中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
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细胞因子HGF体外增强骨肉瘤细胞株的增殖和黏附性
[目的]研究肝细胞生长因子/离散因子(HGF/SF)及其受体蛋白c-Met在骨肉瘤细胞株MG-63和HOS中的表达及对瘤细胞生物学行为的影响,探讨HGF/c-Met系统在骨肉瘤细胞生长侵袭过程中的作用.[方法]用流式细胞术检测HGF-α、HGF-β、c-Met在2株骨肉瘤细胞株中的表达;外源性HGF刺激此2株细胞株后,用MTT法、黏附性检测方法研究细胞增殖速率和黏附性的变化.[结果]HGF-α、HGF-β、c-Met在2株骨肉瘤细胞株中的阳性表达率均低于3%.HGF浓度达50 ng/mL以上时,MG-63和HOS的增殖速率显著增高,P＜0.01.当外源性HGF的浓度分别达5 ng/mL和10 ng/mL时,MG-63和HOS的黏附性指标即显著升高,P＜0.01.外源性HGF刺激后HGF-α、HGF-β、c-Met在2株骨肉瘤细胞株中的表达略有变化,但差异无统计学意义,P＞0.05.[结论]HGF可以促进骨肉瘤细胞株MG-63和HOS的体外增殖和黏附能力.
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血管紧张素-(1-7)预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤
[目的]探讨较大剂量血管紧张素-(1-7)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其信号机制.[方法]48只SD大鼠随机分为4组,每组12只:缺血再灌注对照组、血管紧张素-(1-7)预处理组、血管紧张素-(1-7)预处理加磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂Wortmannin处理组、Wortmannin处理对照组,观察较大剂量血管紧张素-(1-7)预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏左心室收缩压、冠状动脉流量、肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶释放、心肌梗死范围以及心肌蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化的影响.[结果]与缺血再灌注对照组相比,血管紧张素-(1-7)预处理组心脏左心室收缩压、冠状动脉流量显著提高,冠状动脉循环流出液中肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶含量降低,心肌梗死范围减小,心肌磷酸化Akt(Ser473)、磷酸化GSK-3β(Ser9)水平增高,PI3K抑制剂Wortmannin能够抑制血管紧张素-(1-7)预处理所致的Akt、GSK-3β磷酸化,但只能部分消除血管紧张素-(1-7)预处理的心脏保护效应.[结论]较大剂量血管紧张素-(1-7)预处理能够减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,PI3K/Akt/GSK-3β信号通路参与介导血管紧张素-(1-7)预处理的心脏保护作用.
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采用骨内型牵张器建立垂直向牙槽骨牵张成骨动物模型
[目的]应用自行研制的骨内型牙槽骨牵张器,建立犬垂直向牙槽骨牵张成骨动物模型.[方法]实验动物为中山大学动物中心提供的健康成年杂种犬12只.实验材料为自行设计,纯钛制成的骨内型垂直向牙槽骨牵张器,体部直径3.75 mm,长5 mm.先拔除犬双侧下颌前磨牙,形成萎缩牙槽嵴的模型.3月后随机选取一侧行骨切开术,植入两枚牵张器.1周后开始牵张,每天1次,每次1 mm,共5 d;分别在牵张后1、2和3月将动物处死进行临床检查,X线检查和组织学检查.[结果]骨内型垂直牙槽骨牵张器愈合良好.牙槽骨高度平均增加(4.8±0.50)mm.组织学切片显示在牵张区有骨质形成,其骨小梁方向与牵引方向一致.[结论]采用该骨内型牙槽骨牵张器成功建立稳定的、重复性好的犬牙槽骨牵张成骨动物模型,为牙槽骨牵张器的国产化和临床上应用该项技术打下基础.
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垂直喉部分切除术后喉狭窄瘢痕组织中炎症细胞表达及意义
[目的]通过喉狭窄瘢痕组织的病理学研究,了解炎症细胞在狭窄瘢痕组织表达及意义.[方法]垂直喉部分切除术后2～3月出现喉狭窄10例和未狭窄16例喉瘢痕肉芽组织为实验组及10例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精-伊红及免疫组化染色,观察组织切片中中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞表达,并在全自动图像分析系统下进行细胞计数.[结果]喉狭窄瘢痕组织与非狭窄喉瘢痕组织、正常声带比较,固有层炎症细胞大量聚集,主要以巨噬细胞和T淋巴细胞为主.比较非狭窄喉瘢痕组织及正常声带组织,喉狭窄瘢痕组织的中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞数量均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]喉狭窄瘢痕肉芽组织中存在明显炎症反应,持续炎症反应可能是导致喉狭窄瘢痕肉芽增生重要因素之一.
