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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中国科学技术协会
  • 主办单位: 中华医学会
  • 影响因子: 0.59
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 0254-5101
  • 国内刊号: 11-2309/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1981
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 沈心亮
  • 类 别: 预防医学与卫生学
期刊荣誉:
  • 重建外周免疫耐受抑制原发性胆汁性肝硬化的实验研究

    作者:蒋廷旺;熊怀民;张红星;龚燕萍;邓安梅;仲人前

    目的 以原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)自身抗原诱导PBC小鼠重建外周免疫耐受,探索PBC免疫治疗的新途径.方法 将M2蛋白与新生小鼠的脾淋巴细胞及交联剂1-乙基-3(3-二甲基氨阿基)碳化二亚胺(ECDI)共培养,形成抗原负载的淋巴细胞,随后通过尾静脉注入小鼠体内诱导免疫系统对PBC自身抗原的免疫耐受,同时注射聚肌苷酸胞苷酸(polyI:C)诱导PBC病变,对照组注射与牛血清白蛋白(BSA)共培养的脾细胞,16周后观察小鼠的各项实验室指标,分析重建PBC小鼠外周免疫耐受是否能够有效地阻止病变产生或缓解病程.结果 抗线粒体抗体(AMA):免疫耐受组与BSA对照组、模型对照组相比阳性率显著降低,差异有统计学意义(P=0.007,P=0.003);BSA对照组和模型对照组间无明显差异(P=0.74);免疫耐受组、BSA对照组、模型对照组的碱性磷酸酶(AKP)水平分别为(80.5±9.8)U/L、(93.8±15.7)U/L、(92.5±17.7)U/L;其中BSA组和模型组差异无统计学意义(P=0.83),而免疫耐受组低于BSA组(P=0.0095)和模型对照组(P=0.029);免疫耐受组、BSA对照组、模型对照组的胆管阳性浸润率分别为42.67%±12.30%、57.07%±11.35%、51.53%±9.96%;其中免疫耐受组阳性浸润率低于模型对照组,差异有统计学意义(P=0.039),同时显著低于BSA对照组(P=0.0024),而且BSA对照组和模型对照组比较差异无统计学意义(P=0.167).结论 本实验通过重建外周免疫耐受,在一定程度上抑制了PBC小鼠的病变程度,为今后进一步研究PBC的免疫治疗提供思路.

  • IL-2预孵育影响G-CSF动员的小鼠脾淋巴细胞增殖及极化观察

    作者:何合胜;耿炜莲;谢彦晖

    目的 探讨IL-2预孵育对粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后的小鼠脾淋巴细胞功能的影响,从而为减轻异基因造血干细胞移植时急性移植物抗宿主病(GVHD)的发生提供一种新途径.方法 IL-2(50 U/ml)预孵育rhG-CSF(每天0.25 μg/g)体内动员的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞6 h,然后在体外以BALB/c小鼠异基因抗原分别对其进行刺激,测定动员后的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞的增殖能力以及上清液IL-4、IFN-γ的浓度,实验分为G-CSF+IL-2组、G-CSF组、IL-2组和对照组.结果 G-CSF+IL-2组较列照组A值降低(P<0.01);G-CSF+IL-2组IL-4水平高于对照组(P<0.01),而IFN-γ水平低于对照组(P<0.01).结论 rhG-CSF动员的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞经IL-2预孵育后对同种异基因抗原免疫增殖能力明显减弱并向Th2方向分化,两者合用对诱导T淋巴细胞免疫耐受有协同效应.

