中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
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不同桩核材料对桩冠箍效应影响的三维有限元分析
[目的]研究桩冠修复中不同桩核材料对箍效应的应力分布影响,探讨箍效应的生物力学机制.[方法]建立正常上颌中切牙烤瓷核桩冠箍效应的三维有限元模型,模拟四种桩核材料(A组:铜合金,B组:金合金,C组:镍铬合金,D组:钛合金)的修复形式,通过静态加载分析牙本质受力情况.[结果]4种不同弹性模量的桩核材料,其Von Mises应力峰值在颈部分别为铜合金17.6 MPa,金合金17.6 MPa,镍铬合金23.8 MPa,钛合金17.6 MPa,镍铬合金组应力高;在根部各组分别为26.8 MPa,22.9 MPa,39.3 MPa,26.9 MPa,金合金组应力小,镍铬合金组高,均有显著性差异(P<0.05).[结论]箍效应受桩核材料弹性模量的影响.高弹性模量的桩核材料,减弱了箍效应并使颈部及桩周牙本质应力过高.
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冲顶式上颌窦底提升植骨同期牙种植的实验研究
[目的]探讨用Summer's骨凿冲顶提升上颌窦底后窦底骨质和黏骨膜改变情况以及种植体与周围组织结合生物学变化,为临床应用该项技术提供进一步可靠的实验依据.[方法]16只狗随机分为提升高度不同(2 mm、4 mm)2组,每只狗植入种植体4枚,一侧植骨,一侧不植骨,在不同时间(3、6、12、24周)取材.标本经大体观察,放射检查,组织学检查,四环素荧光检查,抗BMP-2免疫组化检测.[结果]移植骨愈合良好,种植体形成骨结合,提升4 mm不植骨种植体顶端无骨形成.[结论]上颌窦提升2 mm种植体顶端有骨存在,提升4 mm时,植入种植体顶端多数情况下无骨存在.
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恒定分压CO2对羟基磷灰石溶解度的影响
[目的]应用固体滴定技术监测羟基磷灰石(Hydroxyaptite,HA)的溶解平衡过程,观察组织液生理浓度CO2对羟基磷灰石溶解度的影响.[方法]在恒温水浴系统中以HA为固体滴定物.测试液为KCl溶液(0.1 mol/L),并引入恒定分压的CO2(占空气体积比为3.5%±0.1%).半导体二极管激光为发射光源,散射光源探测器用于监测HA的溶解平衡过程并判断超越溶解平衡点所出现的沉淀(合共17次滴定终点).固体滴定总量用于代表溶解度等温线上的数据点.[结果]引入恒定分压CO2后测定的HA在KCl溶液中的溶解度高于其在KCl溶液中所得50倍以上.[结论]固体滴定技术利于监测HA的溶解平衡过程.溶液体系中CO2增加HA的溶解度.推测该现象与CO2-3形成的复合物密切相关.
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烟碱拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用
[目的]研究烟碱对皮质神经元的保护作用.[方法]在培养至第6天的皮质神经元中以不同浓度(1μmol/L,10 μmol/L,100 μmol/L)烟碱预孵2 h,再加入0.1 μmol/L秋水仙碱作用24 h.通过相差显微镜形态学观察,Hoechst33258核荧光染色进行凋亡率计数和测定乳酸脱氢酶相对释放量(LDH)的实验,再测试10 μmol/L预孵不同时间(0.5,2,8)h的烟碱对秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用.[结果]秋水仙碱可诱导皮质神经元调亡,烟碱可拮抗秋水仙碱的此种作用.其中10 μmol/L烟碱预孵2 h保护作用强.[结论]烟碱可拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用.
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强力霉素抑制鼠眼化学伤角膜新生血管形成
[目的]观察强力霉素对鼠眼化学伤角膜新生血管形成的影响.[方法]取SD大鼠42只,制成眼碱性化学伤模型,随机分为强力霉素治疗组与对照组,每组21只大鼠(右眼),治疗组强力霉素30mg/(kg·d)灌胃给药,对照组等量生理盐水灌胃.裂隙灯观察角膜新生血管、角膜水肿、上皮缺损愈合及眼前段情况,分别于3、7、14、21、28、35 d裂隙灯照相并计算新生血管面积及新生血管抑制率.[结果]两组大鼠伤后第1天角膜缘血管网扩张充血,3d时血管开始侵入角膜,7～14 d时新生血管达到高峰,14～21 d后新生血管逐渐回退;两组角膜新生血管长度、新生血管面积及角膜水肿程度存在差异P<0.05);各时间点角膜新生血管抑制率为35.8%～53.3%,随时间推移呈上升趋势.[结论]强力霉素能有效地抑制眼化学伤诱导的角膜新生血管形成.
