年,研究人员又发现了CGRP超家族的新成员中介素(intermedin,IMD),因为人类的前体ADM和前体IMD的氨基酸和核苷酸序列几乎一致,而且在功能上具有一定相似性,所以有人也称其为ADM2[2].本文将从中介素的生物学特性,分布与受体,以及各系统的中介素相关新研究进展方面展开综述如下.
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Mst3b对损伤神经元轴突再生作用的研究进展
脊髓损伤主要由车祸、坠落等外创伤引起,其发病率约为每年236 ～1009例/百万人.患者常伴有损伤平面以下感觉、运动功能不同程度的丧失,严重影响患者的生存及生活质量,给患者、家庭、社会带来沉重的压力和负担,因此治疗脊髓损伤是患者及社会的迫切需要[1].
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外周神经节卫星胶质细胞的研究进展
目前,针对胶质细胞的研究已经成为神经科学的研究主流之一,对其认识也越来越深入.在中枢神经系统中,胶质细胞具有支持和引导神经元的迁移、参与神经系统的修复和再生、形成髓鞘及血脑屏障、参与免疫应答、物质代谢和营养、以及参与神经细胞外氢离子浓度的维持等作用[1].与之相比,有关外周神经系统胶质细胞的研究较少,本文着重综述外周神经节卫星胶质细胞研究的新进展.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
