中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.59
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-5101
- 国内刊号: 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1/TH2细胞因子表达的影响
目的观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1/TH2细胞因子表达的影响,以探讨其治疗机制.方法用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型,口服螺旋藻治疗,观察其行为学差异;组织病理学方法观察鼻黏膜改变;用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清中TH1细胞因子IFN-γ、IL-2和TH2细胞因子IL-4、IL-5进行检测.结果行为学得分,阳性对照组(7.8±1.03)明显高于实验组(1.6±1.35)和正常对照组(0),差异有显著性(P<0.01);实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组;实验组IFN-γ、IL-2水平明显高于阳性对照组;差异有显著性(P<0.01);实验组IL-4、IL-5表达水平明显低于阳性对照组;差异有极显著性意义(P<0.01).结论螺旋藻通过调节TH1和TH2细胞因子的表达,纠正失衡的TH1/TH2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用.
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瘤体内直接注射mIL-21基因抑制小鼠实验性淋巴瘤生长及其机制的初步研究
IL-21的生物学功能比较广泛,能促进骨髓中的NK细胞增殖与分化并表达CD16分子,与抗CD40单克隆抗体(McAb)协同可刺激B细胞增殖,与抗CD3 McAb协同可刺激T细胞增殖.我们利用先前构建的含小鼠IL-21基因重组质粒pcDNA3.1/mIL-21,直接在小鼠皮下Sp2/0肿瘤模型的瘤体局部注射治疗,探讨IL-21能否在肿瘤的基因治疗中发挥一定的作用,从而寻找新的用于肿瘤治疗的生物应答调节剂.
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纳米尺度神经细胞膜蛋白单分子免疫细胞化学三维定位方法的建立
目的建立纳米尺度神经细胞膜表面蛋白单分子三维标记的免疫细胞化学方法.方法应用原子力显微镜,对分布在云母表面的抗NMDAR1亚基IgG-葡萄球菌蛋白A-胶体金颗粒免疫标记复合物分子进行扫描,明确其特定的三维结构作为对照标准,然后扫描结合了免疫标记复合物分子的神经细胞膜表面,对表面形貌作出对比后确定目的抗原的定位和复合物三维结构.并与激光共聚焦免疫荧光方法对比.结果在空白云母表面,免疫复合物分子在原子力显微镜下呈现出均匀分散粒径为49nm的特征性球形结构.在神经元表面结合免疫标记物后可以发现有大量的粒径为53nm 的球形或双球形(短棒状)结构,颗粒均匀,截面为双峰或单峰.而在LSCM下荧光呈颗粒点状分布,为多个FITC聚集显色的结果.结论原子力显微镜下免疫胶体金标记技术可以在纳米尺度对目的膜受体蛋白进行定位和表面三维结构测定.NMDA受体蛋白可以结合1个或2个胶体金复合物,与LSCM相比,原子力显微镜下胶体金标记方法可以对单个膜NMDA受体蛋白抗原进行定位、定性、定量标记测定.
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壳聚糖对幽门螺杆菌外膜屏障功能的影响
研究壳聚糖(即脱乙酰壳聚糖,Chitosan)对Hp外膜屏障功能的影响,以探讨壳聚糖抗Hp的作用机制,以6种抑菌作用较好的壳聚糖溶液,3种70%脱乙酰、3种88.5%脱乙酰为试验材料.
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中国莱姆病螺旋体鞭毛蛋白中央区的基因克隆和表达
目的对中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因种参照菌株PD91的鞭毛蛋白中央区的编码基因进行克隆表达,对重组鞭毛蛋白作为莱姆病血清学诊断抗原进行初步的研究,并进行基因序列和氨基酸序列分析.方法设计引物,用PCR技术获得PD91的鞭毛蛋白中央区的编码基因片段,经酶切、连接,插入质粒pET-30a中,构成重组质粒pET30a-mfla,转化到大肠杆菌BL21,提取质粒进行酶切、DNA测序和氨基酸序列分析鉴定,诱导表达,筛选高效表达株,应用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白及其抗原性.结果成功地获得了鞭毛蛋白中央区的编码基因片段和基因重组,重组蛋白在宿主菌BL21中高效表达.Western blot结果显示重组鞭毛蛋白的中央区与PD91的鞭毛蛋白具有相同的抗原性.经测序显示该中央区基因片段为鞭毛蛋白基因的409~786bp,与北美莱姆病螺旋体标准株B31的DNA碱基序列比较分析,同源性92%.结论成功地对中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因种的鞭毛蛋白中央区进行了克隆表达,并证实具有抗原性,为我国莱姆病血清学诊断研究提供资料.