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冷缺血损伤后大鼠移植肝内细胞因子的变化
[目的]研究不同冷缺血损伤条件下,肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)等细胞因子在大鼠移植肝内的变化规律与肝脏再生的关系.[方法]建立大鼠原位肝移植模型.实验分为:冷缺血1 h组、冷缺血16 h组、假手术对照组.观察各组的生存率,并在术后0、1、2、4、16、24、48、72 h收集标本,检测TNF-α、IL-6等细胞因子的表达.免疫组化检测肝细胞摄取溴脱氧尿核苷情况.对冷缺血1 h组和冷缺血16 h组在移植后48 h溴脱氧尿核苷染色阳性的肝细胞计数进行分析.[结果]冷缺血损伤1 h、16 h肝移植组和假手术组存活率均为100%(＞14 d).与冷缺血1 h相比,冷缺血16 h组大鼠移植肝内TNF-α、IL-6等细胞因子表达明显增加,持续的时间也延长到移植后24 h以上.移植术后48 h溴脱氧尿核苷染色阳性的肝细胞计数也明显增多(P＜0.05).[结论]重度冷缺血损伤启动大鼠肝移植后的肝脏再生,修复组织损伤.与大鼠肝切除后诱导肝再生的机制相似,TNF-α、IL-6等细胞因子在移植后肝脏再生的早期启动过程中也非常重要.
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糖尿病大鼠生存信号改变对缺血再灌注损伤及心肌细胞凋亡的影响
[目的]测定不同周期STZ诱导糖尿病生存信号改变对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤及心肌细胞凋亡的影响.[方法]阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I/R模型,用TTC染色,测定大鼠心肌I/R后梗死面积,用免疫印迹法定量分析代表心肌凋亡水平的caspase-3及代表细胞生存信号的磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)的表达,用槽式电泳法测定硝基酪氨酸.[结果]在STZ处理后2周,糖尿病组(2WD)心肌梗死面积比相应周期对照组(2WC)明显缩小,STZ处理后16周(16WD),梗死面积比相应对照组(16WC)增加;P-Akt,在心肌的表达在2WD比2WC组增加35%,在16WD比16WC明显减少;超氧亚硝酸根离子(ONOO-)生成的标志性产物硝基酪氨酸(NT)在2WD组中较2WC组低约49%,但在16WD组中较16WC组显著增加;在缺血再灌注后,Caspase-3,在2WD组较2WC组中减少,而16WD组caspase-3较16WC组增加.[结论]STZ诱导糖尿病早期、晚期对心肌I/R损伤和细胞凋亡呈现相反的作用,这可能是由于早、晚期糖尿病相反的细胞生存信号改变而引起的.
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重组人催乳素对大鼠子宫内膜异位模型作用的初步研究
[目的]初步了解重组人催乳素(rhPRL)对子宫内膜异位症(EM)的治疗作用.[方法]先建立大鼠EM模型50只,将建模成功大鼠随机分为6组:实验1组10例,实验2组10例,实验3组10例,Danazol对照组10例,生理盐水对照组6例,空白对照组4例.然后用不同浓度的rhPRL(每日分别为200μg/kg、100μg/kg、50μg/kg)给实验大鼠腹腔内注射,Danazol对照组每日灌喂Danazol(80 mg/kg);生理盐水对照组以与实验组等量的生理盐水腹腔内注射;空白对照组不加干预.观察指标:肉眼观察EM模型的消长及粘连情况,用流式细胞术测定CD3、CD4、CD8T淋巴细胞,用ELISA法测量血清中IL-2、IL-4的含量,大鼠阴道涂片,观察动情周期的变化.[结果]建模后60%的大鼠动情周期发生了改变.用rhPRL治疗后大鼠动情周期全部呈抑制状态,显示出rhPRL对性腺功能抑制.用rhPRL治疗后,异位病灶缩小,粘连受到明显的抑制,与Danazol相比无明显差异(P＞0.05),与生理盐水及空白组有显著差异(P＜0.05).用rhPRL治疗后CD4/CD8比值升高,与生理盐水及空白对照组相比有显著差异(P＜0.05).用rhPRL治疗后,大鼠体内白细胞介素IL-4水平下降,而IL-2却明显升高,与生理盐水及空白对照组相比均有显著差异(P＜0.05).[结论]重组人催乳素对大鼠EM模型的生长及粘连有抑制作用,可能是通过对性腺功能的抑制及免疫功能的调节而发挥其作用.