  • 孕期弓形虫感染对小鼠胎盘补体调节蛋白表达水平的影响

    作者:刘现兵;胡雪梅;张海霞;张瑞金;付强;徐晓艳

    目的 通过检测弓形虫感染对C57BL/6孕鼠胎盘补体调节蛋白的表达水平,探索孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制.方法 将C57BL/6孕鼠随机分为感染组和正常对照组,每组12只,感染组每只孕鼠于孕8 d腹腔注射200个弓形虫强毒株(RH株)速殖子,对照组于相应时间注射等量生理盐水.所有孕鼠均于孕14 d无菌分离胚胎组织,观察胎鼠发育情况.采用实时荧光定量PCR检测胎盘补体调节蛋白Crry、GPI-DAF及CD59a的mRNA的表达水平;采用流式细胞术检测胎盘单细胞悬液中Crry、GPI-DAF阳性细胞率.结果 弓形虫感染导致感染组死胎率显著升高(感染组死胎率为80.95%,对照组为4.41%),两组之间差异有统计学意义(P<0.01);弓形虫感染组及对照组Crry、GPI-DAF和CD59a的mRNA表达水平分别为0.786±0.199、0.594±0.096、0.880±0.179和0.550±0.077、0.221±0.074、0.591±0.075,3类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);感染组和对照组Crry、GPI-DAF的阳性细胞百分率分别为(10.03±2.11)%、(2.95±1.04)%和(3.15±1.32)%、(0.66±0.26)%,两类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 弓形虫感染导致孕鼠胎盘3种补体凋节蛋白Crry、GPI-DAF及CD59a表达水平均升高,打破了母胎界面维持正常妊娠所需的免疫微环境,这可能是孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制之一.

  • 同一标本分离的2株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌耐药机制相关性分析

    作者:施德仕;邵海枫;王卫萍;黄梅;张晓文

    目的 对从同一标本中分离的碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌和摩根摩根菌进行耐药机制相关性分析.方法 琼脂稀释法进行药物敏感试验;特异性PCR扩增和序列分析检测介导耐碳青霉烯类药物的相关基因;接合试验、质粒提取和耐药基因周围序列分析耐药的可传递性、耐药质粒的同源性及耐药基因的遗传背景;提取外膜蛋白分析菌株外膜蛋白的改变.结果 2株分离菌均产碳青霉烯酶并扩增出介导碳青霉烯类耐药的KPC-2型基因;质粒接合试验成功传递了对碳青霉烯类药物的耐药性,耐药基因被携带在2个大小不同但耐药基因周围序列完全相同的质粒上;其中摩根摩根菌耐药株缺失了相对分子质量约为38×103的外膜蛋白同时出现36×103的外膜蛋白而肺炎克雷伯菌则缺失了外膜蛋白OMPK36.结论 2株分离菌均携带KPC-2基因.该基因由2个大小不同的质粒携带,同一复合转座子介导了KPC-2基因在2株细菌的不同质粒上转移.同时外膜蛋白缺失参与了对碳青霉烯类抗生素耐药.

  • 嗜肺军团菌生物膜的形成与毒力基因表达量分析

    作者:周昭彦;秦亮;胡必杰;渡边浩

    目的 初步探讨生物膜相关军团菌独特的毒力基因表达特征.方法 在富营养条件下建立静止状态的单细胞嗜肺军团菌生物膜模型.运用反转录real-time PCR技术,比较和分析浮游和生物膜状态下嗜肺军团菌部分毒力基因的表达,毒力基因包括mip、flaA和fliA基因.结果 对数生长后期与对数生长期浮游菌的mip、flaA和fliA基因表达量比值分别为0.53、4.45、3.67,对数生长期浮游菌显示复制态军团菌的毒力基凶表达特征,对数生长后期表达转移态军团菌特点.生物膜相关军团菌与对数生长期浮游菌的mip、flaA和fliA基因表达量比值为4.42、5.24、16.21;与对数生长后期浮游菌的比值为8.39、1.18、4.43,生物膜相关军团菌同时表达复制态和转移态军团菌毒力基因特征.结论 生物膜相关军团菌毒力基因的表达具有其特殊性,有待进一步研究.

