中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
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心肌梗死后骨髓间充质干细胞治疗改进心功能及心肺复苏结果的研究
[目的]探索大鼠心肌梗死并经骨髓间充质干细胞(MSC)治疗后,心功能的变化及对其后进行的心肺复苏结果的影响.[方法]18只雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为两组,MSC注射组和磷酸缓冲液(PBS)注射组,每组9只大鼠.先开胸结扎左前降支冠状动脉,4周后再次开胸接受PKH26荧光标记的悬浮在PBS中的5×106MSC或仅用PBS梗死部位注射治疗,注射后2周及4周用超声心动图测量射血分数,4周时诱导心室颤动及进行心肺复苏,测量心肺复苏前及心肺复苏后4 h内的血液动力学参数的变化.并在心肺复苏72 h后取心肌组织进行病理切片检查.[结果]与注射磷酸缓冲液相比,注射MSC 2周(67%±4%vs 56%±5%,P＜0.001)及4周后(67%±6%vs 53±13%,P＜0.01)射血分数明显提高,心肺复苏前后的血液动力学参数包括心脏指数、dp/dt40、-dp/dt、左心室舒张末期压明显改善;虽然2组的复苏成功率没有明显区别,但72 h生存率2组比较有明显差异(58.6±20.6 vs 26.1±21.6,P＜0.05).心肌组织病理切片发现有大量的PKH26标记的细胞存在.[结论]心肌梗死后MSC治疗能明显改善心功能,同时也能明显改善心肺复苏前后的血流动力学参数及72 h生存时间.
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三七总皂苷对成年地鼠视网膜节细胞存活的影响
[目的]探讨玻璃体注射三七总皂苷(tPNS)对视神经切断后视网膜节细胞(RGCs)存活的作用.[方法]用荧光素逆行示踪标记法和定量解剖学技术观察正常和经tPNS处理的金黄地鼠于视神经切断后5、7、14 d时RGCs的密度.动物分为正常组、单纯切断视神经组(未注射组)、tPNS处理组和生理盐水对照组.[结果]正常RGCs平均密度为(1970±82)/mm2;视神经切断后5、7、14 d时RGCs平均密度分别下降至(983±48)/mm2、(788±44)/mm2和(216±37)/mm2;生理盐水对照组在各时间点RGCs平均密度与未注射组结果相似;tPNS处理组结果分别为(1363±56)/mm2、(1169±70)/mm2和(477±25)/mm2,与未注射组和生理盐水对照组相比在各时间点上均存在显著性差异(P＜0.05).[结论]玻璃体注射tPNS可提高成年地鼠视神经切断后RGCs的短期存活率.
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体外反搏对高胆固醇血症猪血管内皮功能的影响
[目的]探讨体外反搏治疗对高胆固醇血症猪血管内皮功能的影响.[方法]34头猪分成正常饲养组(NF,n=8),高脂喂养组(HF,n=13)和高脂喂养+反搏组(HF+EECP,n=13).HF+EECP组隔天反搏治疗2h,总共反搏36 h,36 d.分别于体外反搏前(0 d)、反搏中(18 d)、反搏后(36 d),采用高频超声检测猪肱动脉血流介导的内皮依赖血管舒张功能(FMD)方法,比较反搏组与非反搏组治疗前后FMD的变化.同时检测血清超敏C反应蛋白(hsCRP).36 d后,取HF+EECP组的前降支进行病理组织检查.[结果]HF+EECP组反搏后FMD明显升高,分别为5.2%±1.7%(0 d),12%±6%(18 d),和11.4%±2.8%(36 d,P＜0.01);而HF组FMD下降,分别为7.8%±3.7%(0 d),7%±4%(18 d),5.1%±2.0%(36 d),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);与HF组比较,于反搏中、后检测HF+EECP组血hsCRP明显降低[(0.327±0.076)mg/L vs(0.469±0.168)mg/L(18 d);(0.31±0.09)mg/L vs(0.51±0.26)mg/L(36 d),P＜0.01].反搏后,HF组冠脉内皮细胞排列不规则、大量脱落、斑块形成,HF+EECP组内皮细胞呈流线型排列、脱落程度显著减轻.[结论]增强型体外反搏可改善高胆固醇血症猪血管内皮功能.