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纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究
[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.
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尼莫地平孕期干预对生长受限仔鼠神经系统损伤的保护作用
[目的]探讨钙离子拮抗剂孕期干预能否减轻生长受限仔鼠神经系统损伤.[方法]将40只SD大鼠按妊娠先后顺序随机分为3组:①A组:不缩窄子宫动脉,不予尼莫地平治疗;②B组,缩窄子宫动脉,不予尼莫地平治疗;③C组:缩窄子宫动脉,术后予尼莫地平治疗.通过TUNEL法检测各组新生仔鼠皮层和海马CA1区神经元凋亡;Morris水迷宫法检测出生21 d后各组仔鼠学习记忆功能.[结果]①3组仔鼠皮层神经细胞凋亡率差异有统计学意义(F=55.63,P<0.01).其中C组仔鼠平均为(2.98±0.54)个/HP,低于FGR组(5.05±1.17)个/HP(P<0.01),但高于对照组(2.30±0.69)个/HP(P<0.05).②3组仔鼠海马CA1区神经元凋亡率差异有统计学意义(H=34.88,P<0.01).其中C组中位数为0.833(0.332)个/HP,低于B组1.5(0.75)个/HP(P<0.01),高于A组0.5(0.333)个/HP(P<0.01).③Morris水迷宫学习记忆功能检测,3组仔鼠5 d的训练差异有统计学意义,F(组间)=44.052,P<0.01;F(时间)=7153.846,P<0.01).C组仔鼠找到平台的时间较B组短(P<0.05),但较A组长(P<0.05)[结论]钙离子拮抗剂尼莫地平孕期治疗能对生长受限仔鼠神经系统损伤有保护作用.
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HA14-1诱导不同Bcl-2表达水平的白血病细胞凋亡
[目的]探讨HA14-1对不同Bcl-2表达水平的白血病细胞的作用以寻求克服白血病耐药的新药物.[方法]用不同浓度的HA14-1(0、25、50、75、100 μmol/L)作用于白血病细胞株(HL60、Jurkat clone E6-1、BALL-1),4 h后在流式细胞仪上检测细胞凋亡及作用0、1、3、4、5 h时细胞中胱冬肽酶(caspase)3和caspase9的含量.[结果]随HA14-1剂量的增加,存活细胞逐渐减少,HL60从(94.3±1.4)%降至(62.1±2.3)%;Jurkat clone E6-1从(94.7±1.5)%降至(12.4±1.3)%;BALL-1从(94.7±0.8)%降至(0.9±0.6)%.同一剂量时,不同细胞的存活率与Bcl-2表达高低呈负相关.随剂量的增加细胞凋亡率逐渐增加,如Jurkat clone E6-1凋亡率从(0.5±0.1)%上升至(60.1±2.6)%;在较高剂量时(100 μmol/L),细胞大幅度坏死,坏死率从<(3.3±0.6)%增至(26.8±1.6)%.在凋亡时,caspase9于1 h开始激活,caspase3于3 h开始升高.[结论]在一定剂量范围内,HA14-1通过抑制Bcl-2诱导细胞凋亡,HA14-1有可能成为克服白血病细胞耐药的新药.
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MAGE-3基因的表达、纯化及其抗血清的制备
[目的]构建MAGE-3的原核表达质粒,表达、纯化蛋白并制备多克隆抗体.[方法]利用RTPCR方法扩增MAGE-3基因片段,连接入原核表达载体pGEX-4T-1,构建MAGE-3的原核表达质粒pGEXMAGEE-3并测序.将该质粒转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,并通过谷胱甘肽巯基转移酶纯化系统进行分离纯化.用纯化的融合蛋白GST-MAGE-3免疫新西兰大白兔,ELISA法测定抗体效价,饱和硫酸铵沉淀法纯化抗体,Western-blot检测抗体活性.[结果]构建了pGEX-MAGE-3原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌经IPTG诱导后表达一相对分子质量约为72×103的蛋白,经GST融合蛋白纯化系统纯化,得到了MAGE-3的重组蛋白GST-MAGE-3.制备了兔抗GST-MAGE-3抗体.Western blot证实该抗体可与GST-MAGE-3蛋白特异性结合.[结论]获得了肿瘤抗原MAGE-3的纯化重组蛋白及其特异的多克隆抗体、为进一步研究MAGE-3抗原在肿瘤免疫治疗中的作用提供了一件检测工具.