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胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定
[目的]探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法,建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型,为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段.[方法]采用低浓度胰酶消化20 d胎鼠肺组织,经差速离心和特异性免疫吸附后,分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞,进行原代培养;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白A的分泌,用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定.[结果]原代培养的肺Ⅱ型细胞12 h开始贴壁,外观呈多边形,岛状生长.培养的24～48 h,细胞连接成单层,胞浆内颗粒明显,培养的6～7 d细胞内颗粒大量减少;免疫细胞化学鉴定细胞肺表面活性特异蛋白A(surfactant protein A,SP-A)染色阳性,透射电镜可见观察到细胞内板层小体,培养液中SP-A含量随培养时间延长逐渐增多,于培养36 h达峰值,为80 ng/mL;细胞纯度达(92±2)%,产量为(18.6±7)×106.[结论]差速离心和免疫黏附法是一种高效的分离和纯化胎肺Ⅱ型细胞的方法,所得细胞产量大、纯度高,可以用于体外研究肺泡Ⅱ型细胞和晚期胎肺发育的研究.
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ERK1/2和P38信号通路在瘦素诱导巨噬细胞TNF-α表达中的作用
[目的]研究瘦素(leptin)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(PM)分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在这一过程中的作用.[方法]体外培养小鼠PMs,按瘦素不同浓度和/或MAPK特异性抑制剂PD98059、U0126、SB203580、SP600125进行分组.分别收集培养细胞和上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清中TNF-α水平,用蛋白印迹(Western blot)方法测定细胞内p-ERK1/2、p-p38,以及p-JNK的表达水平,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定TNF-α mRNA的表达.[结果]瘦素能够剂量依赖性的诱导小鼠PM产生TNF-α,在瘦素质量浓度为75 ng/mL时TNF-α表达至峰值,是对照组的6.6倍.瘦素可以活化ERK1/2和p38 MAPK信号转导通路,瘦素处理组的p-ERK1、p-ERK2、p-p38表达水平分别是对照组的2.3、2.4和2.6倍.ERK1/2的特异性抑制剂PD98059、U0126和p38的特异抑制剂SB203580能够分别抑制瘦素引起的ERK1/2、p38蛋白磷酸化以及TNF-α mRNA增加,两者的联合作用可以强烈抑制TNF-α mRNA的表达,而JNK信号转导途径与瘦素诱导PM表达TNF-α无关.[结论]瘦素在小鼠PM中通过同时活化ERK1/2、p38 MAPK信号转导通路而诱导细胞产生TNF-α.
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缺血预处理对心肌细胞超微结构及CX43蛋白表达的保护作用
[目的]观察缺血预处理对缺血/再灌注心肌细胞超微结构及细胞连接蛋白43(Connexin43,CX43)表达的保护作用.[方法]连续观察54例心瓣膜病接受瓣膜置换的病人,随机分为缺血预处理组和对照组(非缺血预处理).体外循环前后取右心耳组织标本处理,电子显微镜下观察心肌细胞超微结构的变化,免疫组化方法测定心肌细胞纤维CX43蛋白表达水平,并作图像定量分析.对比手术前后超声心动图的心功能指标.[结果]缺血/再灌注后,缺血预处理组心肌细胞线粒体和闰盘结构基本完整,对照组心肌细胞超微结构破坏严重.手术前两组间心肌细胞CX43表达无明显差异.缺血预处理组术前后CX43表达无明显变化(P＞0.05),而对照组术后明显降低(P＜0.05).术后两组心肌细胞CX43表达有显著性差异(P＜0.05).超声心动图测定左心室射血分数和短轴缩短率,缺血预处理组术前后比较无显著性变化,对照组术后左心室射血分数和短轴缩短率均降低,而短轴缩短率明显低于缺血预处理组(P＜0.05).[结论]缺血预处理能维持缺血/再灌注后心肌细胞CX43蛋白表达的稳定,保护心肌细胞超微结构的完整性,有利于术后心功能恢复.
