中国医学科学院学报杂志
Acta Academiae Medicinae Sinicae 중국의학과학원학보
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医学科学院，北京协和医学院
- 影响因子： 1.49
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-503X
- 国内刊号： 11-2237/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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面肩肱型肌营养不良症染色体4q35和10q26的易位
目的了解面肩肱型肌营养不良症(facioscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD)患者及中国正常人群中染色体4q35和10q26易位的分布状况.方法采用BglⅡ-Bln I剂量检测方法,对70名FSHD患者、55名FSHD患者的亲属及52名正常人的染色体4q35和10q26易位的分布状况进行研究.结果 (1)正常人群中4q35和10q26之间总的易位率为19.23%,其中4q35至10q26的易位率为9.62%,10q26至4q35的易位率为9.62%.(2)FSHD患者中4q35和10q26之间总的易位率为18.57%,其中4q35至10q26的易位率为12.86%,10q26至4q35的易位率为5.71%.结论在中国正常人群与FSHD患者中,染色体4q35和10q26之间较频繁地发生易位,两组之间的易位率差异没有显著性.
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X线照射促进大鼠脊髓损伤区结构及损伤后功能的恢复
目的探讨X线照射能否促进大鼠压迫型脊髓损伤区结构及损伤后功能的恢复.方法70只Sprague-Dawley大鼠均接受胸2节段的脊髓损伤,然后被随机分为2组,照射组在损伤后14 d接受X线照射,对照组则不接受任何治疗.所有大鼠分别在脊髓损伤后第3、7、14、21、28、35和42天接受后肢运动、斜板及后肢疼痛反射等3项脊髓功能测定,43 d将所有实验大鼠处死后取出脊髓损伤标本,进行组织学检查.结果70只实验鼠中符合设计要求的共62只,其中照射组32只,对照组30只.X线照射组大鼠的后肢运动恢复及斜板测定均明显优于对照组,两者之间的差异有显著性(P＜0.01),而疼痛反射两组间差异无显著性.照射组大鼠脊髓损伤部位的水肿及坏死区域明显少于对照组,而神经元数目则明显多于对照组.结论X线照射可通过改善脊髓损伤区结构来促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复.
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阿尔茨海默病Aβ人抗体可变区片段基因的克隆和表达
目的筛选出β淀粉样蛋白40(Aβ40)的人源抗体单链可变区片段,克隆单链抗体的基因并在原核生物大肠杆菌表达,为阿尔茨海默病的诊断和治疗开辟新的途径.方法先将Aβ40包被在免疫反应板上,后用来自正常人外周血淋巴细胞的单链抗体文库结合.经过5轮的生物淘金法筛选,从后一轮噬菌体感染的大肠杆菌TG1中随机挑选55个克隆进行ELISA测试,筛选出Aβ40特异的单链抗体并对其进行基因测序.将人源抗体单链可变区片段基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,转化大肠杆菌BL21表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的单链抗体.结果ELISA测试表明,55个克隆中有33个克隆能结合Aβ40,Aβ40对10个克隆的竞争抑制率达到50%以上,而其中5个克隆的抗原结合表位在Aβ40的氮基端1～16个氨基酸之间.DNA测序结果发现,Aβ40单链抗体基因由768 bp组成,推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构.将单链抗体基因克隆到原核表达系统中诱导表达,得到相对分子质量为55 000的GST融合抗体表达产物.结论利用非免疫途径筛选出阿尔茨海默病发病中起关键神经元毒性作用的Aβ40的人源抗体单链可变区片段,为该抗体的表达和临床应用打下了基础.
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甲状腺钙化性病灶与甲状腺癌
目的研究甲状腺钙化对诊断甲状腺癌的意义.方法对比817例次甲状腺结节术前彩色二维超声检查与术后病理诊断.结果所有患者术前超声钙化检出率为18.1%(148/817),钙化总发生率为19.6%(160/817),良性疾病发生率为13.1%,恶性疾病发生率为53.5%,两者相比差异有显著性(P＜0.01);良性疾病微钙化发生率为2.9%,恶性疾病微钙化发生率为38.6%,两者相比差异有显著性(P＜0.01);甲状腺癌钙化的发生与年龄无关.结论甲状腺钙化特别是微钙化对甲状腺癌的诊断意义重大,是目前诊断甲状腺癌特异性高的指标.
