药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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HPLC法测定西咪替丁注射液中西咪替丁的含量
建立HPLC法测定西咪替丁注射液的含量的检测方法.采用高效液相的方法测定西咪替丁中的含量.色谱条件:高效液相仪Agilent 1260;Agilent SB-18色谱柱;流动相:0.05 mol/L磷酸二氢钾(pH 3.0):乙腈(90∶10);体积流量1.0 mL/min.进样量:10 μL,柱温为30℃;检测波长218 nm;使用高效液相色谱法可以准确有效地测定西咪替丁注射液的含量.线性范围为2.008 ～40.16 μg/mL,相关系数R2=1.000,线性关系良好;平均回收率为101.7％(RSD 1.46％).本方法专属性好,准确、灵敏,适用于西咪替丁注射液的含量测定及鉴别,结果可靠.
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西藏工布乌头叶片DNA提取方法的优化
以西藏卡门地区工布乌头叶片为材料,研究影响其DNA提取效果的关键因子,以期建立优提取体系.该研究采用传统CTAB法、改良CTAB法(增加了2％的PVP、β-巯基乙醇)、SDS法、改良SDS法(异丙醇进行-20℃预冷)、试剂盒法(吸附柱)、改良试剂盒法6种方法对工布乌头叶片DNA提取并进行比对,结果表明,采用改良后的方法,提取的DNA质量较好,且改良CTAB法提取效果更佳;其中改良试剂盒法提取的DNA较纯,琼脂糖凝胶电泳条带亮,杂质少;若考虑经济因素,则以改良CTAB法为优.
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多元醇对全人源抗VEGF165单克隆抗体构象稳定性及胶体稳定性的影响
通过研究4种多元醇(海藻糖、甘露醇、山梨糖和蔗糖)对全人源抗VEGF165单克隆抗体(HVAB)构象及胶体稳定性的影响,筛选出优的HVAB稳定剂并探讨多元醇稳定抗体的作用机制.该研究运用差示荧光扫描法(Differential scanning fluorimetry,DSF)判断多元醇对抗体热稳定性的影响;采用圆二色光谱(Circular dichroism,CD)和二阶导数色氨酸荧光光谱探讨多元醇对抗体构象稳定性的影响;聚乙二醇诱导抗体发生液-液相分离现象判断多元醇对抗体胶体稳定性的影响.结果表明4种多元醇均能提高抗体的热稳定性及胶体稳定性;多元醇作为辅料添加到溶液中会引起抗体构象发生变化,圆二色谱结果显示HVAB二级结构发生变化,但仍然以β-折叠为主;海藻糖和甘露醇引起HVAB发生去折叠,并未引起抗体发生聚集或片段化,同时提高了抗体的胶体稳定性;山梨糖提高抗体Tm值效果明显,在稳定抗体胶体结构方面也表现突出,且作为添加剂对抗体二级结构影响小.说明抗体的构象稳定性和胶体稳定性相互影响;山梨糖可作为HVAB的优稳定剂.
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气相色谱法测定苯甲醇注射液的有关物质
建立应用气相色谱法测定苯甲醇注射液有关物质的方法.采用Phenomenex ZB-WAX (30 m×0.32 mm ×0.5 μm)毛细管色谱柱,程序升温(初始温度为50℃,保持15 min,再以5℃/min的升温速率升至220℃,保持35 min);载气:恒流氮气;进样口温度200℃;FID检测器温度310℃.气相色谱法测定苯甲醇注射液中杂质与主成分能够完全分离,低检测量为1.4 ng.结论:该方法简单、精确、可靠,有关物质的分离度较好,可用于苯甲醇注射液质量控制.