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壳聚糖与Ⅰ型胶原制备组织工程复合支架材料的扫描电镜研究
[目的]通过扫描电镜观察壳聚糖和Ⅰ型胶原在不同温度下以不同比例制备成冻干状组织工程复合支架材料的微观结构,以获得佳浓度、比例、温度匹配组合,制备理想的组织工程复合支架材料.[方法]在-5℃、-20℃和-80℃将不同浓度的壳聚糖、Ⅰ型胶原以及它们不同比例的混合液冷冻12 h后冻干24 h,扫描电镜观察不同材料表面和内部的微观结构,并计算其平均孔径和孔隙率.[结果]壳聚糖、Ⅰ型胶原以及它们的混合液冻干后都形成白色海绵状固体,冷冻温度越低冻干后材料的孔径越小,孔隙率越低;材料的浓度越高冻干后孔径越小,孔隙率越低;壳聚糖-Ⅰ型胶原混合液中壳聚糖含量越高,材料冻干后孔径越小,孔隙率越低.[结论]壳聚糖-Ⅰ型胶原复合支架的孔径和溶液浓度、二者配比以及冻干前的冷冻温度密切相关.
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椎体成形术中注射聚甲基丙烯酸酯和锶羟磷灰石的比较
[目的]比较采用两种填充物聚甲基丙烯酸酯(polymethylmethacrylate,PMMA)和锶羟磷灰石(strontium-contained hydroxyapatite cement,SrHAC)行经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplaasty,PVP)的临床应用结果.[方法]选择单椎体骨折患者49例,其中男19例,女30例,随机分成2组,PMMA组26例,SrHAC组23例,对填充物注入量、术中患者血压、心率、血氧饱和度及术后填充物渗漏、疼痛改善、临床效果、影像学征象等指标进行评价分析.[结果]PMMA组平均注入量为(2.82±0.39)mL,SrHAC组平均注入量为(3.75±0.52)mL,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).SrHAC组注入填充物时血压、心率、血氧饱和度稳定.PMMA组视觉模拟量表(visual analogue pain scale,VAS)评分由术前平均的(7.0±0.8)分下降至末次随访时的(1.7±0.4)分;SrHAC组术前平均为(7.2±1.0)分,末次随访降为(1.8±0.5)分.两组组内比较手术前后差异均有统计学意义(P＜0.01).术后临床效果SC法评价,优良率:PMMA组为84.6%、SrHAC组为82.6%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).末次随访时椎体均无继续塌陷征象.随访达1年以上的SrHAC组见填充物开始降解.[结论]应用两种填充剂行PVP均为治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的有效办法.
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不同区域晶状体上皮细胞基因表达差异分析
[目的]比较不同区域猪晶状体上皮细胞的基因表达在转录组水平上的差异.[方法]解剖显微镜下分离晶状体前囊膜,将附着于其上的上皮细胞分为中央(直径为10.56 mm)和周边两部分.分别提取两个样本的总RNAs并经PCR扩增,以Cy3和Cy5分别标记扩增的中央与周边部分的cDNA,与含7548个基因的表达谱芯片杂交,经图像分析,生物信息学处理获得基因表达在转录水平差异的相关信息.[结果]中央与周边区域的猪晶状体上皮细胞在转录组水平共鉴定出952个有效表达的基因点,其中差异表达基因261个,以中央区域为参照,周边上皮细胞mRNA上调137个,下调124个.差异表达基因主要涉及的功能有:细胞周期与凋亡、细胞骨架蛋白及细胞外基质、转录、细胞信号分子等.[结论]中央与周边区域猪晶状体上皮细胞基因表达在转录组水平上差异明显.这类差异呈明显的功能聚类.
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含PEG的聚氨基酸的制备及其细菌黏附性评价
[目的]采用嵌段共聚法将聚乙二醇(PEG)引入聚谷氨酸苄酯(PBLG)得到聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯两亲嵌段共聚物(PBLG-PEG-PBLG,缩写为GEG),研究引入PEG对GEG膜表面细菌黏附性的影响.[方法]以端氨基聚乙二醇引发谷氨酸苄酯N-羧酸酐开环聚合得到GEG,用凝胶渗透色谱、红外光谱、核磁共振谱和表面接触角对共聚物的结构和物理化学性质进行表征;将聚合物膜悬浮在金黄色葡萄球菌的菌悬液孵育24 h,用扫描电镜观察细菌在聚合物表面黏附的情况.[结果]端氨基聚乙二醇能引发谷氨酸苄酯N-羧酸酐开环聚合形成嵌段共聚物:引入PEG不同程度地降低了材料表面的接触角,减少了细菌在共聚物表面的黏附;PEG嵌段在共聚物中的含量越高,材料表面接触角越小,黏附的细菌越少.[结论]将PEG引入PBLG能在某种程度上抑制细菌黏附.这种嵌段共聚物在组织工程和药学领域有潜在应用前景.