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裂侧鼻翼瓣和鼻翼软骨悬吊法矫正单侧唇裂继发鼻畸形
目的探讨矫正唇裂继发鼻畸形的更有效方法.方法将裂侧鼻翼较之对侧不对称的"多余"组织形成皮瓣,用于加高或再造鼻孔基底、重新调整鼻孔大小及形状.游离裂侧鼻翼软骨外侧脚并转移至正常位置固定.结果19例患者用此种方法手术后,在两侧鼻翼、鼻孔、鼻孔基底、鼻小柱等方面基本对称,取得满意效果.结论裂侧鼻翼瓣加鼻翼软骨悬吊法是一种有效矫正唇裂鼻畸形的方法.
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应用显微切割-cDNA PCR-SSH法克隆胃癌前病变相关基因
目的构建胃异型增生组织cDNA消减文库,初步筛选差异表达基因.方法手工显微切割取胃异型增生和正常组织,应用cDNA PCR方法对少量组织全转录组扩增后进行双向抑制性消减杂交(suppression subtractivehvbrdization,SSH),消减后片段与载体连接、克隆、筛选、测序及同源性检索,并用斑点杂交方法验证检测结果.结果正常和异型增生组织互为tester和driver成功构建了2个cDNA消减文库,分别代表在异型增生组织中表达上调和下调基因,测序的26个克隆中15个为已知基因,3个为已知EST,8个为新的EST,GenBank登录号为BQ164614～BQ164616,BQ291516～BQ291520,其中15个片段经证实在胃异型增生阶段有显著表达差异.结论利用本室创建的显微切割-cDNA PCR-SSH法成功构建胃异型增生组织cDNA消减文库,初步筛选部分基因,为寻找胃癌发生相关基因提供重要线索.
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颈动脉体瘤的诊断及外科治疗
目的探讨颈动脉体瘤的诊断及外科治疗.方法回顾性分析了1983年1月～2002年6月间我院收治的38例患者的41个颈动脉体瘤的临床资料.结果38例患者术前均常规行B超及血管造影,诊断符合率分别为95%和98%.手术切除肿瘤38个,其中12例行颈外动脉切断、颈内动脉部分缺损修补、动脉体瘤切除术;11例行颈外动脉切断、动脉体瘤切除术;8例行单纯瘤体切除术;6例行颈外动脉切断、颈内动脉重建术;1例行动脉体瘤切除,颈内、颈外、颈总动脉部分切除术.结论对于可疑颈动脉体瘤患者,术前应常规行B超及颈部血管影像重建.早期、一次手术切除及术中颈内动脉血供重建是治疗及降低手术并发症的关键.
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肥胖对吸入麻醉药异氟醚用量的影响
目的观察肥胖对吸人麻醉药异氟醚摄取、排出及临床作用的影响.方法采用体重指数(body mass index,BMI)作为肥胖的判断标准,将26名腹腔镜胆囊切除术患者分为肥胖组(A组,BMI≥27,n=13)和正常体重组(N组,BMI≤24,n=13).两组患者采用标准的异氟醚吸人麻醉,麻醉中监测吸人气及呼出气中麻醉气体浓度,计算异氟醚摄取分数,记录苏醒时间、血压、心率等循环指标.结果A组患者在各观察点所需要的挥发罐浓度为(1.8±0.3)%,均明显高于N组的(1.5±0.1)%(P＜0.05或P＜0.01).A组异氟醚的摄取分数在各观察点均明显高于N组(P＜0.05,P＜0.01或P＜0.001).停止吸人异氟醚后,两组呼气末异氟醚浓度下降50%的时间及苏醒时间均无显著性区别.结论肥胖组患者需要吸人较高的异氟醚浓度,以补偿机体对异氟醚摄取的增加,从而满足其临床需要;在本研究时间(66±33)min内,这种摄取量的增加尚未对异氟醚体内排出过程及临床作用产生显著影响.
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外周血B细胞上糖肌醇磷脂连接蛋白的表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用
目的评价外周血B细胞上糖肌醇磷脂(glycosylphosphatidylinositol,GPI)连接蛋白之一CD59的表达能否作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal noctumal hemoglobinuria,PNH)的指标.方法采用流式细胞术双色免疫荧光分析法,结合B细胞特异性抗体CD20,分析92例外周血标本B细胞和中性粒细胞上CD59的表达,并通过临床指标评价方法,分析该指标临床应用的可行性.结果健康人B细胞上CD59均为完全阳性表达,表达率的参考范围为(96.3±1.2)%;PNH患者B细胞上CD59的表达率降低,均出现阴性或部分阳性病态细胞,病态细胞表达率为10.5%～92.3%;92.9%(26/28)非PNH贫血患者B细胞上CD59的表达均在正常参考范围内.该方法精密度的变异系数(coefficient variation,CV)值小于4.4%,标本染色后无固定剂情况下可稳定保存24h,与常规检测CD59的方法(即中性粒细胞上CD59检测法)比较,PNH阳性和阴性检出符合率均高达100%.结论采用流式细胞术检测B细胞上CD59的表达具有简单、准确、重复性好的特点,可以成为诊断PNH的新指标.