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免疫抑制剂姜黄素逆转胰岛素抵抗的研究
[目的]为探讨姜黄素(curcumin)对胰岛素抵抗的治疗作用及其机制.[方法]利用胰岛素抵抗的小鼠模型,观察姜黄素对小鼠胰岛素抵抗的水平、转录因子I-κBα、循环细胞因子的变化.[结果]①姜黄素能抑制TNFα刺激Fao细胞NF-κB激活;②姜黄素治疗后小鼠的空腹血糖水平没有明显下降,但空腹胰岛素的水平下降约30%,葡萄糖耐量曲线的水平也明显下降;③循环中TNFα[(34.5±3.4)pg/mL vs(31.3±1.1)pg/mL]水平没有明显改变,而IL-1β[(33.9±3.2)pg/mL vs(15.6±1.1)pg/mL]和IL-6[(72.1±9.8)pg/mL vs(47.2±5.3)pg/mL]水平明显被抑制;④胰岛素刺激的IRS-1酪氨酸的磷酸化水平明显升高,而胰岛素受体的磷酸化水平没有明显改变.与IRS-1酪氨酸的磷酸化水平平行,P85的磷酸化水平也明显升高,AKT的磷酸化的水平也明显升高.[结论]姜黄素能提高小鼠胰岛素敏感性,有治疗改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的作用.
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两种咬合板对大鼠脊柱形态的影响
[目的]比较大鼠佩戴两种咬合板升高咬合垂直距离(OVD)后脊柱形态的变化.[方法]24只成年Wistar大鼠随机分为C组(对照组)、Full-S组(戴上颌全牙列咬合板),Post-S组(戴上颌双侧后牙咬合板).咬合板采用印模和模型技术在体外制作、口内衬垫、调牙合粘接.戴牙后观察大鼠咬合关系及行为、体重变化,并在正位X线片上测量颈椎C4、胸椎T1、T6、T10和腰椎L4中点偏离脊柱中线的距离,侧位片上观察胸椎曲度(θ)角的变化.体重及定点测量数据作统计学分析.[结果]Full-S组大鼠与其他两组比较出现咬合偏斜,生长受抑制;正位片上T10和L4偏离中线值及侧位片上θ角Full-S组显著大于Post-S大鼠组和对照组(P＜0.05),而Post-S组与对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]全牙列咬合板可能导致大鼠脊柱排列形态的改变:双侧后牙咬合板用于大鼠咬合垂直距离升高对脊柱形态无明显影响.
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诱导型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子在舌癌细胞株中的表达
[目的]探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)在舌鳞癌细胞株Tca8113中的表达,为进一步研究iNOS和VEGF在舌鳞癌肿瘤血管生成中的作用提供实验基础.[方法]采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和SP免疫组化方法,对舌鳞癌细胞株Tca8113中iNOS和VEGF mRNA和蛋白表达情况进行检测.[结果]RT-PCR检测到舌鳞癌Tca8113细胞株中iNOS\VEGF mRNA条带明显,SP免疫组化检测到iNOS\VEGF蛋白在舌癌细胞胞浆中呈强阳性表达.[结论]iNOS\VEGF mRNA和蛋白在舌鳞癌Tca8113细胞株中呈高水平表达.
