药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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青蒿同源四倍体的诱导及农艺性状的评价
以青蒿组培苗幼嫩顶芽为材料,研究了秋水仙素诱导染色体倍性变异的佳浓度和适处理时间,结果表明:用0.2%秋水仙素溶液处理其试管苗幼嫩顶芽24 h的诱导方法有利于四倍体的产生,诱导率达到36%.显微镜观察变异植株根尖染色体数目为2n=4x=36条,苗床生长2个月后,四倍体植株农艺性状较二倍体有明显的优越性.
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抗MRSA小链霉菌NIM521发酵工艺的优化
小链霉菌NIM521能产生对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有强烈抑制作用的活性物质.利用单因素多浓度和正交实验法对其发酵培养基组分及发酵条件进行了优化,并在优化后的条件下进行了20 L罐发酵放大实验.实验表明该菌的适培养条件为:培养基含麦芽汁9%、蛋白胨6%、L-甲硫氨酸0.02%、维生素C 0.02%;培养温度30℃、转速250 r/min、接种量15%、发酵时间6 d.优化发酵条件下,20 L发酵罐发酵5 d时发酵液抑菌圈直径可达37.5 mm.
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鲨肝刺激物类似物sHSA原核表达载体质粒稳定性的考察
研究原核表达载体pET-sHSA基因工程菌株传代50代过程中菌种的稳定性.采用LB液体培养基传代的方法考察了传代对菌种稳定性的影响.以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱及表达量等方面进行考察,以评价工程菌的稳定性.结果表明:pET-sHSA工程菌株在传代50代过程中具有较高的质粒稳定性.传代10代内质粒稳定性(ST)高达97%,传50代后质粒稳定性(ST)为82%.且重组产物表达量保持稳定,表达产物可达发酵液可溶性蛋白总量的40%,由此证明了表达载体pET-sHSA工程菌株具有传代稳定性,适合工业化生产.
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RP-HPLC法测定精蛋白胰岛素注射液中硫酸鱼精蛋白的含量
建立RP HPLC测定精蛋白胰岛素注射液中硫酸鱼精蛋白含量的方法.采用C-18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调至pH1.8),流动相B为乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调至pH1.8)(35:65),采用梯度洗脱,柱温为55℃,总流速为1.0 ml/mim检测波长214 nm,进样量为100μl.结果:硫酸鱼精蛋白在0.101～1.013 mg/ml呈线性关系,回归方程为A=4.534×105+3.839×107C,r=0.999 8;平均回收率为101.01%,RSD%为1.05(n=9).此法快速、简便、准确,可测定各种胰岛素注射剂中硫酸鱼精蛋白的含量.
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HPGPC法测定低分子右旋糖酐氨基酸注射液的右旋糖酐40分子质量和分子质量分布
建立低分子右旋糖酐氨基酸注射液中右旋糖酐40的HPGPC测定方法.采用高效凝胶色谱法,色谱柱为TSK-Gel 4000GPWXL(7.8 mm×300mm);流动相为0.7%硫酸钠(含0.02%叠氮钠)溶液;流速0.5 ml/min;柱温35℃;示差折光检测器.多糖重均分子质量的线性范围为1000～133800(R2=1.0000),测定的重均分子质量为35742.本法简便、快捷可用于低分子右旋糖酐氨基酸注射液中右旋糖酐40的分子质量和分子质量分布测定
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长春花激素自养型细胞株C20hi中阿玛碱过量合成分子机制研究
通过RT-PCR半定量技术分析了长春花生物碱生物合成过程中7个关键酶基因在长春花激素自养型细胞株C20hi及其母株C20D中转录表达水平的差异,发现关键酶基因asa、tdc、hmgr、g10 h、scs,sss、sgd在C20hi中的转录表达水平高于C20D中的表达水平.推测,长春花激素自养型细胞株C20hi中阿玛碱的过量合成可能与2,4-D抑制了阿玛碱生物合成关键酶的表达水平有关.
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顺式DNA元件在长距离的增强子与启动子之间的调控机制研究
大片断基因复合物经常使用顺式DNA作用元件来确定对基因活性的适当的调节.这些长片断基因复合物中的转录增强子远距离激活启动子,然而却很少有人研究过这些远距离相可=作用的机制.来源于果蝇双胸复合物的Abd-B区域的启动子靶向序列(PTS)可以促进增强子启动子的相互作用.在这篇文章中.我们的研究证明PTS能够克服增强子抑制型的绝缘子的作用,并且可以促进一个远程增强子的作用,将转录活性仅仅限制在两个有效启动子的其中一个上面.我们又证明:PTS能够克服多个绝缘子的作用.我们假设PTS可以在增强子和启动子之间建立一个稳定的染色质结构,这个结构可以推动并且限制一个增强子到单个启动子上.这些发现为研究PTS的作用机制提供了有力的工具,并为揭示增强子一启动子相互作用和绝缘子相互作用机制的基本问题提供了一个新的突破口.