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实时荧光定量PCR检测CYP2C9*3及VKORC1_C1173T基因多态性方法的建立
建立实时荧光定量PCR法检测人药物代谢基因CYP2C9*3及VKORC1_C1173T多态性,并确定适反应条件.该方法采用TaqMan-MGB(Minor groove binder,小沟结合物)探针技术,针对每个待检测位点设计特定的引物和探针,并优化引物、探针浓度;建立和优化反应体系,设计合理的PCR Enhancer组分;并对TaqMan-MGB探针特异性、敏感性和重复性进行评价,同时对部分实时荧光定量PCR产物样品进行测序验证.结果表明,TaqMan-MGB探针法对2个等位基因检测结果准确,检测方法特异性高;所构建方法线性关系良好(R2≥0.991),扩增效率为95.2％～109.9％,标准曲线斜率为-3 ～-3.5;检测灵敏度可达10拷贝/反应;随机样品TaqMan-MGB探针检测结果与测序结果一致.所建立用于基因多态性检测的TaqMan-MGB探针法具有简便、快速、准确、高效等特点,检测原理可用于各种SNP分型检测,具有广泛的应用前景.
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消瘤胶囊对肝癌细胞SMMC7721的抑制作用研究
观察消瘤胶囊对肝癌细胞SMMC7721的抑制作用.应用MTT法检测消瘤胶囊对肝癌细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测消瘤胶囊对肝癌细胞的凋亡作用.Transwell法检测消瘤胶囊对肝癌细胞的迁移抑制作用.MTT法显示,消瘤胶囊对肝癌细胞SMMC7721呈现出时间和剂量的依赖性,流式细胞术显示,随着消瘤胶囊作用时间的增加和剂量浓度的增加促进细胞凋亡的作用也随之增加,Transwell法显示,高剂量浓度的消瘤胶囊能更好的抑制肝癌细胞的迁移.实验证明消瘤胶囊可以抑制肝癌细胞SMMC7721的增殖和转移.
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HNF4α在非酒精性脂肪肝发生发展中的机制研究
为了探讨非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制,选用小鼠脂肪肝和离体肝原代细胞培养作为非酒精性脂肪肝模型.通过免疫印迹、逆转录-聚合酶链反应、免疫共沉淀和免疫荧光检测肝脏核因子4α(Hepatocyte nuclear factor 4-alpha,HNF4-α)核质分布、转录活性和HNF4α下游脂代谢相关基因和脂代谢的表达水平.结果显示:高脂饮食诱导肝脏脂质沉积,升高脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)、棕榈酸(Palmitate,PA)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平,这些因子能够激活蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC).PKC通过磷酸化显著抑制HNF4α下游基因微粒体甘油三酯转运蛋白(Microsomal triglycefide transfer protein,MTTP)和载脂蛋白B(ApolipoproteinB,ApoB)的转录活性,妨碍肝脏低密度脂蛋白(VLDL)的装配和甘油三酯(TG)外排.过多的甘油三酯滞留在肝脏,进一步加剧脂肪肝的发展.
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两株抗菌海洋细菌对白色念珠菌的抗菌作用稳定性研究
为了明确海洋细菌GM-1与变异菌株GM-1-2菌株的抗菌特性,以白色念珠菌(Candida albicans)为指示菌,采用牛津杯法测定海洋细菌GM-1及其变异菌株GM-1-2菌株的抑菌作用及其稳定性,比较2个菌株发酵液的抑菌作用.结果表明:GM-1和GM-1-2菌株及无菌发酵液对白色念珠菌均具有明显的抑制作用,变异后的GM-1-2菌株抑菌作用下降;两个菌株的抑菌作用在不同条件下稳定性不同.GM-1菌株发酵液100℃处理2h抑菌作用无明显变化,121℃处理20 min抑菌作用明显下降;GM-1-2菌株在80℃处理2h抑菌作用无明显变化,100℃处理2h抑菌作用降低,121℃处理2h抑菌作用消失;2个菌株的发酵液的抑菌作用在pH 6 ～8条件与未处理的对照无显著差异,pH高于8或低于6的条件下处理24h抑菌作用显著下降;发酵液经紫外线、光照以及胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K分别处理不同时间,其抑菌作用与对照无显著差异.表明海洋细菌GM-1及其变异菌株GM-1-2无菌发酵液对白色念珠菌的抑制作用较稳定,菌株变异后抑菌作用及其对温度的稳定性有所下降.