  • 大肠杆菌质粒解离后致死基因分布及多态性分析

    作者:高国辉;齐云玲;孙倩;宋智健;宋玉龙;李劲松;王慧利;包其郁;丁力

    目的 通过对来自不同年份大肠杆菌质粒DNA序列进行高通测序,从质粒基因组水平分析大肠杆菌质粒DNA所携带的解离后致死基因的种类、数量以及多态性.方法 收集4年临床分离非重复的320株大肠杆菌.菌株分为两个部分,碱裂解法提取全部质粒DNA,Solexa测序获得大规模的短序列.采用比较基因组学方法分析两个样本所含的解离后致死基因类型及丰度的差异,研究解离后致死基因存在的核苷酸多态位点.结果 测序法获得两批数据,E1短序列总数为11 077 768,可以定位到参照序列上为5019(0.045%).E2短序列总数为9 377 792,可以定位到参照序列上是4952(0.053%).两个样本中共有9个解离后致死基因型,其中hok基因丰度高.5个基因型共发现29个单核苷酸多态性(SNPs)位点,约33%为非同义突变.同一个位点的A、G二核苷酸多态现象常见.结论 已知的大肠杆菌解离后致死基因的9个基因型,在温州地区分离的大肠杆菌质粒上均有发现,其中hok基因出现频率高,共5个基因型存在多态性.

  • 北京市2007-2010年风疹病原学监测

    作者:张铁钢;杨洁;陈萌;龚成;罗明;吴疆;黄迎春

    目的 对北京地区风疹病原学进行监测.方法 收集风疹疑似病例血清标本和尿液和(或)咽拭子,用于血清学检测和病毒分离.病毒分离物和临床标本中的核酸利用real-time PCR方法进行检测.结果 2007-2010年,共收集99个风疹疑似病例血清标本和临床标本,血清学确诊55个病例(56%),病毒分离确诊51个病例(52%).回顾性检测疑似风疹病例及尿液和(或)咽拭子核酸,共确诊72个风疹病例(73%).分离的风疹病毒基因型主要为1E基因型.结论 北京地区主要流行的风疹病毒为1E基因型别.

  • HIV-1感染者CD4+T细胞受体基因多样性特点及其与病毒载量的相关性

    作者:高占;任国良;宋玉国;贾明明;郑扬;赵全壁;邵一鸣;毕胜利;洪坤学

    目的 分析HIV-1感染者CD4+T细胞受体(TCR)基因的多样性特征及其与病毒载量的相关性.方法 应用抗CD4单克隆抗体从25份HIV-1感染者和10份HIV-1阴性对照样本外周血单个核细胞(PBMC)中分离CD4+T细胞,提取细胞总RNA,然后通过逆转录及巢式多聚酶链反应(nestedPCR)对TCR 22个Vβ基因家族的互补决定区3(CDR3)进行扩增,利用ABI3700测序仪对扩增的PCR产物进行扫描,定分析HIV-1感染者TCRCDR3区多样性变化特征及其与病毒载量的相关性.结果 HIV-1感染者CD4+T细胞TCR CDR3区平均D(distance)值显著高于正常对照组(P<0 05),TCR Vβ基因各家族CDR3长度谱型成寡克隆分布,TCR CDR3区的紊乱与病毒载量呈正相关(r=0 494,P<0 05);HIV-1感染引起TCR多样性的改变不仅表现在不同Vβ基因家族上,而且也表现在CDR3长度上,其中感染者Vβ8、Vβ22、Vβ23基因家族的变化与正常人差异有统计学意义.结论 HIV-1感染能引起CD4+T细胞TCR基因多样性的减少及高斯(Gaussian)分布的破坏,TCR CDR3区的紊乱与病毒载量呈正相关.

  • 1994-2006年深圳市分离的B型流感病毒分子进化研究

    作者:吴春利;程小雯;吕星;房师松;王昕

    目的 通过对深圳市分离的B型流感病毒HA1分子系统进化分析,初步了解深圳市B型流感病毒的流行变异规律.方法 选取深圳市1994-2006共13年间分离的50株B型流感毒株,通过RT-PCR将其HA1基因片段扩增后进行序列解析,然后,通过MEGA等软件对序列进行分子进化分析.结果 1994-2006年间深圳市流行的B型流感病毒分为Yamagata和Victoria两个亚系,两系的毒株分别是不同年份的主要流行株.两个亚系的HA1分子具有1个糖基化位点的差异,在4个抗原决定簇区域也分布有多个氨基酸位点的变异.结论 1994-2006年间深圳市B型流感病毒的两个亚系分别在不同年份主导流行,但变异均比较缓慢.