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嘌呤受体P2X7激活谷氨酸受体NMDA引起视网膜神经节细胞凋亡
[目的]研究嘌呤受体P2X7和谷氨酸受体NMDA激活诱导大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的相互作用机制. [方法]①对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物Aminostilbamidine标记RGC,NMDA受体通道拮抗剂MK-801、APV和Memantine分别与P2X7受体激动剂BzATP共培养,检测它们对体外培养RGC存活率的影响;②未经Aminostilbamidine标记的新生大鼠RGC,以10 μmol/L钙离子(Ca2+)荧光染料Fura-2标记后,利用Ca2+影像测定仪分别测定BzATP及三种NMDA拮抗剂对RGC胞内Ca2+浓度的影响.[结果](1)三种NMDA拮抗剂均分别不同程度阻断BzATP引起的RGC凋亡.BzATP在50 μmol/L浓度下,约杀死(36%±2%)的RGC,而MK-801(10 μmol/L)、APV(100 μmol/L)和Memantine(100 μmol/L)则均可明显减轻BzATP对RGC的毒性作用,使RGC存活率分别提高至(96%±4%,P＜0.001)、(80%±5%,P=0.010)和(76%±9%,P=0.144).(2)BzATP可引起RGC胞内Ca2+持续升高,在50 μmol/L浓度下可使胞内Ca2+升高至(1183±109)nmol/L.而MK-801(10 μmol/L)、APV(300 μmol/L)和Memantine(30 μmol/L)则均可显著降低BzATP介导的Ca2+升高幅度,分别为(76%±7%,P=0.003)、(51%±17%,P=0.003)和(55%±16%,P=0.025). [结论]NMDA受体拮抗剂可阻断嘌呤受体P2X7激活诱导的RGC凋亡.P2X7受体和NMDA受体通道激活可能共同介导着兴奋性神经毒作用且P2X7在NMDA受体的上一环节先起作用.
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曲伏前列腺素对培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响
[目的]研究曲伏前列腺素作用下,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人睫状肌细胞的表达.[方法]在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1 μmol/L曲伏前列腺素(travoprost),根据曲伏前列腺素孵育时间的不同,分为4个时间组,即0 h组(对照组)、6 h、12 h、24 h组.Real-time PCR和ELISA法分别检测上述各时间组人睫状肌细胞MMP-2在基因和蛋白水平的表达,每种方法分别重复做3次.Zymography技术分别检测4组细胞MMP-2的活性,重复4次.[结果]设定对照组mRNA相对表达量为1做作标准,6 h、12 h、24 h组MMP-2 mRNA相对表达量为0.58±0.04、1.20±0.05、1.95±0.11,MMP-2 mRNA表达呈逐渐升高趋势(P=0.000);ELISA检测MMP-2的A值分别为0.0503±0.0021、0.0627±0.0017、0.0673±0.0025、0.0783±0.0039,MMP-2的表达随travoprost作用时间延长逐渐升高(P=0.000).Zymography技术检测MMP-2校正光密度值分别为10±5,52±7,104±21,237±40;MMP-2活性随travoprost作用时间延长而逐渐增强(P=0.000). [结论]曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,MMP-2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强.
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异体骨结合骨髓间质干细胞移植治疗骨缺损的动物实验
[目的]研究使用异体骨混合骨髓间质干细胞移植治疗骨缺损的可行性及动物实验初步结果.[方法]将15只新西兰白兔双侧桡骨造成1 cm骨缺损模型,随机选择同一只动物的一侧为实验侧,自体配对的另一侧为对照侧.将表面脱钙的同种异体骨和来源于受体的体外培养增殖的骨髓间质干细胞混合植入实验侧骨缺损,对照侧仅植入同样制作的异体骨.12周后,进行X线检查、生物力学检查和组织学检查,将结果进行对比.[结果]动物在术后12周,实验侧X线片光密度测量结果,破坏载荷时扭矩和扭角测量结果均优于对照侧;组织学评分中,实验侧骨痂量评分优于对照侧,骨连接成熟程度和骨髓发育程度两者没有明显差异.[结论]骨髓间质干细胞可以促进异体骨在移植后的成骨作用,在增多成骨量的同时不影响骨组织发育.
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奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的体外作用
[目的]研究奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用及对Caspase-3活性的影响.[方法]用人宫颈癌HeLa细胞株经奥沙利铂处理后,MTT法测定细胞生长抑制率,透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪和原位末端标记技术法(TUNEL)检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性变化,,并利用AC-DEVD-CHO进行Caspase-3抑制试验.[结果]奥沙利铂(4～64 μmol/L)在体外能以时间和剂量依赖的方式对宫颈癌HeLa细胞产生细胞毒作用并诱导其凋亡,奥沙利铂作用细胞株48 h后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征;并能增加HeLa细胞的Caspase-3活性,AC-DEVD-乙醛(AC-DEVD-CHO)可有效抑制奥沙利铂诱导的HeLa细胞凋亡.[结论]奥沙利铂在体外能抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡,Caspase-3活化参与了奥沙利铂诱导HeLa细胞的凋亡过程.