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异质性耐万古霉素葡萄球菌的筛查与分析
耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)是引起临床感染的常见菌,由于其对抗生素的多重耐药,是抗感染治疗的难点,万古霉素(VA)是目前治疗该菌引起感染的特效药,然而临床上治疗的效果并不是很理想.近来美国、香港、西班牙、英国出现了很多关于异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌(hetero-VRSA)以及耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)的报道.我国抗生素使用普及,从2002年起我们对省一、二附院、江西医院和我院各临床科室送检的痰、创面分泌物、血、脑脊液、前列腺液等标本中分离的124株MRS,利用菌群分析法进行异质性耐万古霉素菌株的筛查,并对筛查到菌的病案进行回顾性分析.
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中国莱姆病螺旋体FP1外膜蛋白A的克隆表达及其抗原性的初步研究
目的克隆并表达中国莱姆病螺旋体阿弗西尼疏螺旋体基因种参照菌株FP1的外膜蛋白A(OspA),并对其抗原性进行初步研究和基因序列分析,为研制中国莱姆病疫苗提供资料.方法设计引物,用聚合酶链反应(PCR)从莱姆病螺旋体FP1全基因组DNA中扩增出OspA编码基因,经酶切、连接,插入原核表达载体pET-11d,构成重组质粒pET-11d-ospA,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物用SDS-PAGE、Western blot分析,并进行基因序列测定.结果 rOspA在宿主菌内获得高效、稳定表达;相对分子质量(Mr)约为31×103,Western blot显示其与抗OspA的多抗有良好的免疫反应性;经测序显示该rOspA的基因片段长度为783bp,编码261个氨基酸,与欧洲标准菌株Pko和瑞士标准菌株VS461的OspA的DNA碱基序列比较,同源性均为94%.结论在国内首次成功地对中国莱姆病螺旋体阿弗西尼疏旋体基因种的代表菌株FP1的OspA基因进行了克隆和表达.并且证实rOspA有良好的抗原性,可进一步对其免疫保护性进行研究,以便为研制有效的莱姆病疫苗提供数据.
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百日咳鲍特菌外膜蛋白体外促肥大细胞脱颗粒的作用
目的了解百日咳鲍特菌Ⅰ相菌株外膜蛋白(outer membrane proteins,OMP)生物学活性与IgE 介导哮喘的关系.方法采用去垢剂处理、DEAE-52和Sephadex G-150层析法制备百日咳鲍特菌Ⅰ相菌株OMP及其组分,以SDS-PAGE估计OMP组分的相对分子质量(Mr).采用ELISA检测百日咳全菌死疫苗诱导动物产生的总IgE和卵白蛋白(ovalbumin,OVA)特异的IgE量.采用肥大细胞脱颗粒试验观察OMP及其组分促进脱颗粒的作用、ELISA检测培养物上清中组胺水平.采用组胺敏感试验检测OMP及其组分增加小鼠对组胺致死敏感性的作用.结果从百日咳鲍特菌OMP中分离获得Mr为(30、32、38和69)×103的4个组分.1~100μg/ml OMP及其组分均未显示凝集鲎变形细胞溶解物的活性.OVA和百日咳鲍特菌联合免疫豚鼠的血清总IgE和OVA特异性IgE较单用OVA免疫有明显增加(t=2.75~6.59;P<0.05~0.01).OMP及其Mr 30×103、Mr 32×103组分有明显的促豚鼠肥大细胞脱颗粒的作用(t=4.914~9.137,P<0.01),但Mr 38×103、Mr 69×103组分无此活性.OMP及其Mr 30×103、Mr 32×103组分处理的上清中组胺水平明显高于阴性对照组(t=5.672~9.304,P<0.01),但Mr 38×103、Mr 69×103组分无此活性.结论百日咳鲍特菌有较强的IgE佐剂活性,某些OMP组分具有促进肥大细胞脱颗粒、组胺释放及增加小鼠对组胺致死敏感性的作用,提示百日咳鲍特菌感染或疫苗接种与IgE介导的哮喘有密切关系.