  • 鼠巨细胞病毒干扰神经干细胞分化相关基因表达的体外研究

    作者:田佳;刘兴楼;方峰;王慧;张慧娟;罗丹;周玉峰;李革

    目的 研究鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养神经干细胞(NSCS)Wnt信号通路下游分化相关靶基因表达的影响,以探讨CMV先天感染致胎脑发育异常的分子机制.方法 体外分离培养BALB/c胎鼠NSCs,用感染复数(MOI)为5、1和0.1的MCMV Smith毒株感染NSCs并进行分化培养,Western blot法检测病毒感染后NSCs Wnt信号通路下游分化相关靶基因c-myc、cyclinD1、ngn-1、ngn-2蛋白表达水平的动态变化,real-time RT-PCR检测病毒感染后NSCs Wnt信号通路关键分化基因ngn-1 mRNA水平的动态变化.结果 感染组c-myc蛋白表达量在分化培养后第0.5~5天均显著低于正常对照组(P<0.05);感染组cyclinD1蛋白表达量在第0 5天和1天显著低于正常对照组(P<0 05);在第2天和3天显著高于正常对照组(P<0.05);在第4天和5天,MOI=5组显著低于其他3组(P<0.05);感染组ngn-1蛋白表达量在第1~5天显著低于正常对照组(P<0 05);感染组ngn1 mRNA水平在第0 5~5天均显著低于正常对照组(P<0.05);感染组ngn-2蛋白表达先降后升,与正常对照组先升后降相反,MOI=0.1和1组峰值后移至感染后第5天,且明显低于正常对照组峰值(P<0.05).MOI=5组未表现出明显的峰值,各感染组ngn-2表达量在感染后1 d明显低于正常对照组(P<0 05);感染后2 d,MOI=5组明显低于正常对照组(P<0.05);在感染后3、4、5 d,各组ngn-2表达量又明显高于正常对照组(P<0.05).感染组和正常对照组的差异随病毒MOI的增加而更加明显.结论 MCMV感染明显抑制NSCs Wnt信号通路分化相关基因c-myc和ngn-1蛋白表达,抑制ngn-1 mRNA表达,并诱导cyclinD1和ngn-2蛋白表达紊乱,其效应随感染滴度增加而更为显著.MCMV抑制和干扰NSCs Wnt信号通路下游分化相关靶基因表达可能是其抑制NSCs增殖分化进而导致胎脑损伤的重要作用机制之一.

  • 禽流感H5N1亚型病毒感染BALB/c小鼠的免疫应答

    作者:黄韧;邓少嫦;王颖彦;张钰;吴玉娥;李文德;赵维波;刘香梅;郭震

    目的 研究禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠后对宿主细胞免疫功能和细胞因子水平变化的影响,探讨禽流感H5N1病毒感染哺乳动物的免疫发病机制.方法 选用鹅源禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠,采用流式细胞仪检测血液和脾脏T淋巴细胞及其亚群的变化,采用ELISA检测血液中细胞岗子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-18、IL-10、IL-2)及禽流感H5N1病毒特异性抗体的变化.结果 禽流感H5N1病毒感染可引起对宿主短暂的、可恢复的细胞免疫功能损伤:血液CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量于染毒后第2~4天下降(第4天为低值),脾脏T淋巴细胞数于染毒后第5~8天下降(第6天为低值),然后均逐渐恢复到正常水平.染毒后血液细胞因子变化表现为:血清IFN-γ、TNF-α水平下降,IL-4、IL-18、IL-10水平上升,IL-2水平无明显变化.从感染第7天开始检测H5N1禽流感特异性抗体为阳性,抗体水平逐渐升高至实验结束的感染第14天.结论 H5N1禽流感病毒感染可引起宿主T细胞免疫功能低下是其主要的免疫病理改变之一,细胞因子表达失平衡或过多的表达都可能对宿主产生免疫病理损伤.