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β-溶血性链球菌、结核分枝杆菌与银屑病相关性
[目的]探讨各型银屑病患者血清中抗β-溶血性链球菌、结核分枝杆菌及其提取物的IgG,IgM和IgA抗体水平和可能的意义.[方法]用ELISA法测定点滴状(36例)、斑块状(36例)、红皮病型(30例)、关节型(15例)、脓疱型(30例)共银屑病患者147例及正常对照(36例)血清中抗β-溶血性链球菌、结核分枝杆菌整菌、培养液和胞浆提取物的IgG、IgM和IgA抗体.[结果]各型银屑病患者血清中可检出不同水平的抗两种微生物三类成份的抗体,整菌抗原免疫反应强,点滴状银屑病抗体水平高;点滴状和斑块状银屑病患者血清中抗两种微生物IgG、IgM抗体水平高于正常对照组,并且抗β-溶血性链球菌抗体与抗结核分枝杆菌抗体有相关性.[结论]银屑病患者血清中存在抗β-溶血性链球菌、结核分枝杆菌及其提取物抗体,两种微生物对银屑病的免疫反应有相似之处,提示β-溶血性链球菌、结核分枝杆菌与银屑病可能存在相关性.
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尼氟灭酸对糖尿病人血小板胞浆游离钙及聚集功能的影响
[目的]探讨糖尿病人血小板胞浆游离钙([Ca2+]i)、血小板聚集率变化及氯通道阻断剂尼氟灭酸对其的影响.[方法]用Fura-2荧光测钙技术检测血小板[Ca2+]i,血小板聚集仪检测血小板聚集率,观察氯通道阻断剂尼氟灭酸、钙通道阻断剂硝苯地平及两者联合对糖尿病人的血小板[Ca2+]i、血小板聚集率的作用.[结果]①糖尿病人血小板聚集率为(74.9±13.7)%,高于正常人(P＜0.05);糖尿病人的静息血小板[Ca2+]i值、钙释放、钙内流分别为(124.5±38.1)nmol/L、(497.1±95.1)nmol/L、(354.3±75.0)nmol/L,均高于正常人(P均＜0.05);②尼氟灭酸及硝苯地平抑制血小板钙内流呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)的尼氟灭酸(50 μmol/L)对糖尿病人血小板钙内流的抑制率为(54.7±14.5)%,对血小板聚集率的抑制率为(32.3±21.4)%;IC50的硝苯地平(7.5 μmol/L)对糖尿病人血小板钙内流的抑制率为(17.9±11.9)%,对血小板聚集率的抑制率为(32.3±20.4)%;③尼氟灭酸联合硝苯地平对糖尿病人血小板钙有抑制作用,联合作用时尼氟灭酸对钙内流抑制率为(51.9±12.8)%;硝苯地平对钙内流抑制率为(12.4±8.5)%(P均＜0.05),两者间不存在交互效应.[结论]糖尿病人血小板聚集率、静息血小板[Ca2+]i及钙运动均高于正常人,血小板呈高反应状态.尼氟灭酸可抑制糖尿病人血小板聚集和钙内流,可能与血小板膜存在对尼氟灭酸敏感的氯通道有关.尼氟灭酸与硝苯地平联合对糖尿病患者的血小板钙运动无协同及遏制作用.