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川芎嗪对D-半乳糖损伤模型小鼠学习记忆及胆碱能系统的影响
目的探讨川芎嗪对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)损伤模型学习记忆和胆碱能系统功能的影响.方法C57BL/6J小鼠颈背部皮下注射2%D-gal 100mg@kg-1@d-1,连续40 d制造D-gal损伤模型.第3周起各组分别用生理盐水(正常对照组、模型组)、川芎嗪(高、低剂量组)和哈伯因(阳性对照组)灌胃.第6周起进行Morris水迷宫测试,连续5 d.行为测试结束后,进行大脑皮层乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性测定和M受体的放射性配基结合分析.结果与正常对照组相比,D-gal模型组学习记忆能力、AchE活性和M受体含量均明显下降(P＜0.05),川芎嗪尤其是在100 mg@kg-1@d-1剂量时可明显改善学习记忆功能,增强胆碱酯酶活性(P＜0.05),上调M受体数目(P＜0.005).结论川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善中枢胆碱能系统功能.
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干扰素诱导蛋白10在干燥综合征患者唇腺中的异常表达
目的探讨干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein 10,IP-10)是否参与干燥综合征唇腺的炎性反应.方法对49例干燥综合征患者行唇腺活检,所得标本进行HE染色,检测并计数4 mm2组织中淋巴细胞浸润灶.对其中39例(原发性干燥综合征21例,继发性干燥综合征5例,其他疾病13例)行RT-PCR检测.提取总RNA并反转录成cDNA.根据IP-10 cDNA序列设计特异引物.以唇腺标本cDNA为模板,同时加入IP-10和β-actin的特异引物行PCR共扩增.扩增产物电泳后测量IP-10和β-actin相应条带的光密度,计算两者光密度的比值,对标本中IP-10 mRNA的表达水平进行半定量分析.对21例唇腺标本(原发性干燥综合征10例,继发性干燥综合征3例,其他疾病8例)行免疫组织化学染色.对11例标本同时完成RT-PCR和免疫组织化学检测.结果干燥综合征患者唇腺标本IP-10与p-actin RT-PCR共扩增后光密度比值为0.329±0.157,而非干燥综合征患者为0.099±0.059,两者相比差异有显著性(P＜0.01).继发性与原发性干燥综合征患者唇腺标本中IP-10的表达差异无显著性.IP-10与β-actin光密度比值与干燥综合征患者唇腺标本中淋巴细胞浸润灶计数呈正相关(τ=0.657,P＜0.05).免疫组织化学结果显示,10例原发性于燥综合征唇腺中有8例为阳性(8/10),而继发性干燥综合征3例均为阳性(3/3),8例其他疾病中仅1例原发性胆汁性肝硬化为阳性(1/8).干燥综合征唇腺中导管上皮细胞及少数浸润的淋巴细胞有IP-10着色,而腺上皮细胞未着色.同时进行RT-PCR和免疫组织化学检测的11例标本显示两者结果一致.结论IP-10在干燥综合征患者唇腺的导管上皮细胞中有异常表达,可能在炎性反应中发挥趋化淋巴细胞到达组织局部的重要作用.
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一氧化氮参与前庭代偿机制
目的探讨一侧耳前庭功能丧失后,一氧化氮(NO)在中枢代偿机制中的作用.方法将18只豚鼠双侧耳后造瘘,然后随机分为2组:a组6只,为对照组,给予左耳滴人生理盐水;b组12只,为实验组,给予左耳连续滴人庆大霉素.在5、10 d时,两组各取一半动物处死,然后取听泡、脑干做冰冻切片进行免疫组织化学反应.结果a组豚鼠双侧壶腹嵴、前庭神经核皆有一氧化氮合酶(NOS)阳性表达.b组豚鼠5 d后,右侧壶腹嵴、前庭神经核为NOS阳性,左侧皆为阴性;10 d时,右侧壶腹嵴为NOS阳性,双侧前庭神经核、左侧壶腹嵴为NOS阴性.结论当一侧前庭损伤,对侧前庭神经核NOS表达的改变,可能是前庭代偿机制之一.