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系统性红斑狼疮患者高表达的CD154促进自身抗体分泌
[目的]探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)CD154表达水平、及CD40/CD154对SLE患者分泌自身抗体的影响和地塞米松(Dex)对此的作用.[方法]选择SLE活动期患者(10例)和正常对照者(11例),分离PBMC,检测其CD154的表达水平;培养PBMC,应用CD40 mAb和Dex进行干预,使用ELISA法检测培养液上清抗dsDNA水平.[结果]①活动期组PBMC CD154表达水平明显高于对照组6.4%±2.1%vs 1.5%±1.2%,(P＜0.05);②活动期组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显高于对照组[(11.8±6.8)U/mL vs(5.6±2.3)U/mL(RPMI 1640),(11.4±7.0)U/mL vs(6.3±2.1)U/mL(IgG),P均＜0.05];③CD40 mAb使两组培养液上清抗dsDNA抗体水平明显增高[活动期组:(18.6±7.7)U/mL vs(11.8±6.9)U/mL,对照组:(8.3±4.4)U/mL sv(5.6±2.3)U/mL,P均＜0.05].④在活动期组,Dex明显抑制CD40 mAb引起的PBMC培养液上清抗dsDNA抗体水平的增高[(8.8±5.2)U/mL vs(18.6±7.7)U/mL,P＜0.05],使其低于非特异性处理时水平[(8.8±5.2)U/mL vs(11.8±6.8)U/mL,P＜0.05];Dex不影响对照组.[结论]活动期SLE患者PBMC表达的CD154水平升高,此能够促进抗dsDNA抗体的分泌,而Dex能够抑制其作用.
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辛伐他汀含药血清对U937单核巨噬细胞MMP-9及TIMP-1表达与分泌的影响
[目的]探讨辛伐他汀含药血清对U937单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达与分泌的影响.[方法] 15只新西兰大白兔随机分为正常对照组(NL,n=5)、粥样硬化模型组(AS,n=5)和辛伐他汀含药血清组(SIM,n=5).通过喂养高脂饲料,建立兔动脉粥样硬化模型后,予辛伐他汀药液灌胃,获得含药血清.分别予不同浓度含药血清(5%、10%、20%)培养U937单核细胞源巨噬细胞24 h,应用逆转录聚合酶链反应检测MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,以及应用酶联免疫吸附试验检测MMP-9及TIMP-1蛋白的分泌.[结果]与相同浓度AS组比较,5%、10%、20%SIM组U937单核细胞源巨噬细胞MMP-9 mRNA表达均显著性降低(P值为0.005、0.041和0.013);5%、10%、20%SIM组TIMP-1 mRNA表达无显著性差异(P值均＞0.05).而与相同浓度AS组比较,不仅10%、20%SIM组MMP-9分泌显著性减少(P值分别为0.009和0.001),而且10%、20%SIM组TIMP-1分泌均显著性增加(P值分别为0.017和0.001).[结论]辛伐他汀可抑制单核巨噬细胞MMP-9的表达和分泌,以及促进TIMP-1的分泌.
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冬凌草甲素作用PI3K/AKT通路诱导HeLa细胞凋亡
[目的]研究冬凌草甲素诱导HeLa细胞凋亡的作用及其机制.[方法]MTT法测定冬凌草甲素对HeLa细胞的生长抑制实验,Hoechst33342荧光染色等观察细胞核形态学变化;LDH法研究细胞死亡的途径.流式细胞仪检测细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.[结果]25 μmol/L以上的冬凌草甲素对宫颈癌HeLa细胞具有明显的生长抑制作用,并能诱导细胞发生凋亡,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞的生长抑制率及细胞凋亡率均明显升高,冬凌草甲素抑制细胞生长及诱导细胞发生凋亡的过程中,细胞端粒酶Akt、FKHRL、GSK3表达水平及活性显著降低.[结论]冬凌草甲素能够通过诱导人子宫颈癌HeLa细胞发生凋亡而发挥抑制HeLa细胞生长作用,抑制Akt和GSK3的活性是冬凌草甲素体外诱导人子宫颈癌HeLa细胞发生凋亡的重要作用机制之一.