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丁香酚等植物提取物对变形链球菌及生物被膜的药效学研究
本文通过研究丁香酚(Eugenol)与黄芩(Scutellaria baicalensis)、葡萄籽(Grape seeds)、五倍子(Chinese gall)、柠檬(Lemon)的提取物对变形链球菌(Streptococcus mutans)及其生物被膜的药效,旨在从中筛选出具有防龋潜能的提取物.采用微量肉汤法测定5种天然药物的低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)、低杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC)、低抑制生物被膜浓度(Minimal biofilm inhibitory concentration,MBIC);微量稀释棋盘法测定任两种提取物联合使用时的分级抑菌浓度指数(Fractional inhibitory concentration indexes,FICI);构建生物被膜体外模型,测得提取物对生物被膜生成量的影响;计算各提取物作用生物被膜后被膜内的存活菌数量,并绘制杀菌曲线.丁香酚/柠檬的MBIC/MIC为1～2,在5种提取物中较小;丁香酚、五倍子及柠檬提取物在抑制生物被膜生成方面的效果明显优于黄芩和葡萄籽提取物;杀菌曲线显示柠檬、丁香酚杀菌效果较好,且二者具有一定的协同作用,可以将二者联合使用防龋.
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基于柠檬酸转运蛋白的高通量药物筛选细胞模型
柠檬酸转运蛋白(NaCT)为新发现的钠离子偶联的羧酸转运蛋白家族的一员,主要功能是负责转运三羧酸循环的中间体,近年来研究发现NaCT可能是治疗糖尿病和肥胖症的重要药物靶点.该研究构建了NaCT基因的真核表达质粒,通过稳定转染HEK293细胞,筛选得到了稳定表达NaCT的细胞系.利用RapidFire平台建立了基于NaCT的高通量药物筛选细胞模型,结果显示该模型能高效地转运柠檬酸,具有良好底物特异性和选择性,其转运能力可被Li+激活,被4,4-二异硫氰基芪-2,2′-二磺酸抑制.Z因子计算结果为0.69,提示其适用于高通量筛选.对两种不同类型化合物库的筛选获得了一系列NaCT抑制剂,包括14个小分子化合物和15个中药组分.基于NaCT细胞模型的成功构建为高通量筛选具有抗糖尿病及肥胖症作用的先导化合物提供了一个新平台.
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临床安替安吉肽方法学的建立及低剂量药代动力学研究
研究通过建立酶联免疫吸附分析法测定患者血浆中安替安吉肽浓度,并对静脉滴注7.5,15 mg/m2安替安吉肽后的药代动力学进行了研究.利用棋盘法确定实验用的抗原包被浓度为1∶3 200,安替安吉肽单克隆抗体包被浓度为1∶64000,该方法在线性范围5～640 ng/mL内相关性良好,回归方程为y=0.369 31x-0.194 99(R2 =0.996 2),批内及批间精密度RSD值均小于8％,回收率为100.57％ ～ 102.37％.药代动力学分析结果显示:单次静脉滴注7.5,15 mg/m2安替安吉肽后AUC0-135和AUC0-150分别为(2 067.829±384.392),(9 858.611±804.555) ng/(L·min),AUC0-∞分别为(2 110.049±382.736),(9 953.023±785.602)ng/(L·min),Cmax分别为(22.581±6.957),(153.150±21.963) ng/mL,T1/2分别为(9.179±2.756),(7.553±0.366) min;实验表明,本测定方法灵敏准确,特异性强,适用于静脉滴注安替安吉肽后肿瘤患者血浆中安替安吉肽浓度的测定及其药代动力学的研究.