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人巨细胞病毒感染对小鼠脑组织同源框基因表达的影响
目的研究小鼠脑组织同源框基因(homeobox gene,Hox)的表达状态及人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对小鼠脑组织Hox基因表达的影响,以探讨HCMV致畸的分子机制.方法昆明系小鼠48只,随机分为:实验对照组(16只)和病毒感染组(32只),病毒感染为脑内注射.在感染后7、15、30、60 d分别以病理学方法观察病理损伤,以免疫组化方法检查HCMV-LA(late antigen),PCR检测小鼠脑组织中HCMV-DNA.在建立HCMV脑部感染的小鼠模型基础上,用RT-PCR测定Hox基因在病毒感染组和实验对照组小鼠脑组织中的表达,并用同位素标记的Hox寡核苷酸探针进行Northern blot 检测相应的表达状况.结果(1)接种HCMV AD169株的小鼠脑组织发生了病理改变,免疫组化和PCR方法在神经细胞内查到了HCMV-LA和DNA;(2)RT-PCR和Northern blot发现:对照组的小鼠脑组织表达Hoxa2、Hoxb1和Hoxb2,但不表达Hoxb5、Hoxb8;HCMV感染后,小鼠脑组织被诱导表达Hoxa1,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),且于感染后的15 d达到高峰,而Hoxb1的表达下调(P<0.05);Hoxa2和Hoxb2无明显变化;Hoxb5和Hoxb8仍旧不表达.结论 HCMV AD169株可感染小鼠神经系统.HCMV感染可诱导小鼠神经系统发育基因Hox基因表达改变,这对研究HCMV感染致畸的分子机制提供了有价值的理论依据.
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SARS-CoV核衣壳蛋白抗原性鉴定和基因免疫研究
目的了解SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)的抗原性及其基因疫苗的免疫原性.方法用大肠杆菌表达SARS-CoV的N蛋白,用SARS患者恢复期血清对其进行抗原性鉴定.再构建N蛋白基因疫苗,肌肉注射接种小鼠,检测小鼠血清中的抗N蛋白IgG抗体、脾细胞增殖和迟发型超敏反应.结果大肠杆菌重组表达的SARS-CoV N蛋白具有强抗原性,其基因疫苗能在小鼠有效诱导N蛋白特异性抗体和CD4+、CD8+ T淋巴细胞免疫应答.结论 SARS-CoV的N蛋白可作为重要的SARS血清学诊断抗原,并对于SARS的特异性预防和治疗有潜在的应用价值.
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HFRS患者汉滩病毒核蛋白特异性T细胞克隆及其靶细胞的建立
目的建立肾综合征出血热(HFRS)患者汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白(NP)特异性CTL克隆,为HTNV NP T细胞表位鉴定及HFRS患者T细胞免疫功能研究奠定基础.方法采用Ficoll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞(PBMC),用灭活HTNV和IL-2体外刺激,有限稀释法建立T细胞克隆,流式细胞术鉴定克隆表型.并用EB病毒(EBV)转化B淋巴细胞,建立B淋巴母细胞样细胞系(B-LCL),以含HTNV S 基因的重组痘苗病毒感染B-LCL作靶细胞,以CTL 克隆作效应细胞进行细胞毒杀伤试验,测定T细胞克隆的抗原特异性.结果 T细胞克隆能特异性识别表达NP的B-LCL.在5名患者中,3名有较高的杀伤率,并自2名患者建立了5株HTNV特异性CTL克隆,其表型为CD8+均大于60%.结论成功建立了HFRS患者HTNV NP特异性CTL克隆及其靶细胞.NP是HFRS患者HTNV特异性CTL应答的主要靶抗原之一.
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纤维介素基因启动子的基因多态性与重型乙型肝炎关系的研究
近年小鼠暴发性肝炎和人重型肝炎的研究表明,纤维介素(fgl2)的高表达是重型乙型肝炎肝细胞坏死的重要分子机制.我们运用单链构象多态性(single strain construction polymorphism,SSCP)分析方法对重症乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者以及健康人hfgl2基因启动子的基因多态性进行了研究.
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拉米夫定疗程中YMDD变异前后血清IL-12和TH1/TH2型细胞因子变化及意义
拉米夫定疗程中出现HBV变异的慢性乙型肝炎患者20例,HBV DNA阳性,治疗前HBeAg均阳性,给予拉米夫定100mg/d,分别检测治疗前、治疗3个月、治疗6个月、治疗9个月、治疗12个月等5个时相点血清HBV DNA水平,在HBV DNA转阴的基础条件下,如果某时相点出现了HBV DNA反跳,则认为在该时相点发生了YMDD变异.健康献血员作血清细胞因子水平健康对照.采用ELISA法检测5个时相点及健康献血员血清IL-12、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平,检测结果以pg/ml为单位.计算与健康对照校对后的IFN-γ/IL-4比值作为TH平衡指标(健康对照为1).核酸扩增荧光检测乙型肝炎病毒YMDD突变型.t检验进行统计分析.