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成人视网膜前体细胞的体外分离培养和鉴定
[目的]对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定.[方法]成人眼球12只,"机械分离联合酶消化法"分离出睫状上皮层的色素性细胞,10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)+10 ng/mL表皮生长因子(EGF)的无血清DMEM/F12培养液中培养,并从三方面鉴定其神经干细胞特性:A.免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白Nestin的表达;B.自我更新能力:原代神经球消化传代后,继续培养观察新神经球的形成;C.多向分化潜能:原代细胞培养4～5 d,改用含10 mL/L胎牛血清的DMEM/F12培养液,继续培养7～10 d,分别用抗神经丝蛋白(NF)抗体、抗微管相关蛋白-2(MAP2)抗体、抗胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体、抗视紫质蛋白抗体、抗β-微管蛋白抗体以及抗无长突细胞特异性抗体作免疫荧光细胞染色.[结果]0.48%±0.08%(1:208)原代细胞在含bFGF+EGF无血清培养条件下能保持增殖未分化状态,形成神经球样结构,消化传代后90.1%±8.3%的第二代细胞能重新形成新的神经球样结构,具有自我更新能力;原代及传代后的神经球均表达神经干细胞特异性抗原nestin;在含10 mL/L胎牛血清的促分化培养液中,细胞分别分化为可表达神经细胞、星形神经胶质细胞和感光细胞等特异性抗原的细胞,表明具有多向分化潜能.[结论]在成人眼睫状体扁平部分离得到具有干细胞特性的视网膜前体细胞,并在体外成功进行培养鉴定.
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左旋炔诺孕酮对人子宫内膜细胞体外增殖及细胞间通讯的影响
[目的]探讨左旋炔诺孕酮对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞增殖、间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)及连接蛋白(connexin,Cx)43、32表达的影响.[方法]采用MTT法观察LNG对人子宫内膜细胞的增殖调节作用,采用划痕染料标记示踪技术,观察左旋炔诺酮(levonorgestrel,LNG)对原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞GJIC的影响,采用激光共聚焦显微镜扫描技术,观察LNG对Cx 43、Cx 32表达的影响.[结果]LNG浓度为5×10-5 mol/L时,对子宫内膜间质和上皮细胞均有抑制生长作用(P＜0.05),体外培养的人子宫内膜间质细胞的GJIC功能较腺上皮细胞强(P＜0.05),LNG可显著提高人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞间荧光黄染料的扩散(P＜0.05);同种Cx腺上皮细胞表达较间质细胞强(P＜0.05),LNG对两种细胞Cx的表达没有影响(P＞0.05).[结论]LNG可抑制人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞体外增殖,显著促进细胞GJIC功能,提示其在逆转子宫内膜增殖性病变的阶段扮演重要角色;LNG未影响子宫内膜细胞Cx43、Cx32的表达,提示Cx表达量不能完全反映GJIC功能.
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重构腺相关病毒转导PDX-1对C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用
[目的]重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变.[方法]应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAV Helper-Free System)表达系统中,转染HEK293细胞,培养72 h,提取病毒悬液,转导PDX-1进入C2C12细胞中,检测细胞培养液中的胰岛素含量.[结果]①用X-gal染色系统检测,可见有蓝色的阳性细胞.②病毒的粗略的浓度经计算后大约为1012/mL,转导的病毒数约为1011.③PCR结果:用重构的腺相关病毒转导后C2C12有胰岛素及PDX-1的mRNA的表达.④用重构的腺相关病毒转导PDX-1进入C2C12后的培养液的胰岛素浓度为(5.5±1.1)μIU/mL,较其他方法也有较明显的增加(P＜0.05).[结论]通过应用含有PDX-1基因的重构腺相关病毒载体可以转导PDX-1在C2C12细胞中表达,且可以提高C2C12分化为胰岛素分泌细胞的分泌量.
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鸡胚内神经营养活性物质的提取及其生物活性
[目的]从鸡胚内提取具有神经营养生物活性的组分.[方法]分别取胚龄为E10、E16、E19的鸡胚,匀浆离心后,上清超滤,获得5个组分,即相对分子质量Mr＜3×103、Mr=3×103～＜10×103、Mr=10×103～＜30×103、Mr=30×103～≤50×103与Mr＞50×103.采用新生大鼠海马神经元与鸡胚背根节体外培养方法,观察各组分的促神经元存活及突起生长的作用.用MTT法测定神经元的活性.[结果]胚龄E16与E19的鸡胚内相对分子质量Mr＞50×103的组分有明显的促进海马神经元细胞存活、分化和突起生长及鸡胚背根节突起生长的作用.[结论]鸡胚内含有较强的促进神经元存活、分化与突起生长的神经营养活性物质.