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我国汉族人群免疫球蛋白α1基因增强子区域hs1,VNTR多态性与高加索人种的比较
目的]研究我国汉族人群免疫球蛋白α1基因增强子hs1, VNTR多态性分布特征,并与已报道的高加索人群特点作比较.[方法]提取201例汉族人基因组DNA,CR分别扩增含Iα1 hs1,片段,凝胶电泳分带鉴定基因型,并以测序证实.[结果]我国汉族人群Iα1 hs 1, VNTR多态性分布为BB型76例(37.8%),AB型65例(32.3%),A型24例(12.0%),C型23例(11.4%)AC型9例(4.5%)CC型4例(2.0%),与国外人群相比,C、AC、CC型分布频率显著高于高加索人群,而AB型分布频率显著低于高加索人群(x2=73.77,P<0.001).等位基因频率分析显示我国汉族人群同样与高加索人群存在显著性差异(x2=72.85,<0.001).[结论]我国汉族正常人群Iα1 hs1, VNTR多态性不同于高加索人群,突出表现为C等位基因频率及BC、AC、CC基因型频率显著高于高加索人群.这种差异有可能是导致一些IgA相关疾病在不同种族间发病率和临床表现型上存在显著差异的因素之一.
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肝癌特异性HSV-TK/CD基因表达质粒的构建及其杀伤活性
[目的]构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒.[方法]用平端连接方法将pUH-3质粒中822 bp的pALBeAFP片段(含有416 bp的白蛋白启动子pALB和406 bp的甲胎蛋白增强子eAFP)代替pCEA-CD/TK质粒的CEA启动子,用PCR法鉴定插入方向,构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒pALBeAFP-CD/TK.将pALBeAFP-CD/TK转染HepG2等4种肝癌细胞,MTT法测定前药GCV、5-FC对HepG2细胞的杀伤作用.[结果]获得pALVeAFP-CD/TK克隆,RT-PCR证实HepG2细胞转染pABeAFP-CD/TK后可表达自杀基因,pALBeAFP-CD/TK转染可使前药GCV、5-FC特异性地杀伤HeFG2细胞.[结论]肝癌特异性HSV-TK/CD基因表达质粒构建成功.
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国人外周血抗β-淀粉样蛋白抗体水平的依龄性变化
[目的]主动和被动免疫可以显著改善阿尔茨海默病(AD)的病理和临床过程,抗Aβ抗体在AD预防和治疗中的作用已得到肯定,测定健康人群外周血中的抗Aβ抗体的水平将有助于了解AD发病机制.[方法]收集1～89岁共210例健康人群的血清标本,以10岁为一个年龄组,共9组.采用间接ELISA法测定所收集人群的血清中抗Aβ抗体的相对滴度,并用Western blot法检测其抗Aβ抗体的特异性.[结果]健康人外周血中普遍存在抗Aβ抗体,并且随年龄血清中抗Aβ抗体水平逐渐增加,回归分析呈现线性关系;在60岁以上年龄组,抗体水平显著高于60岁以下的各年龄组(P<0.01).Western blot的结果显示抗Aβ抗体可以识别β-淀粉样蛋白.[结论]健康人群血清中存在着特异性的抗Aβ抗体,抗体的滴度呈依龄性增加.
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小径聚氨酯人工血管内皮化种子细胞的体外诱导分化及种植
[目的]探讨体外诱导骨髓单个核细胞分化成为内皮祖细胞,为小径聚氨酯人工血管内皮化提供合适的种子细胞的可行性.[方法]收集健康成人骨髓单个核细胞,置于纤维连接蛋白预衬的DMEM培养基中,用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)加以诱导,通过荧光显微镜和免疫组化分析等方法观察和鉴定诱导后的细胞.将诱导分化的内皮祖细胞种植到聚氨酯小径人工血管表面,用扫描电镜观察.[结果]在VEGF、bFGF等诱导因子存在的条件下,骨髓单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的"纺锤样"梭形细胞,单层细胞贴壁生长融合时呈铺路石样排列,免疫组化示VWF和CD34抗体染色阳性.扫描电镜下,未种植细胞的聚氨酯小径人工血管表面呈典型的多孔蜂窝状结构,孔径大小比较适合内皮祖细胞爬行.种植细胞后,聚氨酯小径人工血管表面有大量的内皮祖细胞黏附、爬行及铺展生长,有时可见内皮祖细胞长入蜂窝状孔径内.[结论]体外诱导骨髓单个核细胞分化为内皮祖细胞可作为小径聚氨酯人工血管内皮化的种子细胞.