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质谱在免疫学中的应用及研究进展
质谱(mass spectrometer,MS)分析是分析化学中进行物质成分和结构分析的主要技术之一,其基本原理是将分析样品在特定的条件下转变为高速运动的离子,这些离子根据质量、电荷比的不同在静电场和磁场的作用下得到分离,然后用特定的检测器记录各种离子的相对强度并形成质谱图.
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RANTES和MIP-1α基因对HIV-1核酸疫苗诱导免疫应答的影响
目的研究RANTES(活化T细胞调节的、正常T细胞表达和分泌的分子)、MIP-1α(巨噬细胞炎症蛋白1α)基因对HIV-1核酸疫苗诱导免疫应答的影响,以探求HIV-1核酸疫苗的新策略.方法 pCI-neoGAG联合RANTES、MIP-1α基因或者pCI-neoGAG单独免疫BALB/c小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ水平,以MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖,用乳酸脱氢酶(LDH)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答.结果与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合RANTES、MIP基因免疫组小鼠血清的抗HIV-1 p24抗体滴度升高,IFN-γ升高,小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)以及特异性CTL活性均高,差异都有显著性(P<0.01).结论 RANTES、MIP-1α基因联合HIV-1核酸疫苗免疫小鼠,可能增强特异性TH1细胞和CTL反应,RANTES、MIP-1α基因对体液免疫有加强作用.因此,RANTES、MIP-1α基因对于HIV-1核酸疫苗是具有较好应用前景的免疫佐剂.
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LTB-hpaA融合基因原核表达系统的构建及其产物免疫性鉴定
黏附素(HpaA)是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)鞭毛鞘膜蛋白,几乎存在于所有的Hp菌株表面,序列高度保守,可作为基因工程疫苗的候选抗原.本文构建了ltB-hpaA融合基因原核表达系统pQE32-ltB-hpaA-E.coli M15,并用SDS-PAGE、Western blot和GM1-ELISA分别证实了LTB-HpaA重组蛋白(rLTB-hpaA)表达和免疫性.
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C3d3-hCGβ融合蛋白免疫BALB/c小鼠增强抗hCG-β TH2型体液免疫效应
目的通过分子佐剂C3d3增强hCGβ避孕疫苗的免疫原性并实现免疫效应向TH2型体液免疫偏倚.方法在CHO细胞中表达、纯化hCGβ、C3d3和hCGβ-C3d3融合蛋白.分别用hCGβ-C3d3融合蛋白、单用hCGβ、hCGβ联合C3d3和hCGβ加用弗氏完全佐剂免疫BALB/c小鼠,共免疫2次,间隔4周.ELISA测定血清中抗hCGβ抗体滴度.末次免疫后3周处死小鼠制备单个脾细胞悬液,体外用hCG刺激培养48 h,ELISA检测上清中TH1型(IFN-γ、IL-2)和TH2型(IL-4、IL-10)细胞因子分泌水平.结果 C3d3使hCGβ的免疫原性增强了1995倍,C3d3的佐剂能力是弗氏完全佐剂的10倍(初次免疫)~32倍(再次免疫).借助C3d3分子佐剂,hCGβ-C3d3融合蛋白可产生很明显的TH2型体液免疫优势效应.结论分子佐剂C3d3可以大幅增强hCGβ避孕疫苗的免疫原性,使免疫效应向TH2型体液免疫偏倚.
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乳头瘤病毒重组减毒沙门菌疫苗的构建及诱导黏膜免疫的研究
乳头瘤病毒在生殖道黏膜增殖传播,与妇女生殖道黏膜检测不到HPV IgA抗体有关,因此诱导生殖道黏膜HPV特异性抗体对于防治HPV性传播性疾病具有重要的价值.