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99Tcm-HYNIC-TOC-生长抑素受体肿瘤显像的临床应用
目的评价自制生长抑素受体显像剂99Tcm-HYNIC-TOC在生长抑素受体阳性肿瘤诊断中的应用价值.方法采用本室自己制备的HYNIC-TOC药盒,对44例患者进行99Tcm-HYNIC-TOC显像,其中包括神经内分泌源性肿瘤22例,非神经内分泌源性肿瘤10例,以及对照病例12例.所有病例均经手术病理证实,并有临床实验室检查或1～2项其他影像检查结果.静注99Tcm-HYNIC-TOC 370 MBq后,于1、4 h行局部及全身显像,阳性病例行单光子发射/X线透射断层显像(SPECT/CT).4例病例曾行111in-pentetreotide显像,10例行肾上腺髓质显像(1311-MIBG)对照,1例非霍奇金淋巴瘤患者行治疗前后的99Tcm-HYNIC-TOC显像.结果32例中共检出生长抑素受体阳性肿瘤19例,99Tcm-HYNIC-TOC显像在生长抑素受体阳性肿瘤的灵敏度、特异性和准确性分别为82.6%、100%、87.5%.99Tcm-HYNIC-TOC的分布与111In-pentetreotide基本类似,表现为正常的肝、脾和肾的摄取.注射后1 h显像,99Tcm-HYNIC-TOC在肿瘤中有较高的摄取.99Tcm-HYNIC-TOC显像在6例病例中首先检出肿瘤病灶.与131I-MIBG显像比较,99Tcm-HYNIC-TOC显像检出更多病灶.1例非霍奇金淋巴瘤患者治疗后的显像与治疗前比较,病变缩小.结论99Tcm-HYNIC-TOC可有效地定位与诊断生长抑素受体阳性肿瘤.
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冠状动脉搭桥术患者围术期褪黑激素的分泌节律
目的研究冠状动脉搭桥术患者围术期褪黑激素和考的松的分泌节律.方法选择11名择期在低温体外循环下行冠状动脉搭桥术的男性患者进行研究.麻醉诱导和维持采用异丙酚(3 mg@kg-1@h-1)持续静脉泵注,辅以芬太尼(15 μg/kg)静脉注射.在术中特定时间点、术后即刻阶段以及术后第2、3天每3 h抽血1次,分别用放射免疫和酶联免疫方法测定血浆褪黑激素和考的松浓度.结果术中血浆褪黑激素低于低测定水平,但在术后即刻阶段,血浆褪黑激素呈低水平但没有节律性变化.在术后第2～3天,10名患者血浆褪黑激素呈节律性分泌,并与外界光线强度呈负相关(r=-0.480,P=0.01).在术后即刻阶段,血浆考的松水平显著高于麻醉诱导前水平(P＜0.01).在术后第2～3天,只有3名患者恢复了考的松的昼夜节律性分泌.结论在冠状动脉搭桥术中及术后即刻阶段,褪黑激素和考的松的分泌紊乱.
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近视患者准分子激光原位角膜磨镶术后动、静态对比敏感度的变化
目的观察近视患者准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)后动、静态对比敏感度的变化.方法对2002年2月～2002年6月在我院接受LASIK手术的37例近视和近视散光患者(共73眼)进行了术前,术后1、3、6个月的视力,裂隙灯,散瞳眼底,散瞳检影验光,角膜地形图,动、静态对比敏感度0.7、1.4、2.7、5.5、11、22频率段的观察.结果LASIK术后1个月动态对比敏感度和静态对比敏感度较术前普遍下降,静态对比敏感度在2.7、5.5、11(P＜0.01)和22 cpd(P＜0.05)有显著性下降,11cpd敏感;而动态对比敏感度则在5.5(P＜0.01)、11cps(P＜0.05)下降有统计学意义,11cps敏感;≥6.25 D近视组和≥2DC散光组下降更明显.术后3个月,动、静态对比敏感度各频率段逐渐恢复并超过术前水平,术后6个月继续提高.静态对比敏感度所有频率段均超过术前水平(P＜0.01),而动态对比敏感度在2.7、5.5、11cps(P＜0.01)超过术前水平,≤6.0 D近视组和＜2.0 DC散光组提高更明显.频率越高,提高率越大,以22 cpd和22 cps明显.而≥2 DC的散光组,动态对比敏感度在术后6个月无显著提高,且1.4 cps段还低于术前水平(P＜0.05).结论LASIK术后病例确实有暂时的对比敏感度下降,但是在术后3个月可恢复并超过术前水平,术后6个月有进一步提高.