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一种蚯蚓脱氧核糖核酸酶分离纯化和性质研究
蚯蚓组织的NaAc抽提液经过热变性、酸变性和丙酮分段沉淀,再经过DEAE-Sepharose和CM-Sepharose层析纯化,从中分离纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(EWD2),经SDS-PAGE电泳、基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF)、毛细管等点聚焦电泳法测定.此DNase的相对分子质量测定为69 100,明显大于已发现的DNase Ⅰ和DNaseⅡ.该酶的等电点为6.05,温度稳定性、pH稳定性、激动剂和抑制剂等各项参数,与已发现的各种DNase相比较有明显差别.结果提示,蚯蚓组织中发现的这种脱氧核糖核酸酶具有特殊的酶学性质,可能是一种新型脱氧核糖核酸酶,其作用机理和分类还有待于进一步的研究.
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效应物促进红酵母累积番茄红素的工艺研究
研究红酵母(Rhodotorula)在发酵产生番茄红素过程中,添加番茄红素环化酶抑制剂、表面活性剂和氧化剂对番茄红素生物合成的影响.试验表明.环化酶抑制剂可阻断番茄红素进一步环化转化为β-胡萝卜素,较大幅度提高番茄红素的积累量.抑制剂的佳加入时间为发酵开始后28 h,总共培养时间为72 h.不同阻断剂作用效果的比较表明,N-甲基吗啉和烟叶水提液促进番茄红素积累的效果要优于咪唑和吡啶.添加抑制剂同时添加氧化剂或表面活性剂均可促进番茄红素的积累,当添加5 ml/L N-甲基吗啉和0.5 ml/L tween-80时,番茄红素生物合成量可达到11.79 mg/L.
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毕赤酵母表达重组hPK-5蛋白不均一性的鉴定
对毕赤酵母表达重组人纤溶酶原Kringle 5(hPK-5)蛋白的不均一性进行了鉴定.应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法及分子排阻高效液相色谱(SEC-HPLC)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行纯度分析.采用糖蛋白染色法鉴定是否为糖蛋白.以Edman降解法测定N端氰基酸,采用高效液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)联用技术测定蛋白质精确分子质量.结果表明:SDS-PAGE测定为单一条带,纯度大于95%,SEC-HPLC测定为单一色谱峰,纯度大于95%,RP-HPLC测定为几个紧密相连的峰.糖蛋白染色为阴性.N端氨基酸测定结果表明含多个N端氨基酸.液质联用测定精确分子质量的结果表明hPK-5蛋白是相对分子质量分别为10 744.88,10 646.00,10 533.00和10 419.63的混合物.以上结果准确鉴定出毕赤酵母表达的该重组hPK-5蛋白是C端完整而N端依次缺失0～3个氨基酸的不均一蛋白.
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中药复方H3C-1对肝癌细胞SMMC-7721基因表达的影响
检测中药复方H3C-1对肝癌细胞SMMC-7721细胞生长,及肝癌相关基因表达的影响.利用MTT比色法检测复方H3C-1对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖方面的影响;利用以肝癌cDNA抑制性消减文库构建的肝癌相关基因微阵列.检测复方H3C-1作用肝癌细胞SMMC-7721 36 h后基因的表达变化.结果显示中药复方H3C-1作用肝癌细胞SMMC-7721后36h.观察到有31个基因表达下凋,1个基因上调.中药复方H3C-1对肝癌肿瘤细胞的作用是通过影响多基因的表达改变实现的;该研究为复方H3C-1的抑癌分子机理提供了重要线索.
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抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定
为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYYB11-CM4N.重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋白intein-CM4N主要以可溶形式存在于胞内.利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导intein的自我切割活性,实现CM4N在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度95%以上的重组CM4N.活性检测结果显示,重组CM4N具有抗大肠杆菌、沙门氏菌和K562肿瘤细胞的活性.研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中可能具有重要的应用前景.