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喉癌切缘中eIF4E、P53、ras和c-myc表达与预后的研究
[目的]探讨eIF4E、p53、ras和c-myc在喉癌切缘中的表达及其与预后的关系.[方法]42例临床分期为Ⅱ、Ⅲ期的喉癌患者被分别行手术治疗,共得喉癌切缘标本112个,采用免疫组化的方法检测肿瘤原发灶和切缘中eIF4E、p53、ras和c-myc的表达.[结果]喉癌原发灶eIF4E、p53、ras和c-myc阳性率分别是100%(42/42),57.1%(24/42),40.5%(17/42)和33.3%(14/42);手术切缘eIF4E、p53、ras、c-myc和两个以上基因阳性率分别是42.8%(18/42)、14.3%(6/42)、9.5%(4/42),9.5%(4/42)和21.4%(9/42),生存分析提示切缘eIF4E、p53或两个以上基因阳性组复发率高,5年生存率低;COX回归分析提示切缘eIF4E表达阳性与预后相关.[结论]喉癌切缘eIF4E阳性的患者复发率高,预后不良.eIF4E在喉癌手术切缘的表达可考虑作为预测喉癌预后的独立风险指标.
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乳腺癌前哨淋巴结活检及其微转移检测的临床意义
[目的]探讨美蓝法示踪和定位行乳腺癌前哨淋巴结活检(SLNB)的可行性及其临床意义,并探索常规病理检查(HE染色)、免疫组化染色(IHC染色)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对判断前哨淋巴结(SLN)微转移灶的价值.[方法]66例乳腺癌患者,用美蓝示踪行SLNB,对SLN及腋窝淋巴结(ALN)进行HE染色:随机选取40例SLN进一步行细胞角蛋白19(CK19)的IHC染色及RT-PCR检测;比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率及假阴性率的差异.[结果]66例中,美蓝示踪成功检出63例,检出率达95.5%.IHC与RT-PCR比较无差异,而与HE比较差异有显著性.[结论]美蓝法SLNB也有很高的检出率,由于常规病理检查对微转移的诊断率低,结合IHC及RT-PCR检测能则有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,提高SLN中微转移的检出率,降低假阴性率.
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糖皮质激素受体在翼状胬肉中的表达及意义
[目的]检测糖皮质激素受体-α、β(GR-α、GR-β)在翼状胬肉组织中的表达,探讨其在翼状胬肉发病机制中的作用.[方法]取39例翼状胬肉组织(其中初发30例,复发9例),应用荧光定量逆转录PCR定量检测GR-α、β mRNA的表达,应用Western blotting技术分析相应的蛋白表达,同时通过免疫组化技术分析蛋白的细胞定位.另外,取9例正常人的球结膜作为对照.[结果]翼状胬肉及正常人的球结膜组织中均表达GR-α mRNA,不表达GR-β mRNA.其中翼状胬肉(39例)中的GR-α mRNA(×103拷贝/μg)为10±4,明显高于正常人球结膜中的2.2±0.3(P＜0.01),经统计检验有显著性差异.但30例初发翼状胬肉与9例复发翼状胬肉组织中的GR-α mRNA表达分别为10±4和10±5,两者无统计学差异(P＞0.05).Western blotting分析显示GR-α蛋白在翼状胬肉表达显著高于正常人的球结膜组织(P＜0.01).免疫组化显示GR-α蛋白定位于上皮细胞核,胬肉组阳性表达率为87.2%,显著高于正常球结膜组(阳性表达率为22.2%,P＜0.05).而GR-β蛋白在两种组织中均不表达.[结论]翼状胬肉组织中GR-α mRNA及其蛋白表达明显增高,但其在翼状胬肉发生、发展中的作用机制尚待于进一步研究.
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不停跳心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响
[目的]评价不停跳体外循环心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响和探讨其临床意义.[方法]停跳心内直视手术患者25例(A组),不停跳心内直视手术患者20例(B组),取心肌组织作TUNEL细胞凋亡检测,比较分析术前和术后心肌细胞凋亡率并参照围手术期肌钙蛋白T(cTnT)检测.[结果]两组患者均无低心输出量综合征的发生.心肌细胞凋亡指数A组(0.003±0.002)和B组(0.004±0.003)术前无明显差别(P＞0.05);术后心肌细胞凋亡指数A组(0.012±0.008,P＜0.001)和B组(0.006±0.004,P＜0.001)均高于术前;A、B两组术后心肌细胞凋亡指数差别有明显差别(P＜ 0.05).围手术期cTnT水平A组在CPB末和术后2 h明显高于B组(P＜0.05).[结论]本实验提示不停跳体外循环心内直视手术引起心肌细胞凋亡和心肌损害小于停跳手术.