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痢疾多糖-蛋白结合疫苗小鼠母子抗体传递试验
目的以小鼠为试验动物模型,用不同的痢疾多糖-蛋白结合疫苗免疫母鼠,观察IgG抗体的母婴传递情况.方法用福氏2a痢疾多糖-重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)结合疫苗(F2a-O-SP-rEPA)和宋内痢疾多糖-重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗(S-O-SP-rEPA)分别皮下免疫母鼠,待其怀孕、分娩,用ELISA分别检测母体、子体小鼠的IgG抗体滴度.结果子体小鼠出生第2周的IgG抗体水平较高,随着小鼠周龄的增加,抗体水平逐渐下降.结论痢疾多糖-蛋白结合疫苗免疫母体后,诱导的特异性抗体可经母体传递给子体,抗体滴度随时间的推移而逐渐降低.
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fgl2凝血酶原酶多肽抗体的制备和应用
目的利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶(hfgl2、mfgl2)的特异性多克隆抗体,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治.方法根据mfgl2、hfgl2基因编码的氨基酸序列合成多肽3(Pep3)和多肽4(Pep4),并用化学方法与匙孔血蓝蛋白(KLH)连接,纯品Pep3-KLH和Pep4-KLH免疫动物,所制备的抗血清用ELISA、Western blot和前凝血质活性(PCA)实验鉴定,并采用免疫组化法应用于乙型肝炎患者肝组织中hfgl2的检测.结果 ELISA检测表明,所制备的抗血清可分别与Pep3和Pep4发生特异性免疫反应;Western blot结果显示,抗血清可识别MHV-3感染BALB/cJ小鼠腹腔巨噬细胞特异性条带,相对分子质量(Mr)为65×103;PCA实验提示,抗血清具有中和mfgl2分子酶活性的作用.对病毒性乙型肝炎患者肝组织免疫组织化学染色发现hfgl2仅在重型乙型肝炎患者高表达,而在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的肝组织中无表达.结论所制备的fgl2的多肽抗体(多克隆抗体)可识别mfgl2和hfgl2分子,具有与抗原特异性结合、中和其酶活性的特征,为深入研究这一新发现的分子提供了有力的科学手段.
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热点突变法提高人源抗TNF-α抗体的亲和力
目的通过热点突变法对一株人源抗TNF-α ScFv进行体外亲和力成熟.方法根据体内抗体亲和力成熟时V基因体细胞突变的热点,设计引物进行多步重叠PCR,在本株ScFv的H-CDR3和L-CDR3热点部位引入随机突变,构建噬菌体抗体库,采用硫氰酸盐洗脱法对抗体库进行筛选,对选出的克隆测定其相对亲和力,并进一步将4株转换表达成为可溶性Fab,以非竞争ELISA法测定其亲和常数.结果构建了库容为1.8×107的热点突变抗体库,筛选得到了多株亲和力明显提高的抗TNF-α抗体的突变体(多达10倍).结论热点突变法是体外提高抗体亲和力的有效和可行的方法.
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抗HIV-1 gp41单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控表达及活性检测
目的获得抗HIV-1 gp41单链抗体与葡萄球菌外毒素A融合表达的重组导向毒素蛋白.方法人工合成能广泛识别HIV-1 gp41的单链抗体(ScFv41)基因和金黄色葡萄球菌外毒素A(SEA)基因,将SEA基因第 227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT,并对两基因进行密码子优化.以大肠杆菌温控型表达质粒pBV220为载体,分别构建单表达ScFv41的质粒pBV-41和SEA与ScFv41融合表达的质粒pBV-SL41,转化大肠杆菌感受态细胞,通过提高温度诱导表达,表达产物经分子筛层析折叠复性后,检测单链抗体结合活性及重组导向毒素介导的细胞毒淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果表达质粒pBV-41和pBV-SL41分别在E.coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6 h、42℃诱导7 h得到较高表达,经SDS-PAGE、薄层扫描分析表明,目的蛋白分别占菌体总蛋白的14.359%和23.482%,目的蛋白经复性后可与HIV-1抗原条发生良好的结合反应,并且SL41可激活外周血淋巴细胞(PBMC)并介导其杀伤稳定表达HIV-1 gp160蛋白的靶细胞.结论成功得到ScFv41与SEA融合表达蛋白SL41,为研制抗HIV-1重组导向毒素奠定基础.