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基因重组毕赤酵母表达瑞替普酶的研究
对溶栓药物瑞替普酶在重组毕赤酵母中的表达进行了研究.摇瓶培养时,对pH、甲醇浓度和诱导相起始OD600 nm进行三因子四水平L16(43)的正交实验.结果表明,甲醇浓度的影响显著.表达量高的组合为A2B4C4,生长好的组合为A2B4C2.验证实验显示,A2 B4 C4的表达量为7.72 mg/L,A2B4C2达到的干重为44.8 g/L.高密度培养结果表明.诱导相佳甲醇浓度为4‰左右.此时,菌体各阶段的平均比生长速率μ均为大,表达量也高,为435.6 nag/L.同时,诱导相pH为6.5时rPA的表达量高,达到487.0 rag/L.研究发现,pH为4.5和6.5时,39 ku、41 ku和60 ku的蛋白质间存在反对应关系,初步猜测它们之间可能存在某种修饰关系,需要进一步研究.
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超临界CO2流体技术制备纳豆激酶肠溶微丸的初探
以异丁烯酸-丙烯酸乙酯共聚物Eudragit L100-55为包衣材料,利用超临界CO2流体技术制备纳豆激酶口服肠溶包衣微丸,考察包衣效果,为纳豆激酶口服制剂的研究和开发提供实验依据.采用正交表考察各种因素对试验结果的影响;并按药典规定考察微丸在不同pH释放介质中的药物活性及释放行为.结果显示适反应条件为:包衣材料和载药微丸质量比为1:2,反应压力和温度分别为20 MPa、35℃,增塑剂柠檬酸三乙酯及助溶剂乙醇均为10%(V/m),抗粘剂滑石粉虽对包衣反应稍有影响.但能显著改善微丸粘连问题.体外实验结果表明所制备的佳状态肠溶微丸在人工胃酸(pH1.2)环境中2 h仅释放9.7%,并能保持近90%的活性状态;在pH6.8的模拟肠液释放介质中2 h内快速释放达75%.以超临界CO2流体技术制备的纳豆激酶口服肠溶包衣微丸,在人工胃酸环境中几乎不释药,可避免胃酸环境对纳豆激酶活性的破坏;在pH6.8的类肠液环境中药物释放快速而完全,有利于纳豆激酶在肠道中的吸收.
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超声对有机溶剂中酶促反应的影响
作为一种环境友好的技术手段,近年来超声波在有机化学研究中的应用发展十分迅速.由于超声的机械效应能够提高非均相反应体系的反应速度,因此超声在非水酶学的研究中也是一种有效的技术手段.文章较为详细地介绍了超声在非水酶学中的应用,同时评述了超声辐射作用下酶在有机溶剂中催化反应的影响因素,也探讨了超声辐射影响酶促反应的可能作用机理.
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基因疫苗微粒系统黏膜免疫的研究进展
微粒系统作为一种基因疫苗的黏膜免疫递送系统,能够增强免疫效果,具有同时诱导系统免疫应答和黏膜免疫应答、产生共同黏膜免疫应答、增加病人的顺应性、降低疫苗推广成本等优点.文章综述微粒系统增强基因疫苗黏膜免疫效果的机制、常见的微粒系统、载体材料以及优化微粒系统的研究进展.
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基于细胞模型的高通量药物筛选
随着高通量药物筛选发展的需要,细胞模型在药物筛选中发挥了越来越大的作用.本文综述了细胞模型在药物高通量筛选中的应用.主要介绍了该模型基础上的筛选流程、模型分类及其在实际药物筛选中的应用,并对其相关的检测技术进行了阐述,以及对其发展前景进行了分析.
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前导序列工程
在传统的蛋白质工程中,为了改变酶的特性,常采用诱变等方法在蛋白酶结构域中引入突变.在前导序列调节蛋白折叠机制的基础上,文章介绍了一种新的蛋白质工程技术--"前导序列丁程".前导序列工程是指当前导序列发生突变时,同一种多肽链可以折叠成具有不同高级结构、稳定性或特异性改变的构型.前导序列工程不仅是研究蛋白质折叠机理的重要丁具.更是创造新型蛋白酶的一种十分有前途的新技术.文章以枯草杆菌蛋白酶为例,介绍了前导序列工程的意义与应用.例如.枯草杆菌蛋白酶在突变前导序列作用下可以得到底物特异性改变的酶,并且可以提高自动处理效率.-个枯草杆菌蛋白酶同族的前导序列可以作为变性枯草杆菌蛋白酶折叠的分子内伴侣帮助其折叠.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