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女性腺性膀胱炎膀胱平滑肌层α1D-AR表达的研究
[目的]研究α1D-肾上腺素能受体(α1D-Adrenergic receptor,α1D-AR)在女性腺性膀胱炎(cystitis glandularis,CG)患者膀胱三角区及逼尿肌中平滑肌细胞的表达情况;探讨α1D-AR在引起下尿路症状、膀胱过度活动症中的作用机制.[方法]采用免疫组织化学法检测32例女性腺性膀胱炎患者及9例正常女性膀胱逼尿肌及三角区肌层中α1D-AR的表达情况,并结合尿动力学进行分析.[结果]32例腺性膀胱炎患者膀胱逼尿肌及三角区肌层的α1D-AR表达阳性细胞数比正常对照组显著增加,两者具有正相关关系(P＜0.0001);32例腺性膀胱炎患者中,尿动力学表现为不稳定膀胱的9例患者的逼尿肌及三角区肌层α1D-AR表达阳性细胞数均比非不稳定膀胱患者的表达显著增加(P＜0.0001).20例膀胱出口梗阻患者的逼尿肌及三角区肌层α1D-AR表达与非膀胱出口梗阻患者无明显差异(P＞0.05).[结论]女性腺性膀胱炎患者膀胱逼尿肌层、三角区肌层的α1D-AR表达存在正相关关系,提示CG可同时引起此两部位α1D-AR表达增加.α1D-AR表达增加可能是引起女性腺性膀胱炎逼尿肌压升高、不稳定膀胱等引起的下尿路症状的原因之一.
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低场强四肢关节磁共振在膝关节骨挫伤中的应用
[目的]探讨低场强四肢关节磁共振在膝关节骨挫伤中的应用价值.[方法]回顾性分析30例经临床证实的膝关节骨挫伤MR影像和临床资料.[结果]30例外伤膝关节共检出43处骨挫伤,28处关节其他结构损伤.根据骨挫伤MR表现可分为3型:Ⅰ型(13例);表现为干骺端和骨干区内的弥漫性信号改变,Ⅱ型(8例);表现为软骨下骨皮质的连续性中断.Ⅲ型(9例);表现为软骨下骨内见局限性的信号改变区.[结论]膝关节是骨挫伤的好发部位;X线平片、CT对骨挫伤的诊断价值有限,低场强四肢关节MR对骨挫伤检出率较高,并可观察关节其他结构的损伤,为临床治疗及预后的评估提供依据.
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人GM-CSF基因真核表达载体构建与表达
[目的]构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定.[方法]采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B(MCSB)中,构建pIGM-CSF真核表达载体.然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达.[结果]所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM-CSF表达.[结论]成功构建含基因佐剂真核表达载体pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞中能有效表达,为继续克隆目的抗原从而构建双顺反子真核表达质粒奠定了基础.
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大鼠牙囊细胞培养方法的探讨
[目的]探讨大鼠牙囊细胞体外培养的方法.[方法]分离出大鼠牙囊组织,分别采用组织块培养法、细胞消化分散法、及改良组织块法进行牙囊细胞原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学观察,透射电镜观察细胞超微结构.[结果]培养至第3天,倒置相差显微镜观察发现,采用组织块培养法,见少数细胞从组织块爬出;而细胞消化分散法则可获得数量多的牙囊细胞,但与杂质细胞混杂生长;改良组织块法见量多、相对纯的牙囊细胞.电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网.组织块法、细胞消化分散法和改良组织块法牙囊细胞培养成功率分别为80%、60%和100%;分别于10 d、7 d和6 d左右进行第一次传代.[结论]改良组织块法是一种良好的大鼠牙囊细胞培养方法.