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常见食源性感染致病菌属、种用PCR-RFLP及PCR-SSCP技术鉴定探讨
[目的]探讨运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)进行食源性感染常见致病菌属种鉴定的可行性.[方法]选择细菌23S rDNA基因作为鉴别细菌属的靶基因,通过设计合适的通用引物进行PCR扩增,并对13属食源性感染常见致病菌和5种不同血清型大肠杆菌扩增产物的酶切片段进行RFLP分析和SSCP分析.[结果]运用通用引物可以扩增出13属食源性感染常见致病菌的23S rDNA基因HpaⅡ酶切产物的RFLP分析表明,不同种属的致病菌表现出不同的RFLP图谱,利于进行细菌属的鉴定.不同种属食源性感染常见致病菌SSCP图谱变异性更大,不利于进行种属间鉴别.对5种不同血清型大肠杆菌的23S rDNA基因扩增产物的RFLP和SSCP分析表明,不同血清型大肠杆菌表现出相似的RFLP图谱,SSCP图谱的变异性较大,这有利于进行血清型间鉴别甚至株间的鉴别.[结论]PCR-RFLP和PCR-SSCP具有应用于食源性感染常见致病菌种、属鉴别诊断的潜力.
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大鼠小脑颗粒神经元凋亡相关的差异表达基因ARNT2的克隆
[目的]研究凋亡与非凋亡大鼠小脑颗粒神经元(cerebellar granule neuron,CGN)细胞中基因表达的差异,克隆出与大鼠CGN凋亡相关的基因.[方法]用荧光差异显示聚合酶链反应(florescent differential display polymerase chain reaction,FDD PCR)从低钾诱导的大鼠CGN凋亡模型中筛选出差异表达序列标签(expressed sequence tag,EST),反向Northern blot杂交进一步验证后,用cDNA 5′末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA 5′Ends,5′RACE)克隆差异表达EST的目标基因,用RT-PCR及Western blot进一步验证目标基因mRNA 及蛋白质水平的表达差异.[结果]用FDD PCR筛选出5号差异表达EST,经反向Northern blot验证后,用5′RACE法成功地克隆到5号EST完整开放阅码框,序列同源性分析证实为大鼠基因ARNT2,RT-PCR及Western blot证实低钾诱导后ARNT2mRNA与蛋白质水平的表达均显著地上调,统计学分析显示差异有显著性(P<0.001).[结论]ARNT2在低钾诱导的大鼠凋亡CGN中表达上调,提示ARNT2与CGN凋亡相关并在该过程中发挥重要作用.
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HSV型特异性糖蛋白抗体检测及其意义
[目的]探讨以HSV型特异性糖蛋白gG-1和gG-2为抗原的酶免疫方法检测生殖器疱疹(GH)HSV抗体的应用价值.[方法]以确诊复发性GH38例、初发GH8例为病例组,以31例健康献血者为对照组,用ELISA方法分别检测血清标本HSVgG1-IgG抗体及HSVgG2-IgG抗体,并进行结果评价.[结果]复发性GH患者血清HSVgG2-IgG阳性率为94.7%,初发GH患者阳性率为25%,对照组阳性率为9.7%.复发性GH血清HSVgG2-IgG阳性率明显高于初发GH及对照组的阳性率(P<0.05).复发性GH与对照组血清HSVgG1-IgG抗体阳性率相近,元明显统计学差异.[结论]以HSV的型特异性糖蛋白gG-1和gG-2为抗原检测血清HSV抗体是高敏感性和特异性的新一代酶免疫实验方法.通过病毒分离培养及血清学检测均说明HSV-2是本地区GH的主要病原体,用ELISA方法检测血清HSVgG2-IgG抗体可以检测出无症状HSV感染者,有助于对不典型GH患者的诊断并可作为流行病学调查的手段.
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改良程序化慢冻提高活检人胚胎的冻存率
[目的]探讨及Jericho改良方案用于冷冻活检后胚胎的效能.[方法]将92个质量相对较好的废弃人胚胎随机分配到单纯冷冻组(n=30),胚胎活检后标准程序化慢冻组(n=32)及胚胎活检后Jericho改良程序化慢冻组(n=30).将活检后的胚胎继续培养6～10 h,3组胚胎同时进行冷冻.观察各组胚胎冷冻解冻后的冻存率及囊胚形成率.[结果]活检胚胎采用Jericho改良方案冷冻后,胚胎存活率、完整率及囊胚率分别为73%,40%和23%,较活检后标准冷冻组(16%,13%和3%)显著提高(P值分别<0.001,0.05,0.05),达到单纯冷冻组的水平(P均>0.05).[结论]采用Jericho改良方案冷冻活检人胚胎优于目前的标准化慢冻方案,Jericho方案冷冻后的胚胎具备良好的发育潜能.
