中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.59
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-5101
- 国内刊号: 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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病毒性心肌炎小鼠心肌组织中PI3K/AKT2/mTOR通路对自噬的调控作用
目的 观察柯萨奇B3病毒(coxsackievirus B3,CVB3)感染的心肌炎小鼠心脏组织中AKT2蛋白磷酸化水平和自噬水平的改变,探讨病毒性心肌炎中PI3K/AKT2/mTOR通路对自噬蛋白表达调控的机制.方法 将30只BALB/c小鼠随机分为对照组(NC组)、心肌炎组(CVB3组)和AKT特异性激动剂组(CVB3+SC79组),每组各取10只,后两组经腹腔接种CVB3诱发急性病毒性心肌炎,NC组腹腔注射生理盐水,接种当天记为第0天,24 h后AKT特异性激动剂组每日腹腔注射SC790.04 mg/g,NC组给予腹腔注射生理盐水,直至7 d末.于注射病毒后7 d处死3组小鼠,HE染色观察心脏炎症细胞浸润和组织坏死程度;q-PCR检测心肌组织中CVB3以及IL-1β、IL-6等炎症因子的mRNA表达水平;ELISA检测血中BNP和cTnI含量评估小鼠心肌损伤程度;Western blot法检测心脏组织LC3、Beclin1蛋白以及PI3K/AKT2/mTOR通路的变化.结果 病毒性心肌炎小鼠心脏病理切片与NC组相比提示大量炎症细胞浸润,但无明显组织坏死,且心脏组织中病毒及炎症因子mRNA表达量明显增加(P<0.05),血中BNP和cTnI含量明显增加(P<0.05),心肌炎小鼠心脏组织中LC3Ⅱ与LC3Ⅰ比值及Beclin1蛋白含量明显增加(P<0.05),而PI3K/AKT2/mTOR通路的活性降低.与CVB3组小鼠相比,AKT特异性激动剂组小鼠心脏组织中LC3Ⅱ与LC3Ⅰ比值及Beclin1蛋白含量明显下调(P<0.05),且PI3K/AKT2/mTOR通路的活性增加(P<0.05).结论 病毒性心肌炎小鼠心肌组织中细胞自噬水平上调,而参与反向自噬调控的PI3K/AKT2/mTOR通路活性下调,提示病毒性心肌炎心肌组织自噬水平的变化可能受PI3K/AKT2/mTOR通路的调节.
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家蝇天蚕素抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌抑菌活性的研究
目的 通过化学合成家蝇抗菌肽Cec4,以鲍曼不动杆菌为指示菌,研究其抑菌活性.方法 采用微量稀释法测定小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)、小杀菌浓度(min-imal bactericidal concentration,MBC),酶标仪动态监测家蝇抗菌肽Cec4对细菌生长的影响并绘制时间-杀菌曲线(time-kill curve),评估NaCl、胰蛋白酶、pH值等不同因素对Cec4抑菌活性的影响,并通过扫描电镜观察(scanning electron microscope,SEM)Cec4对细菌微观结构的破坏程度.结果 家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌MIC和MBC分别是4 μg/ml、8 μg/ml.Time-kill curve结果显示,抗菌肽Cec4在24 h内都具有较高抗菌效力.不同NaCl离子强度(0~200 mmol/L)条件下,对Cec4抗菌活性几乎无影响.高浓度胰蛋白酶1.0 mg/ml会抑制Cec4抗菌活性.不同的pH值(6.5、7.5、8.8)条件下,溶液中Cec4抗菌活性适pH值为8.8.SEM结果显示对细菌细胞损伤程度与作用时间呈正相关.结论 本研究新发现的家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌具有较好抑菌活性,能在较短的时间内清除鲍曼不动杆菌,其抗菌能力持续24 h以上.在钠离子强度、胰蛋白酶、pH值等不同影响因素作用下,家蝇抗菌肽Cec4都具较好稳定性.电镜观察发现家蝇抗菌肽Cec4能破坏细菌膜的完整性,致使其内容物大量外泄,后导致死亡.基于上述结果,将进一步研究家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌的抗菌机制.