  • 慢性乙肝患者抗病毒治疗前后特异性T细胞免疫观察

    作者:冯霞;闫惠平;廖慧钰;刘燕敏;张国元;赵艳;黄云丽;张海萍;王爽;王熠

    目的 了解抗病毒治疗前后慢性乙型肝炎患者特异性T淋巴细胞对HBV抗原蛋白免疫应答的变化及其特征.方法 收集17例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前及治疗后1个月、3个月的外周血单个核细胞,以HBV特异性抗原蛋白HBsAg、HBcAg和HBeAg为刺激物,酶联免疫斑点法检测其分泌IFN-γ产生斑点的情况.同时对血清HBV DNA和HBsAg、HBeAg等病毒学指标及谷丙转氨酶(ALT)等生化学指标进行榆测并分析其相关性.结果 治疗前,所有患者ALT、总胆红素(TBiL)均高于正常上限,17例患者HBV DNA均大于104拷贝/ml;治疗1个月后,ALT复常率为35.3%,9例患者HBV DNA降为检测下限以下;治疗3个月后,ALT复常率为58.8%,有11例患者HBV DNA降为检测下限以下.抗病毒治疗前、治疗1个月、治疗3个月患者针对HBV特异性蛋白总的T细胞反应阳性率分别为64.7%、76.5%和82.4%,其差别无统计学意义.不论治疗前后,患者对HBeAg的特异性T细胞反应频率和平均反应强度高;治疗后,对3种蛋白的特异性T细胞反应频率和平均反应强度各有不同程度的增加,其中以对HBcAg蛋白的平均反应强度的增强明显,治疗前和治疗3个月,治疗1个月和治疗3个月之间的差别都有统计学意义.患者对HBcAg蛋白的特异性T细胞反应平均反应强度与病毒载量有明娃负相关,与血清ALT无明显相关性.结论 本研究结果提示抗病毒治疗后,患者对HBV的特异性T细胞免疫应答有所增强,这种改变可能与HBV DNA的下降有关,检测HBV特异性T细胞反应对丁解患者的免疫状态有重要的意义.

  • 慢性HCV感染者外周血中髓样和浆样树突状细胞频数和表型研究

    作者:陈斯勇;梁华

    目的 探讨慢性HCV感染者外周血中髓样树突状细胞(mDC)和浆样树突状细胞(pDC)频数和表型的变化,并分析其与丙型肝炎临床指标间的相关性.方法 采用流式细胞术检测HCV感染者及健康对照外周血中mDC和pDC的频数及细胞表面共刺激分子HLA-DR、CD83、CD86、CD40和共抑制分子PD-L1的表达水平,并分析DC频数与HCV感染者血浆病毒载量、谷丙转氨酶(ALT)的相关性.结果 与健康对照组相比,HCV感染者外周血中mDC和pDC的频数明显降低(患者组分别为0.37±0.19和0.19±0.12,对照组为0.51±0.18和0.29±0.13,P<0.05),且mDC频数与血浆HCV载量和血清ALT水平呈负相关(r=-0.5878,P<0.0001;r=-0.4628,P=0.003).患者mDC和pDC表面共刺激分子HLA-DR、CD83、CD86、CD40以及共抑制分子PD-L1的表达均有不同程度升高,差别有统计学意义(共刺激分子P<0.01,共抑制分子P<0.05或0.01).结论 慢性HCV感染者外周血mDC和pDC频数下降,但DC表面共刺激分子和共抑制分子的表达均明显升高.该结果提示mDC数量的减少可能与HCV的慢性持续性感染有关.