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胚胎干细胞联合羊膜移植治疗早期严重眼化学伤的实验研究
[目的]探讨应用胚胎干细胞联合羊膜移植治疗早期严重眼化学伤.[方法]将培养的表达绿色荧光蛋白的胚胎干细胞(ES-GFP细胞)接种于羊膜,5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记后对严重化学伤模型眼行胚胎干细胞羊膜移植,实验共分3组,对照组、单纯羊膜移植、羊膜+ES细胞移植组,每组12只12眼,通过荧光示踪、病理学、免疫组织化学等检查,观察胚胎干细胞的生长分化和移植治疗效果.[结果]ES-GFP细胞能贴附在羊膜上呈集落状生长,移植治疗术后第14天,角膜溃疡穿孔:对照组5眼、单纯羊膜移植2眼、羊膜+ES细胞移植组0眼,对照组和羊膜+ES细胞移植组比较,P=0.037<0.05;角膜新生血管和角膜混浊:对照组、单纯羊膜移植组和羊膜+ES细胞移植组得分分别为3.57±0.53,2.20±0.41,1.40±0.36,和3.72±0.49,2.8±0.42,2.25±0.45,羊膜+ES细胞移植组与对照组和单纯羊膜移植组比较P均<0.01;病理学等检查羊膜+ES细胞移植组:角膜表面羊膜呈均匀红染的纤维样结构,羊膜下多层上皮样细胞,角膜基质少量细胞浸润,新生血管少见,后弹力层轻度肿胀,上皮细胞AE-5染色阳性,细胞核内可见BrdU阳性颗粒,荧光显微镜检查角膜上皮层可见绿色荧光带.[结论]以羊膜为载体培养ES细胞,移植到早期严重眼化学伤的眼表,ES细胞诱导分化为角膜上皮样细胞.ES细胞联合羊膜移植能抑制角膜新生血管、减轻炎症反应、减少角膜溃疡穿孔.ES细胞联合羊膜移植可能为早期严重眼化学伤的临床治疗提供一条新途径.
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采用高频微波技术治疗月经过多病理机制的探讨
[目的]探讨频率9.2GHz微波行子宫内膜去除术治疗月经过多的疗效及其病理机理.[方法]收集44例月经过多行微波子宫内膜去除术的病例,随机取其中13例同时行术前术后宫腔镜检查及术后取子宫内膜作病理及电镜检查.术后随诊6～12个月,了解月经情况以判断疗效.[结果]MEA术后随机取的其中13例子宫内膜均呈急性热损伤改变,损伤深达基底层全层,基底层细胞基质细胞核固缩,部分细胞核核膜消失.细胞器分辨不清,变性坏死属不可逆改变.浅肌层中细胞平滑肌细胞较为完整,可见核仁、核膜,胞核异染色质边集,线粒体、内质网结构尚在,溶酶体肿胀但完整.变化尚处于可逆性阶段.术后随诊患者达到月经改善,无需再次手术治疗的成功率达91.4%(40/44),术后无严重并发症发生.[结论]高频微波能有效地破坏子宫内膜达基底层,而对子宫肌层无创伤,从而达到有效,安全治疗月经过多目的.
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哌醋甲酯对广州地区 ADHD患儿身高增长的影响
[目的]研究长期服用哌醋甲酯对广州地区ADHD患儿身高增长的影响.[方法]取323例ADHD患儿(262例男孩),在服用哌醋甲酯0.3-0.6 mg/kg的情况下随访2-4年.另取29例能坚持不服用哌醋甲酯的ADHD患儿作为对照组(男孩23例),同样随访2-4年.记录其身高的变化,分析各种因素的影响.[结果]治疗前后身高与同龄均值绝对差距(简称身高绝对差距)变化值平均为-1.71em,经t检验t=-30.803,P<0.001;治疗前后身高SDS变化平均为-0.12 SD,经t检验t=-8.46,P<0.001.对照组29例经过2-4年的观察,身高绝对差距变化值平均为-0.26 cm,而身高SDS变化平均为+0.05 SD.对用药组323例和对照组29例的前后身高绝对差距和SDS变化值进行独立样本t检验,结果显示t值分别为13.233和6.998,P值均<0.001.经多重逐步回归分析提示治疗前后身高绝对差距变化值与治疗持续时间之间差异有统计学意义(P<0.001),而与年龄、性别、分型、NJ22分度都无统计学意义(P>0.05).[结论]长期服用哌醋甲酯使ADHD患儿身高增长速度减慢,其程度与持续服用时间有关,应引起临床重视.