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猪链球菌2型ABC转运蛋白SSU050946的致病机制研究
目的 构建猪链球菌2型05ZYH33ABC转运蛋白SSU050946突变株,并对其致病机制进行初步探索,为进一步阐明猪链球菌逃避宿主固有免疫提供新线索.方法 提取05ZYH33基因组作模板扩增SSU050946上下游同源臂,提取pSET1载体作模板扩增氯霉素基因,通过重叠PCR方法将3个片段搭建并连接至温敏载体pSET4s;通过同源重组技术构建突变株05ZYH33Δ0946;通过细菌黏附试验、全血杀伤试验、小鼠和仔猪攻毒试验评价突变株和野生株在致病方面的差异.结果 成功构建了突变株05ZYH33Δ0946;细菌黏附证明SSU050946与猪链球菌对宿主的黏附无关;全血杀伤证明SSU050946是猪链球菌一个新的抗吞噬因子;小鼠和仔猪毒力结果证明SSU050946是猪链球菌的一个新毒力因子.结论 猪链球菌2型ABC转运蛋白SSU050946是新发现的毒力因子,在猪链球菌抗宿主固有免疫中发挥重要作用.
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阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株的构建及其生物学特性
目的 构建阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株,并探讨blaNDM-1基因缺失对阴沟肠杆菌生物学特性的影响.方法 采用Red同源重组技术构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株并通过PCR和RT-qPCR法进行验证,对原始菌株和blaNDM-1敲除株进行药敏试验、生长曲线绘制和体外竞争试验.结果PCR、DNA测序和RT-qPCR表明成功构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株.药敏试验显示原始菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均耐药,而blaNDM-1敲除株对其均敏感;原始菌株和基因敲除株在LB液体培养基中具有相似的增殖曲线;两者体外竞争试验的竞争指数值为0.69.结论 Red同源重组技术可用于阴沟肠杆菌基因的敲除,且blaNDM-1基因对阴沟肠杆菌的耐药性及竞争力都有影响.
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不同形态GⅡ.4型诺如病毒类病毒颗粒的制备及免疫原性研究
目的 采用汉逊酵母系统重组表达GⅡ.4型诺如病毒(norovirus,NoV)主要结构蛋白VP1,对纯化后获得的两种不同形态类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)分别进行理化性质鉴定和免疫效果评价.方法 将表达GⅡ.4型VP1蛋白的重组工程菌高密度发酵,纯化后获得两种不同形态的VLPs;通过Western blot、SEC-HPLC、动态光散射法和透射电镜等方法检测两种VLPs的理化性质.将两种VLPs分别免疫BALB/c小鼠,比较免疫血清对两种颗粒的抗体结合性和组织血清抗原(histo-blood group antigen,HBGA)-VLPs阻断水平.结果 纯化后可获得两种不同直径的VLPs,颗粒均一度良好;动态光散射测定两种颗粒水合粒径分别为53.98 nm和45.18 nm.两种VLPs与HBGA受体结合类型和程度相似,大颗粒VLPs的免疫血清对两种颗粒的结合性和HBGA-VLPs阻断抗体水平均高于小颗粒VLPs,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 汉逊酵母表达NoV GⅡ.4 VP1蛋白,可形成形态不同的两种重组VLPs,两种VLPs具有相似的理化性质和免疫原性,但大粒径VLPs可能更适合作为重组人诺如病毒疫苗的抗原组分.
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改良碳青霉烯灭活试验在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶的应用
近年来随着碳青霉烯类抗菌药物在临床上的大量使用,产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的分离率呈逐年上升趋势[1],及时检测和发现产酶菌株对于耐药菌感染的治疗和流行的控制至关重要.2017年 CLSI M100S-27th [2]推荐采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)检测肠杆菌科细菌中的碳青霉烯酶用于流行病学调查.为了解该方法在肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶检测中的效果,本实验使用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)与改良Hodge(MHT)试验同时对临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CR-KPn)进行碳青霉烯酶检测,并对这两种试验方法的检测结果进行了比较分析,现报道如下.