  • 慢性乙肝患者HBV核心基因一组单核苷酸多态性与血清HBV DNA水平的相关性研究

    作者:李一荣;王雪平;陈凤花;袁琳;马荣红;温晓波;周志明

    目的 研究慢性乙肝患者HBV核心基因的单核苷酸多态性(SNP)与血清HBV DNA水平的相关关系.方法 采用PCR-RFLP和限制性内切酶Tsp509I榆测HBV核心基因的SNP,采用双脱氧终止法对核心基因进行序列测定,实时荧光PCR技术用于HBVDNA水平的定量检测.结果 慢性乙肝人群中发现5种典型的PCR-RFLP图谱,分别是RFLP-C、RFLP-D、RFLP-E、RFLP-G和RFLP-C/G,各种RFLP图谱的分布频率依次为61.5%、2.6%、9.6%、16.7%和9.6%.A165T、A336C、A336T、T337C和T385C等5种SNP与RFLP图谱的变化有关,但是只有SNP A336C和A336T会导致HBcAg第83位的Glu被Asp所替代.RFLP-C组患者的血清HBV DNA水平显著高于RFLP-G组(P=0.02)和RFLP-C/G组(P=0 006),而且RFLP-C/G组患者血清ALT的阳性率显著低于RFLP-C、RFLP-E和RFLP-G组;当HBeAg阳性时,RFLP-C组患者的血清HBV DNA水平显著高于RFLP-G组(P=0.015)和RFLP-C/G组(P=0.008).结论 本研究中使用的PCR-RFLP能够用于检测核心基因的SNP,RFLP-C组患者的血清HBV DNA水平显著高于RFLP-G组和RFLP-C/G组,可能与Glu83 Asp突变有关.

  • 主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关蛋白A新等位基因的发现

    作者:谭茵;黄颖烽;徐秀章;叶欣;魏亚明;古维立

    近年来,随着对肿瘤研究的深入,组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)基因多态性与肿瘤的关系越来越受到重视.本研究报道在恶性肿瘤病人MICA基因与疾病相关性研究中,发现一例广东籍肺癌病人标本在MICA*002位置出现基因突变,与世界通用MICA数据库已有序列不相符,是一个MICA新等位基因系列.

  • 结核病易感相关免疫基因研究进展

    作者:刘丹;王红艳;王洪海

    结核易感性与遗传、环境、年龄、性别、HIV感染、营养缺乏、BCG接种和吸烟等宿主因素有关[1].其中,遗传因素是影响结核易感性的重要因素[2],可以影响结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculos,Mtb)与宿主免疫系统间的平衡关系,终导致不同的感染结局.

  • 滤泡辅助性T细胞在自身免疫病发病机制中的作用

    作者:崔冉;徐建华

    滤泡辅助性T细胞(T folliculal helper cells,Tfh)是新近发现的辅助性T细胞亚群中独立的一类细胞.Sehaerli等[1]2000年首次发现这种来自扁桃体的记忆性T细胞,命名为Tfh细胞.

  • 梅毒血清学诊断试剂的临床检测与效果评价

    作者:余斌伟;董建英;吴来林;严杰

    梅毒是由梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体(Treponema paltidum)感染引起的传染性强、危害较大的人类性传播性疾病(STD)[1].据世界卫生组织(WHO)报告,成人每年新发梅毒1200万,已成为严重的公共卫生问题[2].

  • 菠萝过敏原profilin的克隆、表达及免疫学鉴定

    作者:罗新萍;张艳妹;刘志刚

    超敏反应性疾病是较为常见的危害人类健康的疾患之一,食物过敏在我国已屡见不鲜.菠萝,又叫风梨,属凤梨科多年生草木,是药食兼优的热带水果.

  • Vero细胞传代过程中致瘤性的检测

    作者:李爱灵;王红燕;张月兰;赵玉秀;马可;张颖;张晋;梁宏阳;赵硕;王辉

    目的 为生物制品生产及研究用Vero细胞体系传代过程中的遗传安全性评价提供实验数据.方法 对Vero细胞进行传代与冻存,并对不同代次Vero细胞进行体外与体内致瘤性检测,同时对不同代次Vero细胞的蛋白质表达进行差异性分析.结果 Vero细胞传代至270代并建立了14个细胞冻存库;不同代次Vero细胞体外与体内致瘤性检测结果均为阴性;200代以上的Vero细胞蛋白质表达水平有所变化.结论 Vero细胞传代过程中虽然体外与体内致瘤性检测结果为阴性,但蛋白质组学分析有差异性蛋白表达,这为Vero细胞传代过程中的遗传安全性评价提供了实验参考.