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光动力疗法对血管内皮细胞和视网膜色素上皮细胞的影响
[目的]研究光动力疗法(PDT)在体外对视网膜色素上皮细胞和血管内皮细胞的影响.[方法]将体外培养的视网膜色素上皮(RPE)细胞和血管内皮细胞与PDT治疗年龄相关性黄斑变性时血药浓度(1.0 μ/mL)相当的光敏剂verteporfin共同孵育,根据孵育时间的不同,每种细胞分成7组,即0 min组、5 min组、15min组、30 min组、60 min组、120 min组和对照组,孵育至上述时间后,分别用光敏剂大吸收波长的光照(689 nm、功率密度为600 mW/cm2的二极管激光),能量密度为2.4 J/cm2,用MTT法检测24 h后各处理组细胞的存活率.所有实验数据均以均数±标准差的形式表述,数值为3次独立重复实验的平均值,资料统计采用方差分析和t检验.[结果]PDT后24 h,RPE细胞在0 min组、5 min组、15 min组、30 min组、60 min组和120 min组的细胞平均存活率分别为:0.94±0.07、0.68±0.13、0.68±0.11、0.65±0.12、0.49±0.11和0.21±0.11,细胞的存活率随与光敏剂孵育时间的延长而下降,经单因素方差分析,不同时间组的细胞存活率有显著性差异(P=0.000),SNK-q检验,5 min组、15 min组、30 min组、60 min组、120 min组与0 min组比较都有统计学差异;血管内皮细胞在上述各时间组的平均存活率分别为:1.02±0.05、0.78±0.08、0.71±0.11、0.69±0.08、0.62±0.09和0.23±0.11,细胞的存活率随孵育时间的延长而下降,经单因素方差分析,不同时间组的细胞存活率有显著性差异(P=0.000),SNK-q检验,5 min、15 min、30 min、60 min、120 min组与0 min组比较都有统计学差异;PDT后两种细胞在相同时间组的细胞存活率经t检验均无统计学差异(所有P>0.05).[结论]PDT在体外对RPE细胞和血管内皮细胞均有快速地杀伤作用,两种细胞对PDT有相似的敏感性.提示临床上与脉络膜新生血管密切相关的RPE细胞可能受到PDT的损害,提出早期脉络膜新生血管进行PDT治疗可能减少对邻近的RPE细胞或神经细胞的损害.
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STR-PCR分析诊断常见染色体三体及其亲源性、染色体不分离时期
[目的]通过采用短串联重复序列结合聚合酶链反应(STR-PCR)技术对胎儿进行产前诊断以及对已知染色体21三体的病例进行检测,探讨STR-PCR技术诊断常见三体综合征,同时判断额外染色体的双亲来源以及染色体不分离发生时期.[方法]收集了51个家系的174例样本,其中产前诊断组35个家系,包括18例单胎妊娠和17例多胎妊娠家系;已知为染色体21三体患者16个家系.采用STR-PCR技术,扩增21号染色体4个位点;18、13号染色体各3个位点,诊断这些染色体三体综合征,与染色体核型对照;并判断额外染色体双亲来源和染色体不分离发生时期.[结果]检出18例完全型染色体三体综合征,包括21三体16例;18三体和13三体各1例,其中4例为产前诊断的胎儿.1例罗氏易位型和1例嵌合型21三体未能检出.14例21三体及1例18三体、1例13三体可确定额外染色体的亲代来源和不分离时期.[结论]STR-PCR技术在诊断多种完全型染色体三体的同时,可判断额外染色体的亲源性及分析染色体不分离时期.但对嵌合型和易位型染色体异常的诊断有待改进.