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Klenow(exo-)的表达、活性测定及其在焦磷酸测序中的应用
野生的Klenow聚合酶具有3′-5′外切酶活性,会对引物进行切割而造成焦磷酸测序产生错误的延伸信号.为了制备缺失3′外切酶活性的Klenow聚合酶用于焦磷酸测序反应,该研究全合成了外切酶活性缺失突变的Klenow酶基因编码序列,将其插入到表达载体pET28a(+)中构建重组质粒,并转化到大肠杆菌中,表达外切酶活性缺失的Klenow酶(Klenow(exo-)).通过优化诱导温度、诱导时间与诱导剂浓度,得到了Klenow(exo-)的佳表达条件为30℃时诱导表达5h且IPTG浓度为0.1 mmol/L.利用Ni+柱亲和层析法纯化得到了相对分子质量约为67 000的重组Klenow(exo-)酶,并建立了基于生物发光的酶活测定方法,终将其用于焦磷酸测序反应.结果表明,制备的重组酶具有良好的聚合酶活性但缺失了3′外切酶活性,可成功测定DNA待测模板序列,为焦磷酸测序技术提供了一个有效的关键酶.
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传质模型在亲和层析中的应用
综述了传质模型的内容和其在下游分离纯化中的应用以及结合高通量筛选技术对传质模型研究方法的优化,重点介绍了传质模型包括吸附等温线模型和吸附动力学模型在亲和层析介质动态结合载量预测中的应用.与传统下游分离纯化工艺研发相比,采用传质模型,一方面能全面评估实验条件对层析工艺开发的影响,给工艺开发及优化提供新的思路,另一方面也能减少工艺开发时间和耗材用量达到降低工艺开发成本的目的.同时,高通量筛选技术在层析工艺开发中的大量推广也逐渐改变传统工艺开发流程,大大降低工艺开发成本.大量研究表明.通过研究吸附等温线和吸附动力学模型,能够对层析介质的静态吸附能力以及动力学行为进行描述,准确预测亲和层析中产品的穿透曲线和亲和层析介质的动态结合载量,与实验室规模层析柱上实验结果一致性好,有望广泛应用于下游纯化工艺参数的优化和探索中.
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连接肽在融合蛋白设计中的选择及应用
融合蛋白的设计中,经常需要用链接肽将不同功能的蛋白进行连接融合.连接肽的设计和选择对融合蛋白的表达、稳定性及功能活性至关重要.文章将常见的两种连接肽分为柔性(Flexibility)和刚性(Rigidity)进行比较说明.其中柔性连接肽即成柔软线性的一类易弯折的氨基酸序列,常见为(GGGGS)n重复序列(n=3～4);刚性连接肽即成稳固螺旋结构的一类长度固定的氨基酸序列,常见为(EAAAK)n重复序列(n=2～5).设计连接肽时应考虑长度、氨基酸成分、亲水性、构象、柔韧性及电荷等因素.连接肽中的氨基酸组成对柔性连接肽影响较大,而氨基酸排列影响着刚性连接肽的结构.文章结合近年来融合蛋白设计中两种常用连接肽的相关报道进行阐述,为连接肽的研究提供参考.
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γ-氨基丁酸——一种潜在糖尿病治疗药物研究进展
糖尿病是一种由胰岛素分泌缺乏、胰岛素抵抗或者两者兼有导致具有高血糖症状的代谢性疾病.Ⅰ型糖尿病中,β细胞损伤主要是由于自身免疫因素导致的;Ⅱ型糖尿病则主要由于代谢因素导致β细胞功能丧失,随之β细胞凋亡.GABA具有保护β细胞免受细胞因子、药物、氧化应激等诱导的凋亡,能够改善糖尿病的症状,同时GABA也具有抗炎症和免疫调节的功能.文章主要综述GABA对胰岛β细胞的保护、β细胞增殖作用和其信号调节机制以及潜在的治疗糖尿病的功能.这些研究能够提高对GABA调节胰岛β细胞再生功能的认识,为开发糖尿病治疗新疗法奠定了基础.