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胰腺粘液性囊性肿瘤的影像诊断
目的回顾性分析胰腺粘液性囊性肿瘤的影像学表现,探讨影像学检查对该类肿瘤的诊断价值.方法对18例经病理证实的胰腺粘液性囊性肿瘤影像学资料进行分析.结果超声(ultrasonography,US)、X线计算机断层摄影术(computed tomography,CT)、磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)均可明确肿瘤的囊性性质,其中CT和MRI对肿瘤的定位诊断准确(100%);部分肿瘤(9/18)具有典型的影像学表现.与临床资料相结合可进一步提高肿瘤的定性诊断准确率.结论影像学检查对胰腺粘液囊性肿瘤术前评价具有重要的价值.
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成人隐匿性自身免疫糖尿病研究的新进展
成人隐匿性自身免疫糖尿病(latent autoimmune diabetes in adults,LADA)属于自身免疫性缓慢起病的1型糖尿病,但其早期临床表现与2型糖尿病相似.LADA与经典1型糖尿病的自身免疫发病机制相同,不同之处在于其胰岛β细胞所受免疫损害呈缓慢性,因此LADA可作为进行1型糖尿病免疫学研究的一种人类模型.LADA的诊断目前尚无统一的国际标准,应从临床特征、易感基因、细胞和体液免疫标志、组织病理等方面综合考虑,其中胰岛自身抗体是诊断LADA的重要指标.早期应用胰岛素治疗有助于保护部分LADA患者残存的胰岛细胞功能.研究具有不同抗体滴度LADA患者的病理改变有助于了解β细胞的免疫破坏进程,尝试新的免疫干预措施,从而可能为1型糖尿病的预防甚至治愈提供依据.
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蛋白质模板印迹法制备纳米“孔穴”结构特异性生物材料
以蛋白质为模板进行分子印迹得到的纳米"孔穴"结构生物材料,可以作为抗体、酶或其他天然生物结构的替代物及细胞支架材料,在生物技术和医学领域显示出广阔的应用前景.本文简要介绍了模板印迹的基本原理,分析了蛋白质模板印迹的特点,详细介绍了蛋白质包埋法、微球表面印迹法、平板表面印迹法和抗原表位法等蛋白质模板印迹方法,并对各种印迹方法进行了简要评述.
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CCR5:抗HIV-1药物的新靶点
CCR5为细胞膜蛋白,属于G蛋白偶联受体家族的成员,是HIV-1入侵机体细胞的主要辅助受体之一.在过去的几年中,对CCR5的生物学特性以及在HIV感染过程中所起作用的研究取得了明显的进展,以CCR5为靶点的HIV受体拮抗剂倍受关注,主要有以下4种:(1)趋化因子衍生物;(2)低分子量非肽类;(3)单克隆抗体;(4)肽类化合物.本文综述了近年来CCR5和以其为靶点的HIV受体拮抗剂的研究进展.
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临床诊断的SARS患者鼻咽拭子采集、SARS冠状病毒分离及鉴定
目的从临床诊断的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者鼻咽拭子标本分离并鉴定SARS冠状病毒.方法SARS患者鼻咽拭子标本接种于含Vero及MRC-5单层细胞的24孔培养板中.分离物使用血清学方法、电镜及基因测序进行鉴定.结果2003年4月～5月北京协和医院共采集79例临床诊断SARS患者的158份鼻咽拭子标本.3例接种Vero细胞孔的鼻拭子标本发现细胞病变效应(cytopathic effect,CPE).用分离物感染细胞做为抗原,免疫荧光血清学发现SARS患者急性期和恢复期血清标本存在SARS冠状病毒抗体(IgG和IgM)阳转和/或4倍及以L升高.分离物上清液负染电镜观察到冠状病毒.基因测序证实3株分离物是SARS冠状病毒.结论3株自79例SARS患者鼻咽拭子标本的病毒分离物是SARS冠状病毒.