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尿毒症中蛋白质Z检测的意义
[目的]研究蛋白质Z(Protein Z,PZ)在尿毒症患者中的变化,探讨其临床意义及与凝血因子X(factor X coagulant,FX)的关系.[方法]PZ及凝血因子X抗原(factor X coagulant antigen,FX:Ag)用ELISA法检测,血浆凝血因子X活性(factor X coagulant activity,FX:C)采用一期法测定.对50例尿毒症患者血液透析前、后,80例健康者的PZ、FX:C、FX:Ag进行测定,作相关性比较.[结果]尿毒症患者血液透析前、后PZ均明显下降,分别为1 195 ng/mL±442 ng/mL与1 822 ng/mL±577 ng/mL,(对照组为2 301 ng/mL±472 ng/mL),P均<0.01,尿毒症血液透析前组的FX:C、FX:Ag明显升高,分别为119%±27%、99%±24%,尿毒症血液透析后组FX:C、FX:Ag仍是明显升高,分别为96%±12%、87%±19%,(对照组分别为85%±26%和78%±23%),P均<0.01.尿毒症血液透析前组和血液透析后组及对照组PZ与FX:C、FX:Ag之间存在明显负相关(P均<0.01).尿毒症血液透析前、后组比较PZ、FX:C、FX:Ag有明显差异(P<0.01),显示PZ水平的下降程度反映了疾病的病理过程.[结论]PZ水平在尿毒症患者中明显减低,而FX:C、FX:Ag明显升高,PZ与FX:C、FX:Ag存在明显负相关,FX升高的机制可能部分与PZ下降有关.提示PZ缺乏可能是尿毒症患者易患血栓性疾病的一个危险因素.
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声门上喉癌预后的相关因素分析
[目的]探讨影响声门上喉癌患者预后的主要因素.[方法]回顾性分析111例临床声门上喉癌的长期随访资料,生存分析采用Kaplan-Meier法,各因素间比较用log-rank检验,多因素分析采用Cox模型.[结果]单因素分析提示肿瘤原发灶部位、病理学分级、颈淋巴结转移、原发灶治疗方式均有统计学意义(P<0.05);多因素分析发现颈淋巴结有无转移(P=0.000)和原发灶治疗方式(P=0.000)对预后的影响有统计学意义.[结论]影响声门上喉癌预后的因素为肿瘤原发灶部位、病理学分级、颈淋巴结转移、原发灶治疗方式,其中独立预后因素为颈淋巴结转移和原发灶治疗方式.对于声门上喉癌患者,应选择以手术为主的治疗方式,有颈淋巴结转移者应行颈清扫术,临床未发现颈淋巴结转移的T3以上患者应行Ⅱ、Ⅲ区以及必要时包括Ⅳ区的颈清扫术.
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腭裂术后患者辅音/x/、/q/、/j/能量集中区的初步探讨
[目的]通过观察辅音/x/、/q/、/j/的能量集中区特征及其与其后跟随元音共振峰的关系,探讨辅音能量集中区在语谱分析中的意义和作用.[方法]腭裂术后患者组男女各10名,对照组男女各10名录制其普通话/xi/、/qi/、/ji/作定性观察,并定量分析/x/、/q/、/j/能量集中区的特征.[结果]患者/x/、/q/、/j/出现的能量集中区位置与其后跟随的元音/i/相应共振峰位置无显著性差异,而与正常组能量集中区位置有显著性差异.[结论]辅音/x/、/q/、/j/能量集中区变化可作为其发音障碍的诊断指标之一.
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Wilms瘤基因WT1 mRNA的FQ-RT-PCR定量分析研究
[目的]探讨WT1mRNA在Wilms瘤表达的临床意义及其与Wilms瘤生物学性状的关系.[方法]对22例Wilms瘤、瘤旁肾组织及血液标本行WT1 mRNA FQ-RT-PCR定量检测.用SPSS软件进行统计学检验,分析.[结果]肿瘤组织中WT1mRNA表达显著高于肾组织和血液,与年龄、性别、BWT或UWT无关.UH型高于FH型,而肾组织表达又较血液高,BWT血中WT1mRNA表达高于正常对照组及UWT组,而UWT与正常表达无差别.[结论]Wilms瘤基因WT1mRNA表达与Wilms瘤发生发展存在关联,且与肿瘤的病理及预后相关,表达越高病理类型及预后越差,但与WT患儿的年龄、性别、BWT或UWT无关.血WT1mRNA表达水平可能作为BWT的诊断或高危筛选指标.