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高龄孕妇的妊娠结局
[目的]了解高龄孕妇的妊娠结局,为提高该高危人群的围产期预后提供指导.[方法]回顾性分析2006年2月11日至2006年10月7日在我院分娩的156例年龄介于35～48岁高龄孕妇的妊娠结局,并随机选择同期分娩的年龄介于21～34岁的孕妇156例作为对照.[结果]高龄组剖宫产率及辅助生育受孕率均显著高于对照组,妊娠期糖尿病及糖耐量异常、胎儿窘迫、早产的发生率高于对照组,而HSV及CMV感染显著低于对照组,两组新生儿畸形率及围产儿死亡率差异无显著性.[结论]高龄与早产、胎儿窘迫、妊娠期糖尿病、剖宫产率升高等不良妊娠结局密切相关.在妊娠期应加强对高龄孕妇糖尿病和早产等高危因素的筛查,分娩过程中密切监护,及早发现胎儿窘迫的征兆,改善妊娠结局.
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异基因造血干细胞移植患者发生口腔黏膜炎的危险因素分析
[目的]探讨进行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者口腔黏膜炎(OM)的发生及其危险因素.[方法]回顾分析1996年5月至2007年3月在我院治疗的75例恶性血液病患者allo-HSCT的临床资料,分析相关因素与口腔黏膜炎发生的关系.[结果]49例(65.0%)患者发生口腔黏膜炎,其中13例(26.5%)发生Ⅲ度,14例(28.6%)发生Ⅳ度,中位发生时间移植后第5(3～8)天.单因素分析显示,患者年龄、疾病种类、移植方式与口腔黏膜炎的发生无相关性(P＞0.05),TBI/CY(全身照射+环磷酰胺)预处理的患者口腔黏膜炎发生率高于BU/CY(白消安+环磷酰胺)方案(78.3%vs 59.6%,P＜0.05),口服剂型白消安口腔黏膜炎发生率高于静脉剂型(91.2% vs 11.1%,P＜0.001),无四氢叶酸钙(CF)解救甲氨蝶呤(MTX)口腔黏膜炎明显高于CF解救(87.0%vs 9.5%,P＜0.001).多因素回归分析结果表明,只有含TBI预处理方案(OR=3.6,P＜0.05)、口服剂型白消安(OR=2.9,P＜0.01)、无CF解救MTX(OR=17.1,P＜0.001)是all-HSCT患者口腔黏膜炎发生的独立影响因素.[结论]使用静脉剂型BU联合CY预处理方案、CF解救MTX的患者allo-HSCT后口腔黏膜炎发生率明显减少.
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吉西他滨联合化疗一线治疗晚期胰腺癌生存结果的亚组meta分析
[目的]Meta分析提示吉西他滨(GEM)联合化疗一线治疗晚期胰腺癌优于标准的GEM单药化疗,在此基础上进行亚组生存结果的meta分析及资料更新,旨在寻找确切有效的化疗方案.[方法]通过MEDLINE、EMBASE、ASCO、ECCO等数据库及论文集检索相关文献.按纳入标准筛选新增文献并进行资料更新.主要对各亚组进行半年生存率、其次是1年生存率的meta分析.[结果]17个随机对照临床试验(RCT)共3 821例患者纳入分析,按化疗方案分为GEM联合顺铂(GEMDDP)、GEM固定剂量率输注联合奥沙利铂(GEMOX)、联合5FU(GEMFU)、联合卡培他滨(GEMCAP)以及联合伊立替康(GEMIRI)等5个亚组,各亚组半年生存率的治疗优势(RD)分别为5%(P=0.24)、9%(P=0.005)、2%(P=0.46)、7%(P=0.03)和-1%(P=0.88);1年生存率RD为6%(P=0.11)、5%(P=0.07)、4%(P=0.19)、5%(P=0.08)和0(P=0.97).[结论]现有的证据提示GEMOX、GEMCAP联合化疗方案一线治疗晚期胰腺癌,有较好的应用前景,值得进一步的临床试验.