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老年SARS患者的临床诊断、治疗及预后分析
目的了解老年严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者的临床特点、治疗方法及预后.方法回顾性分析北京协和医院2003年3月～5月的老年SARS患者的临床资料,并以同时期非老年SARS患者为对照.结果临床资料完整的老年SARS患者共24例,非老年SARS 53例为对照.老年组合并高血压、糖尿病等基础疾病高于对照组,出现咳嗽、咯痰、呼吸困难的比例高于对照组(P＜0.05).老年组合并呼吸衰竭占50%,对照组仅为7.5%,两组相比差异有显著性(P＜0.05).血小板减低的比例老年组高于非老年组(P＜0.05).所有患者均接受了利巴韦林和抗菌素治疗,接受三代头孢菌素或亚胺培南治疗的比例老年组高于对照组(P＜0.05).老年组病死率也明显高于非老年组(33.3%vs 3.8%,P＜0.05).单因素分析发现,老年、血小板减少、呼吸衰竭是死亡的危险因素,而Logistic回归分析发现,3者均不是死亡的独立危险因素.结论虽然老年SARS患者发病率相对较低,但基础病多,病情相对较重,治疗难度较大,病死率高.
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SARS-CoV抗体检测在发热鉴别诊断中的可靠性探讨
目的探讨是否可以通过检测SARS-CoV IgM、IgG抗体来协助早期鉴别诊断发热患者.方法利用SARS-CoV ELISA试剂盒检测正常人群、普通发热患者、临床SARS疑似患者和临床SARS确诊患者新鲜血浆标本中的IgM和IgG抗体.结果正常人群中SARS-CoV抗体阳性率为0%(0/25);疑似患者中SARS-CoV抗体阳性率为40%(4/10);确诊患者中SARS-CoV抗体阳性率为95%(60/63).结论利用SARS-CoV ELISA检测中晚期SARS患者血浆中的相应抗体较可靠,但在普通发热患者中会出现较高的假阳性率.
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240例SARS患者T淋巴细胞及活化亚群的变化
目的研究严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者外周血T淋巴细胞及其活化亚群的变化情况.方法采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪,检测240例不同病程的SARS患者(包括50例重型患者和190例普通型患者)的外周血T淋巴细胞及其活化亚群的表达情况.结果在年龄、性别无显著差异时,与正常对照组比较,SARS患者的外周血T淋巴细胞及其各活化亚群绝对值明显减低,其中CD3+CD25+、CD3+HLA-DR亚群百分比升高;与普通型患者比较,重型患者T细胞、CD4+亚群的绝对值均明显减低,CD25+CD3+、CD28+CD4+及CD95+CD4+亚群的绝对值也明显降低;各病程SARS患者比较,T淋巴细胞(包括CD4、CD8亚群)的绝对值为Ⅲ组＞Ⅱ组＞I组;CD25+CD3+、CD28+CD4+及CD95+CD4+亚群的绝对值也明显降低.结论伴随着全面低下的细胞免疫功能,SARS患者的T细胞有效活化过程有所改变,以重型SARS患者尤其明显.
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SARS患者T淋巴细胞亚群的动态改变
目的研究严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者T淋巴细胞亚群动态变化的特点.方法收集本院确诊的46例SARS患者在发病后不同时间的抗凝血,用特异性荧光抗体标记,通过三色流式细胞仪检测其T淋巴细胞亚群、CD4+纯真细胞亚群(CD4+CD45RA+CD62L+)和CD8+激活亚群(CD8+CD38+),以56例健康献血员的结果作为正常人对照.结果与正常对照相比,SARS患者的CD4+细胞和CD8+细胞在感染1周内百分比正常,但计数均显著减少,分别为(306±140)/mm3和(270±143)/mm3,CD4+纯真细胞亚群的计数也明显降低至(96±49)/mm3,CD8+CD38+激活亚群的比例则明显升至(59.3±12.6)%[正常人为(44.9±12.5)%].感染3～5周时,CD8+细胞计数和激活亚群的百分比均恢复正常,分别为(581±356)/mm3和(40.1±17.6)%.感染8～12周时,CD4+细胞和CD4+纯真细胞亚群的计数分别为(578±193)/mm3和(176±64)/mm3,仍低于正常水平,但与感染1周时相比均有异常显著的升高.结论SARS患者的T淋巴细胞免疫在细胞数量上严重受损,但在短期内有很明显的恢复,CD4+细胞和纯真CD4+细胞亚群的恢复需要比8～12周更长的时间.