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异丙酚和尼卡地平在眼科手术病人围拔管期应用的比较
[目的]观察气管拔管前静脉注射异丙酚和尼卡地平对眼科全麻手术病人拔管反应的影响.[方法]选择60例眼科手术全麻病人随机分为A、B、C 3组(n=20),分别于气管拔管前静脉注射异丙酚1.5 mg/kg、尼卡地平20 μ/kg和生理盐水,分析比较各组拔管期间心血管反应、躁动、呛咳等并发症,眼压的变化以及苏醒时间的差异.[结果]A组吸痰、拔管时和拔管后心率、血压与诱导前比较无明显差异,与用药前相比均明显下降(P<[英文作者单位].05),与对照组同时点比较,明显下降(P<0.05);B组吸痰、拔管时血压与诱导前比较无明显升高,与用药前比较明显下降(P<0.05),与对照组同时点比较,明显下降(P<0.05);B组和C组同时点心率与用药前比较无明显下降,B组心率与诱导前比较明显升高;C组吸痰、拔管时及拔管后2 min血压与用药前比较无明显下降.拔管期间以及拔管后A组呛咳及躁动的发生率明显低于B、C组(P<0.05);3组均无喉痉挛患者出现;舌后坠发生率A组略高于B、C组,但无明显差异.患者清醒时间3组无显著性差异(P>0.05);拔管时A组眼压与诱导前比较无明显升高,其他两组则有明显升高(P<0.05).[结论]眼科手术病人气管拔管前应用镇静剂异丙酚预防拔管反应效果优于尼卡地平,且不影响患者苏醒时间.
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Transwell培养体系中人AGM区基质细胞支持脐血CD34+细胞造血
[目的]探讨Transwell系统中人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐带血造血干/祖细胞的造血能力长期维持及扩增的作用.[方法]采用免疫磁珠方法分离人脐带血CD34+细胞,接种于底层铺有人AGM区基质细胞的Transwell培养板的Inserts中,非接触共培养7～35 d,每星期取样检测细胞总数,用半固体培养基分析CFU-C及HPP-CFU集落形成数,流式细胞术检测CD34+、CD34+CD38-细胞百分率.[结果]在Transwell中非接触共培养条件下,人AGM区基质细胞培养体系较胚胎躯干基质细胞和无饲养层培养体系对有核细胞总数、CFC和CD34+细胞均具有明显的扩增作用,共培养14 d的CD34+、CD34+CD38-造血干/祖细胞均获得峰值扩增(2.62±0.8和2.15±1.04,P<0.05),而MNC总数和CFC均在21 d获得大扩增(32.5±4.3和4.2±0.6倍,P<0.05).克隆分析发现CFU-Mix、CFU-GM、BFU-E在共培养4～5星期后均仍然可见.原始祖细胞HPP-CFC在3星期也得到2.23倍的扩增,较空白及hFT对照组均有显著性差异(P<0.05),并在共培养35 d后仍可见HPP-CFU集落形成.[结论]人AGM区基质细胞hAGM-S3/hAGM-S4均具有造血支持作用,在非接触共培养条件下中可长期维持脐血中造血干/祖细胞的多系造血能力和高增殖潜能达21～35 d,对脐血CD34+/CD34+CD38-细胞数也有一定程度的扩增作用.
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99mTc-methoxyisobutylisonitrile SPECT显像评估脑肿瘤治疗后复发与坏死
[目的]评价99mTc-methoxyisobutylisonitrile(MIBI)脑SPECT显像在鉴别脑肿瘤治疗后放射性坏死与复发的应用价值.[方法]对正常对照组5例、经手术或X刀治疗后的脑肿瘤患者20例行99mTc-MIBI脑SPECT早期及延迟显像,并将结果进行双盲比较.[结果]正常对照组两侧大脑半球脑实质呈对称放射性空白区,双侧侧脑室的脉络丛对称显影清晰.半定量分析发现:坏死组与复发组早期摄取比值(P=0.001)、延迟摄取比值(P=0.001)、滞留指数(P=0.003)之间均有显著性差异;各组早期摄取比值与延迟摄取比值之间(P=0.75,P=.38)均无显著性差异.坏死组与复发组正常值95%的可信区间分别为(1.41,2.60)、(3.11,5.11),其中假阳性1例,假阴性1例.[结论]99mTc-MIBI脑SPECT显像可帮助区分颅内肿瘤手术或立体定向放射治疗后的放射性坏死与复发,方法简单,操作简便,有重要的临床应用价值.
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体外反搏的生物力学效应与血管内皮功能
体外反搏通过反搏过程中产生的双脉动血流,加速动脉系统的血液流动,提高血流切应力,进而调控与血管内膜保护有关的细胞因子,产生对抗动脉粥样硬化的有益作用.本文简要总结近10年来本实验室在体外反搏与血管内皮细胞形态、功能关系方面的研究工作,重点阐述其血流动力学特点和对冠心病患者及实验动物血浆及组织中某些重要的生物活性物质的影响.单独体外反搏,或与其他治疗方法配合,可能成为一项有效的促进血管内皮细胞结构与功能修复的重要手段.与反搏作用相关的细胞分子基础及其信号转导途径尚有待进一步阐明.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