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抗双链DNA抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立
抗dsDNA抗体是系统性红斑狼疮的诊断标准之一[1].在系统性红斑狼疮中,抗dsDNA抗体阳性率为60% ~90%,浓度随着疾病的活动和缓解而升高和降低.抗dsDNA抗体浓度的检测对于系统性红斑狼疮的诊断和预后判断有重要意义.目前检测抗 dsDNA 抗体的方法有间接免疫荧光法(IIF)、酶联免疫吸附试验方法(ELISA)及放射免疫法(Farr).近几年,时间分辨荧光免疫(time-resolved fluoroim-munoassay,TRFIA)被广泛应用于多种抗原抗体的定量检测[2-3].时间分辨荧光免疫技术利用镧系元素螯合物的荧光寿命长,Stokes位移大,荧光强度高等独特的荧光特性,在背景荧光已经降到很低时再开始检测特异的阳性信号,确保检测信号特异性的同时,应用解离-增强原理进一步增加了该检测的灵敏度,检测下限可达5×10-14mol/L.
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2015年青岛地区手足口病主要病原谱及基因特征分析
目的 阐明2015年青岛地区手足口病(HFMD)流行特征和病原谱变化及3种主要肠道病毒分离株的基因特征.方法 描述性分析2015年青岛地区手足口病病例的年龄、月份分布情况.用荧光RT-PCR法对2015年青岛地区HFMD患者咽拭子标本进行肠道病毒通用、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和柯萨奇病毒A6型,对阳性分离株进行VP1基因全长序列扩增及基因序列测定,以MEGA7.0软件进行系统发育及分子特征分析.结果 2015年共检测1176例手足口病病例,其中肠道病毒阳性率为68.4%,主要病原构成为CA6(41.4%)、EV71(31.6%)和CA16(15.3%).5岁及以下儿童占总病例数的80.3%.CA6占3岁以下儿童肠道病毒构成的48.9%.其中EV71流行亚型为C4a,CA16优势流行亚型为B1b.CA6优势流行亚型为A基因组.结论 CA6、EV71和CA16是导致2015年青岛地区手足口病流行的3种主要病原.2015年CA6超过EV71成为第一致病原,主要感染3岁以下儿童.EV71的流行亚型不变.CA16优势流行亚型为B1b.CA6优势分离株主要是A基因组,并且内部进化为多个小的分支,与A基因组内部的2013年青岛分离株处于不同分支.
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上海市金山区健康人群麻疹抗体水平检测分析
目的 了解上海市金山区健康人群麻疹抗体水平,为制定和改进本区麻疹免疫防控策略提供依据.方法 分层抽样,男女各半,本市与流动人口各半,采集健康人群12个年龄组的390份血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测麻疹IgG抗体浓度,按抗体阳性水平进行分组,对不同人群麻疹抗体水平比较分析.结果 全人群麻疹抗体阳性率为78.21%,保护性水平达41.28%.男女之间及本市人口与流动人口之间抗体阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05).各年龄组抗体水平之间差异有统计学意义(χ2=191.214,P<0.01);≥1岁人群抗体阳性率超过80.00%,其中,3~6岁儿童抗体阳性率达100.00%,≥40岁人群抗体阳性率超过90.00%;<8月龄儿童为易感人群,抗体水平阳性率(10.00%)低;保护率,8月龄~9岁儿童高,其次是≥40岁人群, 10~39岁人群麻疹抗体水平主要在200~800 mIU/ml.≥8月龄人群免疫史状况不同,抗体水平差异无统计学意义(χ2=1.140,P>0.05).结论 2015年金山区人群麻疹抗体平均水平较高,已建立较好的免疫屏障,阳性率有待进一步提高,<8月龄儿童及10~39岁人群是主要易感人群.建议重点做好易感人群和育龄妇女含麻疹成分疫苗的接种,提高人群免疫屏障.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 06 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 |