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胸腺共移植对异种骨髓造血细胞移植后T细胞发育的影响
目的探讨胎儿胸腺小叶共移植对异种骨髓移植后人源性T细胞发育的影响,为在体研究人造血细胞向T细胞发育提供实验模型,并为异种骨髓移植构建银屑病动物模型奠定基础.方法将人骨髓单个核细胞及胎儿胸腺小叶共移植于SCID鼠,皮下注射骨髓基质细胞,并结合IL-2腹腔内注射,以未移植胸腺小叶者为对照,流式细胞术动态检测移植后不同时间SCID鼠外周血中人源性细胞及CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞的比例.结果实验组移植4周后,SCID鼠外周血中已可检测到人源性细胞(CD45+细胞),8周出现少量CD3+细胞,12周可检测到CD4+细胞、CD8+细胞,移植24周内,SCID鼠外周血人源性细胞及各亚群T细胞比例逐渐增多,24周达到大比例.而未移植胸腺的对照组,仅可在外周血检测到人源性CD45+细胞,而无成熟T细胞存在.结论胎儿胸腺小叶共移植模式可以促进人源性造血细胞在SCID鼠体内向T细胞发育分化,并可使其活性在体内维持较长时间.
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肝移植自发免疫耐受大鼠CD8+CD28-T抑制细胞的生物学特性
目的研究近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型中CD8+CD28- T抑制细胞的生物学特点.方法建立大鼠原位肝移植模型,流式细胞技术检测自发免疫耐受模型中CD8+CD28- T抑制细胞含量变化;通过体外混合淋巴细胞反应和体内输注验证CD8+CD28- T细胞的抑制功能,并检测其增殖、细胞因子mRNA的表达和诱导靶细胞发生凋亡的情况,并与急性排异组相比较.结果自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞含量(31.5%±2.6%)显著高于正常大鼠(5.4%±1.5%)和急性排异组大鼠(6.0%±1.3%).自发免疫耐受组CD8+CD28- T细胞明显抑制体外混合淋巴细胞反应的增殖,体内输注显著延长皮肤移植物的存活时间(MST: 10±0.8 d vs 15±1.8 d,P<0.05),但急性排异组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞无抑制功能.外源性IL-2 40U/ml可逆转CD8+CD28- T细胞的抑制功能.CD8+CD28- T细胞不会增加靶细胞凋亡的发生,其IFN-γ mRNA为高表达,而急性排异组无表达.PHA 50μg/ml和IL-2 40U/ml、PMA/ion 50/250ng/ml和IL-2 40U/ml联合应用可有效刺激CD8+CD28- T细胞增殖.结论自发耐受组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞是一种T抑制细胞,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用,其抑制作用可能与IFN-γ的免疫调节以及诱导同种异体反应性T细胞无能有关.
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过继转输正常妊娠孕鼠的T细胞抑制自然流产孕鼠对胚胎的排斥
目的观察过继转输正常妊娠孕鼠的T、B细胞对小鼠自然流产孕鼠妊娠预后的影响.方法以♀CBA/J×♂BALB/c为正常妊娠模型,♀CBA/J×♂DBA/2为自然流产模型,于孕9 d,采用单向混合淋巴细胞反应分析两组孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及上清液IL-2分泌水平,以研究孕鼠母-胎免疫耐受状态;并于孕14 d观察两种模型的胚胎吸收率.然后,应用免疫磁珠阴性分选两组孕鼠脾脏T细胞和B细胞,并将两种细胞分别转输至孕4 d(着床期)的♀CBA/J×♂DBA/2孕鼠,于孕14 d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率.结果与自然流产孕鼠比较,正常妊娠孕鼠孕9 d脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL-2的分泌显著下降(P<0.05),孕14 d胚胎吸收率也显著下降(P<0.05).与转输自然流产孕鼠的T细胞相比,转输正常妊娠孕鼠T细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率显著下降(P<0.05);而转输两组B细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率差异无显著性(P>0.05).结论于孕早期过继转输正常妊娠孕鼠的T细胞能诱导宿主孕鼠母-胎免疫耐受,防止母体对胚胎的免疫排斥,使自然流产模型的妊娠预后达到正常妊娠水平.
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自体外周血干细胞移植纠正选择性IgA缺乏症
选择性IgA缺乏症(SIgAD)是原发性免疫缺陷病中常见的类型,约占60%以上,其患者分泌性IgA减少,血清中的IgA浓度低于0.05g/L,同时其他类型的免疫球蛋白的含量通常是在正常范围.2001年6月我们对1例难治性系统性红斑狼疮合并选择性IgA缺乏症患者行自体外周血干细胞移植(APBSCT)并进行CD34+细胞分选治疗,现已随访24个月,患者除SLE的相关症状获得满意缓解、实验室检查指标恢复正常外,意外的发现其血清IgA水平也逐渐恢复至接近正常的水平(见表1).
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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