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SARS患者康复期肺功能评价
目的研究严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者康复期肺功能状态.方法随访康复出院的SARS患者89例,了解其症状、体征和并发症,测定肺功能.并对肺功能各项指标与临床指标作相关性分析.结果复查的时间距离发病时间平均为(2.90±0.44)个月(1.8～4.2个月),距离出院时间为(1.75±0.53)个月(0.5～3.4个月).48例(53.9%)存在肺功能异常,多数为轻度异常,其中,单纯弥散障碍38例(42.7%),弥散障碍合并限制性通气功能障碍7例(7.9%),弥散障碍合并阻塞性通气功能障碍1例,单纯限制性通气功能障碍1例,单纯1秒钟呼气容积(forced expiratory volume in the first second,FEV1)下降1例.病程中有呼吸困难症状和康复期胸部CT异常者一氧化碳弥散量(diffusion capacity for carbon monoxide,DLco)和肺总量(total lung capacity,TLC)下降更明显.结论SARS患者康复期存在轻度的肺功能损害,以弥散障碍为主,其次是限制性通气功能障碍.
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SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白cDNA的克隆、表达和纯化
目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白.方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化E.coli BL21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白.结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及纯化.结论用基因重组方法表达的SARS冠状病毒N蛋白可为其进一步功能研究提供条件.
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2003年北京市东城区SARS爆发流行特征
目的分析2003年3月～5月间北京市东城区严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)爆发流行特征.方法根据东城区疾病预防控制中心的疫情日报表,以及从其他渠道收集补充的信息进行分析.病例的诊断按照卫生部颁布的标准.用Excel软件建立数据库,用SPSS软件统计分析.结果东城区首例发生于3月14日(3月16日入院),至4月中、下旬发病达高峰,5月5日开始下降,5月22日后未再发生新的临床诊断病例,5月24日、6月10日曾发生3例疑似SARS,后均被排除.共报告572例住院,99例在住院治疗过程中因被确诊为上感、普通肺炎、出疹性疾病等排除了SARS的诊断,实有473例SARS及疑似SARS.各年龄组人群普遍易感,以20～50岁多,占总病例数的68.7%,平均发病年龄为40.7岁.病例的男女比例差异无显著性.SARS病例呈现明显的家庭聚集现象.医务人员病例占总数的18.0%,离退休人员占15.4%.全区10个街道均有病例发生.按常住人口计算,罹患率为28.3/10万.报告病例中,先后在区属二级医院住院的230例,占40.2%.85例医务人员SARS及疑似SARS病例中,18例发生在四所区属二级医院,占其在SARS病房或发热门诊工作的医务人员总数的4.5%.34.7%的SARS病例在病前无任何接触史.41例SARS病例死亡,病死率8.7%.SARS病例的密切接触者罹患率为7.4%.结论2003年3月～5月间东城区爆发流行SARS,人群普遍易感,主要威胁青壮年、医务人员、离退休人员.与患者直接接触是主要的传播方式.民工集中的建筑工地、医院是SARS防控的重点.现行的防治策略和措施对控制SARS流行是有效的.
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SARS患者康复期生活质量调查
目的评估严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者康复期的生活质量.方法对2003年4月至2003年6月出院的119例SARS康复期患者进行生活质量调查,其中男性64例,女性55例,平均年龄(34.1±11.4)岁,平均出院时间(28.0±12.8)d.选择St George's呼吸问卷(St George's respiratoryquestionnaire,SGRQ)作为生活质量调查表,其中72例患者同时行肺功能检查.结果119例SARS康复期患者SGRQ症状、活动和影响以及总分的平均分轻度增高,72例肺功能检查提示34例患者肺一氧化碳弥散量(diffuse capacityof the lung for carbon monoxide,DLco)和16例患者肺一氧化碳弥散常数(diffuse capacity of the lung for carbonmonoxide/alveolar ventilation,DLco/VA)轻度下降;多元线性分析显示,SGRQ活动、影响和总分的变化均与DLCo占预计值的百分比(DLCo/pre,DLCo%)存在负线性回归关系(r=0.47～0.54,P＜0.001),症状评分的变化与肺总量占预计值百分比(total lung capacity/pre,TLC%)和DLCo/VA占预计值百分比(DLCo/VA%)呈负线性回归关系(r=0.54,P＜0.001);SARS康复期患者的年龄和性别因素对SGRQ各分值影响显著,其中大于30岁的女性对生活质量影响较大,而出院时间只对SGRQ分值中症状分数有影响.结论SGRQ可以有效、敏感地评价SARS康复期患者生活质量,患者出院后短期内生活质量轻度降低,年龄和性别对其影响显著.