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通心络胶囊治疗冠心病随机对照试验的系统评价
[目的]评价通心络胶囊与消心痛等西药治疗冠心病的疗效差异及安全性.[方法]两名作者独立收集资料和评价纳入文献质量,运用meta分析对资料进行定量综合,评价不良反应.[结果](1)对17项研究的临床疗效有效率合并效应量的检验:OR合并=2.38,其95%CI为[1.83,3.09](P＜0.01);(2)对12项研究的心电图疗效有效率合并效应量的检验:OR合并=2.08,95%CI为[1.54,2.82](P＜0.01);(3)有4篇论文报道未发现通心络明显毒副作用,11篇报道胃肠不适、头痛等不良反应例数:通心络组17例,发生率为2.64%;对照组63例,发生率为10.92%;(4)在治疗前后对通心络组患者血、尿、粪常规、肝肾功能、心肌酶和电解质的检验,均未发现异常变化.[结论]现有证据提示通心络胶囊临床疗效和心电图疗效优于消心痛,且不良反应少.受纳入文献的质量限制,其疗效有待高质量的随机对照试验来评价.
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医患间交谈对儿童治疗合作程度的影响的研究
[目的]比较儿童患者在有医患交谈与无医患交谈的情况下进行口腔治疗的合作情况.[方法]将120名儿童分为甲组(10～12岁),乙组(7～9岁),每组再随机分为A、B、C 3小组,A组医生不与患者直接交谈,B组医生与患者简单交谈,C组医生与患者耐心交谈并简单示范.以Venham's Clinical Rating of Anxiety and Cooperative Behavior为判定标准,对儿童进行口腔治疗的心理及合作情况各评出一个等级分数.[结果]直接谈话组与不直接谈话组间患者的合作程度有明显区别(P＜0.01),不同年龄组间患者的合作程度也有明显区别(P＜0.05).[结论]儿童在进行口腔治疗时有医生与其交谈,对降低其牙科恐惧及增加其合作程度有明显帮助.
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非接触标测指导导管消融左室特发性室性心动过速
[目的]探讨非接触标测是否可以揭示左室特发性室性心动过速(ILVT)的舒张期电位(DP)和浦氏电位(PP)的部位,指导有效导管消融.[方法]Ensite 3000非接触标测多极球囊导管标测ILVT的激动起源(EA)、传导径路(CP)和出口(EX),用消融导管分别于这些部位行接触标测.[结果]6例ILVT周长为(286±38)ms,非接触标测显示4例激动起源(EA)位于中间隔,2例位于下间隔,EA较体表QRS波提前约(48.6±32.8)ms,传导径路长约(2.6±0.9)ms.6例病人在窦性心律下消融导管起搏标测12导联QRS形态与ILVT相匹配(≥11/12)处位于EX,而非EA(≤10/12)见正文.6例病人在室性心动过速期间消融导管于EA和CP处标测到PP,2例于EA标测到DP,1例于EX标测到PP.6例病人在窦性心律下于ILVT起源部位行片状或/和传导径路作线性消融均获成功,随访(12±6)月,未见复发.[结论]非接触标测通过显示ILVT起源及传导径路,可揭示DP和PP部位,从而有效地指导ILVT导管消融.
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SD大鼠二甘醇中毒的肾功能变化规律特点分析
[目的]探讨二甘醇(DEG)中毒时肾功能的变化规律和腹腔途径中毒的特点.[方法]选用健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠,腹腔注射8 mL/kg的DEG,于注射前和注射后第2天、5天、7天以及14天尾静脉采血检测血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和CO2结合率(CO2CP),收集死亡大鼠及第7天和14天处死大鼠的肾组织进行病理检查.[结果]DEG注射后,个别大鼠在8 h内出现死亡,死亡高峰在第5天(死亡率30%),而第7天后无继续死亡发生.死亡率及血生化指标的异常率分析显示,肾损害的高峰也在第5天,近100%大鼠出现肾损害.血Cr、BUN和CO2CP在注射后第2天出现明显改变,以后逐渐恢复.血清Cr和BUN相比,前者更敏感地反映DEG肾损害.肾脏病理显示死亡大鼠有急性肾小管坏死的表现.[结论]腹腔注射DEG途径可引起大鼠的明显的肾损害甚至死亡.早期出现的严重酸中毒和继而出现的血清Cr显著升高是早期发现DEG中毒的重要线索.Cr和CO2CP随时间的变化规律及病理特点对诊治也有一定的指导意义.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