  • 利用Au蛋白芯片技术快速鉴定铜绿假单胞菌的研究

    作者:解春宝;肖代雯;杨永长;姜伟;刘华;黄文芳

    目的 利用Au蛋白芯片建立铜绿假单胞菌蛋白指纹图谱诊断模型,为铜绿假单胞菌感染快速鉴定奠定基础.方法 收集临床分离鉴定的铜绿假单胞菌64株及对照菌199株,随机分成训练组和验证组.运用表面增强激光解析电离飞行时问质谱技术及Au蛋白芯片(proteinchip golden array)检测铜绿假单胞菌及对照菌的蛋白表达,用Ciphergen Proteinchip和BioMarker Wizard软件自动采集数据,筛选铜绿假单胞菌特征性蛋白.结果 经 BioMarker Patterns 软件建立分类树模型.利用该模型对29株铜绿假单胞菌和64株对照菌进行盲法验证.结果 在相对分子质量3000~20 000范围内共检测到80个蛋白峰,其中具有统计学差异的蛋白峰58个(P<0.01).BioMarker Patterns软件判别分析,择优选出质荷比(M/Z)为14 045.2的蛋白质峰建立铜绿假单胞菌分类树模型.验证结果表明其对铜绿假单胞菌诊断的灵敏度和特异度分别为96.55%(28/29)、100%(64/64).结论 利用Au蛋白芯片技术可快速鉴定铜绿假单胞菌.

  • 中国系统性硬化症患者硬皮病相关自身抗体的检测及其临床意义

    作者:白伊娜;王迁;胡朝军;徐东;侯勇;李梦涛;赵久良;曾小峰

    目的 检测中国系统性硬化症(SSc)患者血清中硬皮病相关自身抗体-抗Sol-70抗体、抗着丝点抗体(ACA)和抗RNA多聚酶Ⅲ抗体(ARA),分析其与各种临床表现之间的关系.方法 序贯纳人入选欧洲抗风湿病联盟硬皮病实验研究组(EULAR Scleroderma Trial and Research Group,EUSTAR)的135例巾国SSc患者,分别用线性免疫印迹法、免疫双扩散法和间接免疫荧光法检测ARA、抗Scl-70抗体、ACA在患者血清中表达水平,并进一步分析自身抗体与患者各种临床表现之间的相关性.结果 在135例SSc患者中抗Sel-70、ACA、ARA的阳性率分别为49 6%、13 3%和8.9%.抗Scl-70抗体阳性组患者的病程显著短于阴性组[(71±59)个月vs(90±103)个月,P=0 041],肺问质病变的患病率亦显著高于阴性组(P=0.031),但阳性组肺动脉高压的患病率显著低于阴性组(P=0 042),修订的Rodnan皮肤硬化评分(P=0 008)、面颈部皮肤硬化(P=0.002)、肘/膝关节远端皮肤硬化(P=0.004)以及指端凹陷性瘢痕/指垫消失的发生率(P=0.01)均显著高于阴性组;ACA附性组患者的病程长于阴性组,差异具有统计学意义[(90±107)个月vs(69±64)个月,P=0.036],肺间质病变的患病率显著低于阴性组(P=0 045),IgM水平亦显著低于阴性组(P=0 045);ARA阳性组和阴性组患者的病程等各项临床指标差异均无统计学意义,但阳性组血清肌酐和尿素氨水平显著高于阴性组(P<0.001).ACA和ARA患者各项皮肤硬化指标在阳性组和阴性组差异均尤统计学意义.结论 硬皮病特异相关的自身抗体与不同的临床表现紧密相关,检测此类抗体可能有助于SSc的诊断、脏器受累和预后评估.这些自身抗体在中国SSc患者的临床相关性可能不同于其他地区的SSc患者.

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