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结膜下注射卡铂和环孢素联合治疗视网膜母细胞瘤的实验研究
[目的]观察结膜下注射卡铂治疗视网膜母细胞瘤(RB)的疗效和环孢素(CsA)对卡铂治疗RB的增效作用.[方法]40只RB成瘤裸鼠分8组(G1～G8),对照组(G1)结膜下注射生理盐水,全身用药组(G2)腹腔内注射卡铂350μg+环孢素1.0 mg,G3～G5组及G6～G8组分别结膜下注射卡铂100、200、350 μg及卡铂100、200、350 μg+CsA 1.0 mg,每周2次共3周.每天裂隙灯观察前房肿瘤情况并照相,第6周取眼球及结膜、巩膜作病理及图像处理,计算肿瘤面积及肿瘤抑瘤率.[结果]G2、G3、G6组肿瘤生长较G1组减缓,肿瘤未能控制.G4组肿瘤生长延缓,肿瘤控制率为40%.G5及G7组肿瘤无继续增大,部分肿瘤体积减少,肿瘤控制率和治愈率为60%和20%,G8组肿瘤全部控制,肿瘤控制率和治愈率为20%和80%,肿瘤基本消失.结膜下注射部位结膜和巩膜检查未见异常.图像处理及统计学分析显示,G3、G4、G6肿瘤面积和抑瘤率与G2之间无显著性差异(P＞0.05),G5、G7、G8组肿瘤面积和抑瘤率与G2之间有显著性差异(P＜0.05).[结论]结膜下注射卡铂能在较低剂量下抑制RB生长,加用CsA能提高卡铂治疗RB疗效.结膜下联合注射卡铂和CsA是一种安全有效的RB化疗方法.
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MELD评分对慢性重型乙型病毒性肝炎患者短期预后评价的价值
[目的]探讨终末期肝病模型(MELD)评分系统对预测慢性重型乙型病毒性肝炎患者短期预后的临床应用价值.[方法]164例慢性重型乙型病毒性肝炎患者临床资料按有无肝硬化进行分组,进行MELD评分,观察MELD分值的变化并比较慢性重型乙型病毒性肝炎患者的短期预后差异.[结果]①所观察病例的MELD评分均在20分以上(包括20分);其中肝硬化组(46例)的MELD值为31.89±1.07,慢性肝炎组(118例)为34.03±0.81,肝硬化组与慢性肝炎组间MELD分值比较,P＞0.05,无统计学差异,患者起病时有无肝硬化的基础,可能对慢性重型乙型病毒性肝炎患者的短期预后影响不大.②慢性重型乙型病毒性肝炎患者3个月内的病死率在20≤MELD＜30为42.4%(28/66),30≤MELD＜40为73.2%(52/71),MELD≥40为96.2%(26/27),MELD分值越高,病死率越高.[结论]MELD评分系统是一种适用于我国而且比较可靠的预测慢性重型乙型病毒性肝炎患者短期预后的方法.
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99Tcm-HL91脑乏氧显像检测急性脑卒中患者乏氧脑组织及其意义
[目的]评价99Tcm-HL91脑乏氧显像检测急性脑卒中患者乏氧脑组织及其意义.[方法]急性大脑梗塞患者57例(14例完全前循环梗塞,33例部分前循环梗塞,10例腔隙样梗塞)和脑出血患者12例(4例基底节区出血,8例大脑半球皮质出血)行99Tcm-HL91 SPECT/CT显像,部分患者与99Tcm-ECD血流灌注显像或/和18F-FDG代谢显像对照.显像结果与临床基础状况和随后的神经功能改变对比分析.[结果]①脑梗塞组:乏氧阳性共34例,阳性率为59.7%(34/57),发病＜12 h者,乏氧灶主要位于梗塞灶;而≥12 h者乏氧灶主要位于梗塞灶的边缘及其周围.②脑出血组:乏氧阳性3例,位于出血灶的周围,均为基底节区出血;脑实质出血患者均阴性.③部分前梗塞患者中,有脑血管基础疾病的患者乏氧阳性率45.5%(10/22),无基础疾病患者乏氧阳性率91%(10/11).④12例乏氧阳性患者中,于发病后7-42 d后再次或多次显像(多3次),仍见乏氧灶存在;但乏氧程度有不同程度的减轻,范围减少.其中7例乏氧明显减轻者,临床改善明显,肌力增加Ⅱ级以上.[结论]99Tcm-HL911能有效地检测急性脑卒中患者的乏氧脑组织:乏氧阳性率与脑梗塞的类型及脑出血的部位、是否存在严重的脑血管基础疾病等关系密切;乏氧的部位随时间的延长会从中央区向外周区扩大;乏氧脑组织存在预示较好的预后,应积极治疗.