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老鹳草素的研究进展
老鹳草素是一种在自然界中分布广泛的多酚类化合物,具有多种生物活性.文章综述了近年来自然界中发现的老鹳草素的分离纯化及其在植物界的分布,其主要存在于栊牛儿苗科中的老鹳草属和大戟科的叶下珠属,并重点对其生物活性进行了概述,包括抗氧化、抗肿瘤、抗感染、代谢调节和免疫活性等.为进一步开发利用老鹳草素提供参考.
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VEGFA/VEGFR2作用于血管内皮细胞途径及其抑制剂研究进展
肿瘤血管生成受多种因素的影响,而且贯穿恶性肿瘤发生的全过程.血管内皮细胞生长因子受体2(Vascular endothelial growth factor receptor 2;VEGFR2)活化诱导的信号作用于血管内皮细胞是血管生成的主要控制者.通过查阅国外相关文献数据库本文归纳总结了VEGFR2信号作用于血管内皮细胞的途径主要包括影响内皮细胞的增殖、存活、迁移及血管通透性4种形式及其相应抑制剂,这些抑制剂已在美国食品药品监督管理局批准上市或处在临床研究中,如阿柏西普(VEGF-Trap)、贝伐单抗(Bevacizumab)、阿昔替尼(AG-013736)、瓦他拉尼碱(vatalanib)、卡博替尼(Cabozantinib)、Foretinib,XL64和布立尼布(Brivanib).通过研究VEGFR2信号作用于血管内皮细胞的途径,有望对进一步研究其抑制剂发挥重要作用.
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蛋白质药物的聚乙二醇定点修饰
随着生物药物的发展,蛋白质类药物在临床应用中具有越来越重要的作用.但是蛋白质药物也具有许多缺点.聚乙二醇是一种水溶性的高分子聚合物,对人体无毒副作用.用聚乙二醇对蛋白质药物进行修饰可以提高蛋白质药物的水溶性、降低免疫原性、延长半衰期、减少蛋白酶水解、提高稳定性等.传统的聚乙二醇修饰剂主要对蛋白质中的氨基进行修饰,修饰产物的均一性低、活性较差.而蛋白质聚乙二醇定点修饰技术针对蛋白质中特定的基团进行修饰,能够得到均一性高、活性高的产物,并且能够简化产物分离纯化的步骤,因此,近年来,蛋白质聚乙二醇定点修饰技术在生物化学领域得到广泛应用.文章概述了近年来聚乙二醇修饰剂的种类以及聚乙二醇定点修饰蛋白质药物的研究进展.
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HER-2乳腺癌多肽疫苗的研究进展
乳腺癌是女性常见的肿瘤相关性死亡原因之一,乳腺癌的免疫治疗已成为当前研究重点.多肽疫苗的主动免疫特异性刺激免疫系统诱导免疫反应,且能够有效降低自身免疫,在乳腺癌的治疗中受到越来越多的关注.HER-2过表达于乳腺癌细胞,因此可作为抗乳腺癌治疗的靶抗原.文章主要对乳腺癌相关抗原肽HER-2多肽疫苗的研究现状进行综述.
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刺激响应脂质纳米载体在肿瘤治疗中的研究进展
综述刺激响应脂质纳米载体的设计及释药机制,旨在为新型脂质类纳米载体的研究提供策略.参考近期相关文献,对不同类型的刺激响应脂质纳米载体的结构、性质及控制释药的原理进行整理和总结.刺激响应脂质纳米载体是利用肿瘤微环境特点(低pH、特定酶、氧化还原水平)或外部刺激响应(超声、热、磁)构建的具有控释作用的脂质类载体,其具有粒径小、生物相容性好、体内可降解、低毒性与低免疫原性等自身优点,同时其控释特性有利于增强肿瘤治疗效果,减轻毒副作用,提高患者顺应性.刺激响应脂质纳米载体作为一种理想和新型的递送系统在肿瘤治疗上有很好的应用前景.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