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重症SARS患者的气管插管分析
目的对13例重症严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)患者的气管插管及呼吸治疗进行分析.方法采用回顾性方法,对重症监护病房收治的13例SARS患者的气管插管情况进行分析.结果在转入的13例重症SARS患者中,已有3例行气管插管或气管切开,其余患者采用面罩或鼻导管吸氧.随着病情的进展,有1例患者需进行气管插管,1例气管插管后再行气管切开,并有2人次更换气管插管.结论对无创呼吸支持无效病例应采取气管插管,给予有创呼吸支持,以增加患者的救治机会.气管切开前先行气管插管有助于减少缺氧的发生及呼吸道分泌物的播散,规范化的防护措施能有效防止医务人员感染.
关键词： 重症严重急性呼吸综合征 气管插管 -
SARS冠状病毒PUMC2株全基因组cDNA分段克隆
目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA.方法以SARS冠状病毒PUMC 2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接人pGEM-T载体中,进行序列测定.结果获得了SARS冠状病毒PUMC 2株基因组全长cDNA的分段克隆.结论SARS冠状病毒PUMC 2株基因组全长cDNA分段克隆的获得,为SARS冠状病毒基因功能的研究和全长有感染性cDNA的克隆奠定了基础.
关键词： SARS冠状病毒PUMC2株 分段克隆 -
SARS患者尸检肺组织的免疫组织化学观察
目的通过对严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)肺组织病变的免疫组织化学研究,结合组织学观察,探讨SARS肺部病变的特点及发病机制.方法以常规HE染色组织学观察结合CD8、CD20、CD34、LCA、CD56、CD68及AE1/AE3等单克隆抗体免疫组织化学染色,分别观察淋巴细胞、巨噬细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管等在肺病变中的数目及分布特点,观察肺组织内血管变化、肺泡上皮增生以及机化和纤维化改变,从而分析SARS肺病变的特点.结果从病变早期至早期纤维化,SARS肺组织中毛细血管数目增多,血管分布符合肺泡壁结构轮廓;炎细胞反应表现为淋巴细胞数目下降而巨噬细胞数目显著增多;Ⅱ型肺泡上皮显著增生;在晚期纤维化及实变的肺组织中,血管数目减少,管腔增大,分布分散,失去肺泡壁的结构轮廓.结论SARS肺部病变具有血管反应、渗出、增生及纤维化等特点,其中巨噬细胞渗出可能在发病过程中起关键作用.
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SARS冠状病毒PUMC01分离株的基因组序列分析
目的对北京协和医院分离的SARS冠状病毒(SARS-CoV)PUMC01株的基因组序列进行变异及系统发育分析.方法利用随机引物法构建SARS-CoV-PUMC01分离株的cDNA文库,随机挑选质粒克隆进行大规模测序,测序反应经过组装后获得全基因组序列(Genbank Accession No.,AY350750),对该序列与SARS-CoV的参考序列相比进行系统发育及变异分析.结果与参考序列(SARS-CoV-Tor2及SARS-CoV-Urbani)相比较,在SARS-CoV-PUMC01上共发现10个变异位点;与其他的17株SARS-CoV进行系统发育分析后发现,18株SARS-CoV分为两类,两类之间及每一类的各株病毒间具有不同的分化时间.结论了解不同地区SARS-CoV之间的系统发育关系,为系统了解不同SARS-CoV分离株之间的临床关系以及SARS-CoV的传播链提供了进化上的证据.
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100例SARS恢复期患者的胸部高分辨CT表现特征
目的探讨严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)恢复期患者的影像学表现特点,及其与其他实验室检查、肺功能检查的关系.方法对100例出院约2个月的SARS患者行胸部高分辨CT检查,并有65例同时行实验室检查,91例行肺功能检查.结果49例(49.0%,49/100)患者的CT仍有异常表现,以磨玻璃样病变(95.9%,47/49)和细小网格状病变(59.2%,29/49)为常见.按CT表现程度分组后,各组间淋巴细胞计数、CD4细胞计数的均数没有统计学差异(P＞0.01);2和3级患者通过单次呼气弥散法测定弥散功能占预计值的百分比(djffusing capacity for caibon monoxide,DLco%)低于0级患者(P＜0.01).结论SARS患者恢复期与病中的影像学表现有所不同,而高分辨CT能在一定程度上反映弥散功能.
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