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一氧化氮合酶与鼻咽癌血管形成及患者病程的关系
[目的]探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子在鼻咽癌组织中的表达及微血管密度与患者病程的关系.[方法]用免疫组化方法检测77例鼻咽癌患者活检石蜡包埋标本的诱生型一氧化氮合成酶、血管内皮生长因子的表达,用Ⅷ因子相关抗原(F8)显示血管内皮细胞,根据F8阳性的血管内皮细胞计数测定肿瘤微血管密度.[结果]诱生型一氧化氮合成酶、血管内皮生长因子在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为34%(26/77)、32%(25/77),诱生型一氧化氮合成酶表达与血管内皮生长因子表达、微血管密度、T/N分期均呈正相关(P＜0.05).[结论]诱生型一氧化氮合成酶在鼻咽癌血管形成及肿瘤浸润与转移中起到促进作用.
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不同镇痛方式对高龄肺癌手术后恢复的综合分析
[目的]观察3种不同的镇痛方式对高龄肺癌患者行肺叶切除术后康复的影响、镇痛效果及患者对术后镇痛方式的满意程度,以探讨佳的镇痛方式.[方法]选择60例老年肺癌患者行肺叶切除术(年龄＞60岁),随机分成3组:肌肉注射吗啡镇痛组,静脉自控镇痛组,硬膜外自控镇痛组.连续3 d观察患者的镇痛效果、满意程度、术后康复及术后并发症发生率的影响;检测术后3 d患者的肺活量动脉血气,连续监测患者的脉搏氧饱和度.[结果]硬膜外自控镇痛组镇痛效果、满意程度明显优于另外两组,低氧血症的发生率及程度明显低于另外两组.硬膜外自控镇痛组的患者术后床上活动的时间明显早于另外两组,并能主动配合医护人员进行肺功能的康复治疗.[结论]老年肺癌患者行肺叶切除术采用硬膜外自控镇痛具有镇痛效果良好,能主动配合医护工作者进行早期肺功能的康复治疗的优越性.
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特异性免疫治疗变应性鼻炎疗效的动态评估及其对哮喘的影响
[目的]探讨变应性鼻炎患者特异性免疫治疗(SIT)效果及其在防治支气管哮喘中的意义.[方法]对167例螨过敏的持续性变应性鼻炎患者,进行免疫治疗,检测各治疗时期患者血清总免疫球蛋白E(TIgE)、特异性免疫球蛋白E(SIgE)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)浓度,并评估其过敏症状的变化.[结果]变应性鼻炎特异性免疫治疗后症状改善(P＜0.01);儿童变应性鼻炎SIT效果较成人好(P＜0.01).此外,观察期满3年的49例接受系统免疫治疗的患者与未系统治疗患者23例发现,前者继发哮喘的几率低于后者,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01);对合并有哮喘的AR患者经SIT后,哮喘症状体征有改善;患者血清TIgE、SIgE和ECP在SIT治疗后水平逐渐降低.[结论]对儿童变应性鼻炎患者有明确变应原者,免疫治疗应予以考虑;检测患者血清TIgE、SIgE和ECP可了解SIT的疗效;对变应性鼻炎进行SIT对防治哮喘有重要意义.
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羊水细胞的荧光原位杂交用于胎儿染色体非整倍体的产前诊断
[目的]应用染色体特异性探针对羊水间期细胞进行FISH分析.[方法]对78例有产前诊断指征的孕妇进行羊水间期细胞的FISH分析及细胞核型分析.[结果]71例二倍体羊水样本,FISH诊断与细胞培养核型分析相符;染色体数目异常7例,FISH诊断出其中6例.间期细胞FISH的杂交率与探针类型、靶细胞种类及孕周有关.孕晚期羊水样本、母血污染的样本和快速杂交的样本,以及长时间放置的样本,FISH分析结果与核型分析完全符合.针对特异探针而言,染色体非整倍体的诊断准确率达100%.[结论]应用染色体特异性探针对羊水间期细胞进行FISH分析可用于胎儿染色体非整倍体的产前诊断,该方法简便快速、结论可靠.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
